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一種實(shí)體熒光納米微球及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種實(shí)體熒光納米微球及其制備方法和應(yīng)用，屬于熒光檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明的實(shí)體熒光納米微球是由羧基羅丹明B與苯乙炔共價(jià)加成得到羅丹明B-苯乙烯，再由羅丹明B-苯乙烯與苯乙烯按照1:1～12的摩爾比聚合而成。本發(fā)明將熒光分子嵌入到聚苯乙烯的空間網(wǎng)絡(luò)中，得到的實(shí)體熒光微球具有微球間熒光強(qiáng)弱均勻一致、熒光強(qiáng)度高、信號(hào)放大倍數(shù)高等特點(diǎn)，由于微球表面沒有熒光分子的阻礙，微球能與蛋白進(jìn)行高效率、高產(chǎn)率的偶聯(lián)。且該微球產(chǎn)生的熒光背景低，不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的精確性，可廣泛應(yīng)用于診斷試劑中。
【專利說明】一種實(shí)體熒光納米微球及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及熒光檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種實(shí)體熒光納米微球及其制備方法和在免疫定量層析中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]側(cè)向?qū)游龇ㄔ诩膊】焖僭\斷、小分子快速檢測(cè)等領(lǐng)域已得到了廣泛的應(yīng)用。其原理是將特異性的抗原或抗體包被到硝酸纖維素膜上，構(gòu)成檢測(cè)線，將二抗包被在距離檢測(cè)線2?3毫米的區(qū)域構(gòu)成質(zhì)控線。當(dāng)樣本中的目標(biāo)分子與帶有特定標(biāo)記物的檢測(cè)抗體結(jié)合后，從硝酸纖維素膜的上樣端向吸水端層析。由于毛細(xì)管作用，復(fù)合物將沿著膜向前移動(dòng)，但移動(dòng)到檢測(cè)線時(shí)，樣品中的目標(biāo)分子將被檢測(cè)線中的捕獲抗體捕捉而停留在檢測(cè)線上，多余的檢測(cè)抗體則通過檢測(cè)線后被質(zhì)控線的二抗所捕捉。常用的標(biāo)記物為膠體金顆粒、酶以及著色微球。膠體金顆粒和著色微球是通過靜電吸附將抗原或抗體標(biāo)記到顆粒表面，通過觀察膠體金顆?；蛑⑶蛟跈z測(cè)線上的聚集顯色判斷檢測(cè)結(jié)果。而酶標(biāo)記則通過催化底物顯色，顯示檢測(cè)結(jié)果。以上標(biāo)記技術(shù)都是通過顯色和比色的方法來進(jìn)行檢測(cè)，存在依靠肉眼識(shí)別、靈敏度低、無法精確定量等缺點(diǎn)。
[0003]傳統(tǒng)的側(cè)向?qū)游霎a(chǎn)品主要是金標(biāo)試紙卡。金標(biāo)試紙卡是主要利用膠體金的電荷性通過靜電相互作用標(biāo)記抗體、層析顯色的檢測(cè)技術(shù)，該技術(shù)主要用于定性檢測(cè)，如早早孕等產(chǎn)品。隨著CXD圖像技術(shù)的發(fā)展，膠體金發(fā)展出半定量產(chǎn)品，即通過T線和C線顏色的深淺進(jìn)行定量檢測(cè)。但這種半定量檢測(cè)類似于照相比色定量技術(shù)，具有分辨率低，精確度低，誤差很大的缺點(diǎn)。
[0004]熒光標(biāo)記技術(shù)具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，已被廣泛用于生物檢測(cè)領(lǐng)域。如DNA測(cè)序、蛋白表達(dá)分析、細(xì)胞成像、活體成像、臨床診斷等。熒光微球技術(shù)是將聚苯乙烯羧基微球、熒光染料標(biāo)記系統(tǒng)、激光技術(shù)、應(yīng)用流體學(xué)及微球?qū)Ｓ昧魇郊?xì)胞儀等有機(jī)整合在一起的一項(xiàng)新技術(shù)，通過熒光微球信號(hào)來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集和分析，具有快速分析多重生物反應(yīng)的特點(diǎn)及高靈敏度和特異性，可用于抗原抗體、核酸探針檢測(cè)等領(lǐng)域的研究。
