久久一区二区免费播放,国产在线欧美日韩一区二区,国产综合色在线视频,精品伊人久久久香线蕉,精品视频麻豆网站,玖玖国产,国内精品久久久久影,在线观看精品视频一区二区三区,午夜久久影院,国产精品一区久久

一種茜素紅s絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種茜素紅S絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法，該方法包括：準(zhǔn)確移取1.5mL茜素紅S溶液、0.15mL?pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液，然后于每份上述溶液中分別加入0mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，加去離子水定容至5mL，混合均勻，靜置10min，于490nm處測定光吸收值，以鋁離子含量為橫坐標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制鋁離子標(biāo)準(zhǔn)曲線。本發(fā)明的檢測方法具有操作簡便、靈敏度高、測試結(jié)果準(zhǔn)確、選擇性好，符合測試精度要求。
【專利說明】一種茜素紅S絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及屬于分析檢測領(lǐng)域，具體涉及一種茜素紅S絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]鋁鹽被廣泛用于餐飲業(yè)中的餐具和食品添加劑，環(huán)境治理的水處理劑以及醫(yī)藥中的免疫佐劑等，已經(jīng)成為日常生活中不可缺少的一部分。然而，過量的鋁鹽隨食品、藥物、飲水等途徑一旦進入人體，就會表現(xiàn)出生物毒性效應(yīng)。有研究表明，老年性癡呆(阿爾茨海默病)、關(guān)島帕金森氏癡呆綜合癥、肌肉萎縮性脊髓側(cè)索硬化、和透析性腦病等神經(jīng)失調(diào)性疾病、骨軟化癥及小細(xì)胞貧血等都與鋁鹽的過量攝入有關(guān)，有關(guān)病癥被稱為鋁腦病、鋁骨病。這些研究為公眾健康敲響了警鐘，所以準(zhǔn)確、快速的測定鋁含量是保證食品安全與工業(yè)高效生廣的如提。
[0003]目前，鋁含量常見的測定方法主要有EDTA絡(luò)合滴定法、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP)及ICP質(zhì)譜法(ICP-MS)、石墨爐原子吸收光度法、分光光度法、熒光分析法以及極譜法等。其中以鉻天青作為顯色劑的分光光度法應(yīng)用最多，研究應(yīng)用也最為廣泛，但是該方法體系繁瑣，需要加入乳化劑和增敏劑作為樣品預(yù)處理(增溶)和方法靈敏度的手段之一。因此，本發(fā)明主要涉及一種基于茜素紅S絡(luò)合反應(yīng)的簡便、穩(wěn)定、靈敏度和準(zhǔn)確度高的測定鋁鹽中鋁離子含量的可見分光光度法。
[0004]茜素紅S (茜素磺酸鈉，Alizarin S，ARS)是光度分析中應(yīng)用比較廣泛的一種羥基蒽醌類試劑，能與許多金屬離子形成水溶性絡(luò)合物，主要用于測定Ga3+、In3+和稀土元素離子的測定。在試劑介紹中提到:茜素紅-S (茜素磺酸鈉)(檢驗鋁離子，pH = 4?9，產(chǎn)生玫瑰紅色沉淀)。
[0005]常規(guī)的茜素紅S分光光度法測定蛋白質(zhì)(趙丹華，茜素紅S標(biāo)記分光光度法測定微量人血清白蛋白，廣州第二師范學(xué)院學(xué)報，2011年10月，第31卷第5期:51-54)步驟為:于25mL比色管中加入pH = 5.10的3.0mL B-R緩沖溶液，4.00mL5.0 X 10_4mol/L茜素紅S，一定量的標(biāo)準(zhǔn)BSA溶液，稀釋至刻度，靜置20min，于λ = 420nm處吸光度A值，不加入BSA，按照上述步驟做空白，測定吸光度Atl值，以二次去離子水作為參比溶液，測定吸光度值，令ΔΑ = A0-A,以Λ A作為測定BSA的信號響應(yīng)。因此，茜素紅S可以被用作蛋白質(zhì)含量的測定，但是由于金屬離子對該測定方法的影響較大，不被作為常規(guī)蛋白質(zhì)定量的方法。常規(guī)的蛋白質(zhì)定量方法主要有考馬斯亮藍G250比色法和雙縮脲比色法。
[0006]本發(fā)明利用茜素紅S作為顯色劑，采用響應(yīng)面優(yōu)化法研究了反應(yīng)體系及反應(yīng)條件，最終獲得一種新的靈敏度高，選擇性好，準(zhǔn)確度高、簡便的測定鋁離子含量的實驗方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足及國標(biāo)法測試程序繁瑣、周期長、成本高的缺點，提供一種反應(yīng)體系簡便、靈敏度高、測試結(jié)果準(zhǔn)確，符合精度要求的基于茜素紅S絡(luò)合反應(yīng)的紫外可見分光光度法測定鋁離子含量的方法。
[0008]本發(fā)明提供了一種茜素紅S絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法，該方法包括:準(zhǔn)確移取1.5mL茜素紅S溶液、0.15mL pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液，然后于每份上述溶液中分別加入 0mL、0.lmL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL 招離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，加去離子水定容至5mL,混合均勻，靜置IOmin,于490nm處測定光吸收值，以鋁離子含量為橫坐標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制鋁離子標(biāo)準(zhǔn)曲線，其線性回歸方程為Y =
1.49305X+0.01071，相關(guān)系數(shù)r為0.99937，其中x代表鋁離子的濃度mg/mL，y代表吸光值。
[0009]上述方法中:
[0010]所述茜素紅S溶液由以下方法制備:稱取茜素紅S0.025g，溶于50mL無水乙醇中，用蒸懼水稀釋定容至100mL。
[0011]所述鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液由以下方法制備:稱取0.89g AlCl3.6H20(鋁含量為0.1g)，用去離子水溶解并定容至100mL。
[0012]所述磷酸氫二鈉溶液由以下方法制備:稱取磷酸氫二鈉0.716g，用去離子水溶解并定容至100mL。
[0013]所述檸檬酸溶液由以下方法制備:稱取檸檬酸0.21g，用去離子水溶解并定容至IOOmL0
[0014]所述pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液由以下方法制備:準(zhǔn)確移取46.75mL0.2mol/L憐酸氫二鈉溶液和53.25mL0.lmol/L朽1樣酸溶液，混勻至100mL。
[0015]本發(fā)明提供的方法適用于食品領(lǐng)域，主要用于無色透明液體飲料、可被硫酸消化處理的固體食品等。
[0016]本發(fā)明的特點是:
[0017]1、本發(fā)明提供的方法是利用顯色劑茜素紅S在酸性介質(zhì)中與鋁離子絡(luò)合反應(yīng)，創(chuàng)建了一種新的紫外可見分光光度法測定鋁離子的方法，其中關(guān)于反應(yīng)體系和吸收峰的確定為:
[0018]茜素紅S溶液本色為黃色，在pH4.6磷酸氫二鈉-檸檬酸酸性介質(zhì)中，與一定濃度的鋁離子形成穩(wěn)定絡(luò)合水溶物，顏色為紅色，利用紫外-可見分光光度計對反應(yīng)前后溶液進行全波長掃描，表明茜素紅S溶液最大光吸收峰在420nm處，與鋁離子反應(yīng)后溶液最大吸收峰在490nm。因此,確定了反應(yīng)體系為:pH4.6磷酸氫二鈉-朽1檬酸緩沖液、菌素紅S溶液和鋁離子溶液，檢測波長為490nm。
[0019]2、本發(fā)明主要是利用茜素紅S在酸性條件下，與金屬鋁離子反應(yīng)生成有色化合物，并隨著鋁離子濃度增加在490nm處光吸收值呈線性梯度增加，符合朗伯比爾定律。可溶性蛋白質(zhì)、糖以及諸多金屬離子對該方法影響較小，主要在于蛋白質(zhì)、部分金屬離子與茜素紅S的反應(yīng)最大吸收峰值不同,在490nm處的影響較小。本方法重在開發(fā)一種簡便的準(zhǔn)確測定金屬鋁離子的方法。
[0020]3、本發(fā)明提供的方法選擇性、重現(xiàn)性和精密性均好，操作簡單，適用測定濃度范圍寬，符合精度要求，不需要昂貴的大型儀器。
[0021]4、本發(fā)明的方法適用于無色透明液體飲料、可被硫酸消化處理的固體食品等中鋁離子含量的測定，食品中的蛋白質(zhì)、個別金屬離子Ga3+、In3+和稀土元素離子對本方法稍有影響，但影響較小?！緦＠綀D】

【附圖說明】
[0022]圖1:茜素紅S溶液的紫外-可見全波長掃描圖；
[0023]圖2:在酸性介質(zhì)中，茜素紅S與鋁離子絡(luò)合溶液的紫外-可見全波長掃描圖；
[0024]圖3:磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液添加量對反應(yīng)體系光吸收值的影響圖；
[0025]圖4:菌素紅S溶液添加量對反應(yīng)體系光吸收值的影響圖；
[0026]圖5:鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液添加量對反應(yīng)體系光吸收值的影響圖(線性范圍的確定)；
[0027]圖6:鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度梯度與光吸收值線性相關(guān)曲線圖。
【具體實施方式】
[0028]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0029]實施例1:溶液的預(yù)配制