[0005]通常的熒光微球多為表面熒光微球，即將熒光分子通過特定的官能團(tuán)偶聯(lián)到微球表面制得，表面熒光微球存在熒光較弱、均一性較差等不足。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述問題，本發(fā)明提供了一種實(shí)體熒光納米微球的制備方法。
[0007]本發(fā)明建立了一種基于近紅外突光分子的聚苯乙烯材料合成突光納米微球的方法，將近紅外熒光分子偶聯(lián)到苯乙烯分子上，通過聚合反應(yīng)，整合到聚乙烯微球的分子內(nèi)部。獲得的微球?qū)儆趯?shí)體突光微球，突光很強(qiáng)，突光均一'I"生很好。
[0008]本發(fā)明的技術(shù)方案:
一種實(shí)體熒光納米微球的制備方法，是將羧基羅丹明B與苯乙炔共價(jià)加成得到羅丹明B-苯乙烯，再由羅丹明B-苯乙烯與苯乙烯按照1:1?12的摩爾比聚合，獲得實(shí)體熒光納米微球。具體合成路線參見圖1和圖2。
[0009]聚苯乙烯是一種無色透明的熱塑性塑料，質(zhì)地硬而脆，可以和多種染料混合產(chǎn)生不同的顏色。本發(fā)明所采用的熒光分子是羅丹明B，又稱玫瑰紅B、或堿性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮艷桃紅色的人工合成的染料，吸收波長(zhǎng)在540nm，屬于綠光區(qū)；最大發(fā)射波長(zhǎng)在610nm，屬于紅光區(qū)。540nm的激發(fā)光脫離了紫外光區(qū)，能量較小，對(duì)生物體不會(huì)產(chǎn)生較高的背景熒光，而且與610nm的吸收波長(zhǎng)相隔70nm的激發(fā)范圍，一般的生物材料產(chǎn)生的熒光達(dá)不到如此高的能量激發(fā)，因此產(chǎn)生的背景熒光更弱。
[0010]本發(fā)明將羧基羅丹明B分子和苯乙炔分子進(jìn)行1:1加成反應(yīng)，制得羅丹明B-苯乙烯，再將羅丹明B-苯乙烯和苯乙烯進(jìn)行聚合反應(yīng)，生成羅丹明B聚苯乙烯，再將羅丹明B聚苯乙烯制成不同粒徑的納米微球。
[0011]優(yōu)選地，所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，步驟如下:
(1)羅丹明B的DMSO(二甲基亞砜)溶液與苯乙炔的DMSO溶液混合，混合液中加入CuCl2的水溶液，混合得反應(yīng)體系，再加水，在惰性氣體保護(hù)下攪拌反應(yīng)2?4小時(shí)；
(2)步驟(I)反應(yīng)結(jié)束后，加入SDS(十二烷基磺酸鈉)、CHPO (過氧化羥基二異丙苯)、TEPA (四乙烯五胺)，以及苯乙烯的DMSO溶液，惰性氣體保護(hù)下攪拌反應(yīng)2?4h，獲得聚合物；
(3)聚合物經(jīng)過離心，取沉淀洗滌，干燥，得到實(shí)體熒光納米微球。
[0012]優(yōu)選地，步驟(I)所述羅丹明B的DMSO溶液中羅丹明B的濃度為0.1?lmol/L ；所述苯乙炔的DMSO溶液中苯乙炔的濃度為0.1?lmol/L ;所述CuCl2的水溶液中CuCl2的濃度為 0.05 ?0.5mol/L。
[0013]優(yōu)選地，步驟(I)加水的量與反應(yīng)體系的體積比為5?30:4。
[0014]優(yōu)選地，步驟(2)所述苯乙烯的DMSO溶液中苯乙烯濃度為0.5?5mol/L。
[0015]優(yōu)選地，所述惰性氣體為氮?dú)?；步驟(2)攪拌速度為1000?5000rpm，反應(yīng)溫度為41 ?43°C。
[0016]上述實(shí)體熒光納米微球的制備方法中，SDS作為乳化劑，CHPO和TEPA作為氧化-還原引發(fā)劑，其加入量可根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整，實(shí)現(xiàn)其各自功能即可，例如SDS在整個(gè)體系的終濃度為1.42?50.00g/L,CHP0在整個(gè)體系的終濃度為0.82?29.00g/L，TEPA在整個(gè)體系的終濃度為0.65?23.00g/L。