[0030]1、茜素紅S溶液(0.25g/L)的制備稱取茜素紅S0.025g，溶于50mL無水乙醇中，用蒸懼水稀釋定容至100mL。
[0031]2、鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL)的制備:稱取0.89g AlCl3.6H20(鋁含量為0.1g)，
用去離子水溶解并定容至lOOmL。
[0032]3、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液的制備(pH4.6):準(zhǔn)確移取46.75mL0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和53.25mL0.lmol/L檸檬酸溶液，混勻至100mL。
[0033]實施例2:反應(yīng)體系與最大吸收峰的確定
[0034]茜素紅S溶液本色為黃色，在pH4.6磷酸氫二鈉-檸檬酸酸性介質(zhì)中，與一定濃度的鋁離子形成穩(wěn)定絡(luò)合水溶物，顏色為紅色，利用紫外-可見分光光度計對反應(yīng)前后溶液進行全波長掃描，結(jié)果見圖1和圖2。
[0035]圖1結(jié)果表明茜素紅S溶液最大光吸收峰在420nm處，圖2結(jié)果表明，與鋁離子反應(yīng)后溶液最大吸收峰在490nm。
[0036]因此，確定了反應(yīng)體系組分為:pH4.6磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、茜素紅S溶液和鋁離子溶液，檢測波長為490nm。
[0037]實施例3:反應(yīng)體系組分及條件的優(yōu)化
[0038]在實施例2的基礎(chǔ)上對反應(yīng)體系和反應(yīng)條件進行了優(yōu)化，分別研究了 0.25g/L茜素紅 S 溶液不同添加量(0.8mL、l.0mLU.2mL、l.5mL、l.8mL 和 2.0mL)、pH4.6 磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液添加量(0.lmL、0.15mL、0.20mL和0.25mL、)和1.0mg/mL鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液添加量(0.lmL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL 和 1.0mT,)對檢測方法靈敏度和準(zhǔn)確性的影響。
[0039]結(jié)果見圖3-5:
[0040]由圖3可知，在490nm處，在不同鋁濃度梯度下(0.2-0.7mL)下，緩沖液添加量為
0.15mL時，吸光值范圍比較寬，靈敏度好，故選擇0.15mL作為添加量；
[0041]由圖4可知:在490nm處，在不同鋁濃度梯度(0.2_0.7mL)下，茜素紅S溶液添加量在1.5mL?1.8mL范圍內(nèi)，吸光值范圍廣，靈敏度高，穩(wěn)定性好，從節(jié)約實驗成本的原則考慮，故選擇1.5mL作為添加量；
[0042]由圖5可見:在茜素紅S溶液添加量為1.5mL,磷酸氫二鈉-檸檬酸添加量為0.15mL時，鋁離子濃度梯度在0.0-0.7mL范圍內(nèi)，在490nm處的光吸收值梯度差異顯著(線性方程斜率值較大)，線性關(guān)系良好。
[0043]最終匯總得出最佳的反應(yīng)體系為:反應(yīng)體系總體積為5.0mL，不足用去離子水定容，其中茜素紅S溶液加入量為1.5mL、pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液加入量為
0.15mL和鋁離子的測定范圍為0.2-0.7mg/mL ;反應(yīng)條件為:室溫靜置IOmin后，于490nm處測定光吸收值。
[0044]實施例4:標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
[0045]取8支比色管，每支比色管中準(zhǔn)確移取1.5mL茜素紅S溶液、0.15mL pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液，分別加入 0mL、0.1mL,0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL 鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，加去離子水定容至5mL，混合均勻，靜置lOmin，于490nm處測定光吸收值，以鋁離子含量(mg/mL)為橫坐標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制鋁離子標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖6)。
[0046]由圖6可知:在茜素紅S溶液添加量為1.5mL，磷酸氫二鈉一檸檬酸添加量為
0.15mL時，鋁離子濃度梯度在0.0-0.7mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，線性相關(guān)方程為Y =
1.49305X+0.01071，R2 = 0.99937，其中x代表鋁離子的濃度(mg/mL)，y代表吸光值。(線性相關(guān)系數(shù)為r，主要用R2值來表示)
[0047]實施例5:方法學(xué)的考察
[0048]在實施例4的基礎(chǔ)上從重復(fù)性試驗、精密度試驗、加標(biāo)回收率試驗以及外源離子對反應(yīng)體系的影響四個方面對檢測方法進行驗證。重復(fù)性結(jié)果表明，隨機移取相同體積的鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL) 6份，按照上述方法對6份溶液進行測定，測得該6份樣品中的招離子含量分別為 0.52mg/mL、0.53mg/mL、0.49mg/mL、0.48mg/mL、0.51mg/mL 和 0.50mg/mL，重復(fù)性以其RSD值來估計，RSD為1.87%。說明該方法測定樣本中的鋁離子含量結(jié)果變化不大，重現(xiàn)性較好。精密度試驗結(jié)果表明，移取0.6mL鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg/mL)按照上述方法對此樣本連續(xù)進行測定6次，測得鋁離子含量分別為0.58mg/mL、0.56mg/mL、
0.62mg/mL、0.61mg/mL、0.64mg/mL 和 0.62mg/mL，精密性以其 RSD 值來估計，RSD 為 2.94%。說明該方法測定同一樣品中的鋁離子含量結(jié)果變化不大，穩(wěn)定性較好。加標(biāo)回收率試驗結(jié)果表明，在含有0.15μ g鋁離子的本底溶液中分別加入0.1 μ g、0.2μ g、0.3μ g、0.4μ g、
0.5 μ g標(biāo)準(zhǔn)鋁離子，測定結(jié)果如表1。
[0049]表1:加標(biāo)回收率試驗結(jié)果
[0050]
【權(quán)利要求】
1.一種茜素紅S絡(luò)合分光光度法測定鋁離子含量的方法，該方法包括:準(zhǔn)確移取1.5mL茜素紅S溶液、0.15mL pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液，然后于每份上述溶液中分別加A 0mL、0.lmL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL 招離子標(biāo)準(zhǔn)溶液，加去離子水定容至5mL，混合均勻，靜置lOmin，于490nm處測定光吸收值，以鋁離子含量為橫坐標(biāo)，光吸收值為縱坐標(biāo)，繪制鋁離子標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，最終制得的線性回歸方程為Y=1.49305X+0.01071, R2 = 0.99937，其中x代表鋁離子的濃度mg/mL，y代表吸光值。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述茜素紅S溶液由以下方法制備:稱取菌素紅s0.025g,溶于50mL無水乙醇中，用蒸懼水稀釋定容至lOOmL。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述鋁離子標(biāo)準(zhǔn)溶液由以下方法制備:稱取0.89g AlCl3.6H20(鋁含量為0.1g)，用去離子水溶解并定容至lOOmL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述磷酸氫二鈉溶液由以下方法制備:稱取磷酸氫二鈉0.716g，用去離子水溶解并定容至lOOmL。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述檸檬酸溶液由以下方法制備:稱取檸檬酸0.21g，用去離子水溶解并定容至lOOmL。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述pH4.6的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液由以下方法制備:準(zhǔn)確移取46.75mL0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液和53.25mL0.lmol/L檸檬酸溶液，混勻至lOOmL。
8.權(quán)利要求1-7任一項所述的方法用于檢測食品中的鋁離子含量。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，所述食品為無色透明液體飲料或可被硫酸消化處理的固體食品。
【文檔編號】G01N21/31GK103994980SQ201410174352
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】王曉力, 王永剛, 朱新強, 王春梅, 張茜, 路遠, 汪曉斌, 楊曉 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所