[0017]由上述實(shí)體熒光納米微球的制備方法獲得的實(shí)體熒光納米微球也在本發(fā)明保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0018]本發(fā)明還提供上述實(shí)體熒光納米微球在制備熒光檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。
[0019]基于上述實(shí)體熒光納米微球，可以采用側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)，制備近紅外免疫層析定量試紙條，例如硝酸纖維素膜上包被檢測(cè)線和質(zhì)控線抗體。在檢測(cè)過程中，利用熒光掃描儀，分別掃描質(zhì)控線和檢測(cè)線，激發(fā)熒光分子發(fā)光。熒光經(jīng)濾光片過濾后，被傳感器捕捉轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，經(jīng)光電倍增管再轉(zhuǎn)換成數(shù)字信號(hào)。將質(zhì)控線熒光強(qiáng)度校正檢測(cè)線熒光強(qiáng)度后代入熒光分析儀中的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可獲得樣本中待測(cè)物的含量。該方法與熒光分子直接標(biāo)記到納米微球表面相比，屬于實(shí)體熒光，熒光更強(qiáng)、更穩(wěn)定，顯著提高了檢測(cè)靈敏度，降低了背景熒光強(qiáng)度。該方法可廣泛用于食品、病毒、微生物、細(xì)胞因子、血液因子、毒品、危險(xiǎn)化學(xué)品的快速定量檢測(cè)和應(yīng)用。
[0020]本發(fā)明還提供一種熒光定量檢測(cè)試劑盒，包括:由本發(fā)明的實(shí)體熒光納米微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體和免疫層析試紙，檢測(cè)抗體能與待檢測(cè)物質(zhì)特異性結(jié)合；所述免疫層析試紙為固定有檢測(cè)線和質(zhì)控線的纖維層析材料，檢測(cè)線固定有與檢測(cè)抗體特異性結(jié)合的捕捉抗體，質(zhì)控線固定有其他抗體，所述其他抗體能與檢測(cè)抗體結(jié)合但不與待檢測(cè)物質(zhì)結(jié)合。
[0021]上述檢測(cè)試劑盒是利用夾心法檢測(cè)目標(biāo)分子(待檢測(cè)物質(zhì))，檢測(cè)時(shí)，在免疫層析試紙的檢測(cè)線上固定的是與目標(biāo)分子可以特異性結(jié)合的捕捉抗體，在質(zhì)控線上作為參照物固定的是與目標(biāo)分子和檢測(cè)線固定的分子無關(guān)的其他抗體，通常為山羊抗鼠多克隆抗體。熒光微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體被定量分裝到0.5mL EP管底部?jī)龈杀４?。?dāng)含有目標(biāo)分子的樣品與上樣緩沖液按1:1混勻，加入到檢測(cè)抗體的凍干管中，混勻，這時(shí)目標(biāo)分子與溶解后的熒光微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成抗原抗體復(fù)合物。然后把它們滴加到試紙的濾血墊上進(jìn)行層析?？乖贵w復(fù)合物及多余的沒結(jié)合抗原的熒光微球抗體隨溶液向試紙條上端移動(dòng)。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)線時(shí)，被固定在檢測(cè)線上的捕捉抗體所捕獲，而未結(jié)合抗原的熒光微球抗體則被質(zhì)控線的二抗所捕獲。反應(yīng)結(jié)束后，用熒光掃描儀掃描檢測(cè)線和質(zhì)控線的熒光的峰面積，并對(duì)峰面積進(jìn)行積分。由于所使用的熒光微球的量一定，故以質(zhì)控線的熒光的峰面積作為內(nèi)參，通過計(jì)算檢測(cè)線與質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的比值，并且與標(biāo)準(zhǔn)工作曲線進(jìn)行計(jì)算，就能夠得出樣品中目標(biāo)分子的濃度。
[0022]本發(fā)明還提供一種熒光定量檢測(cè)試劑盒，包括熒光微球抗體混合物和免疫層析試紙；熒光微球混合物包括本發(fā)明的實(shí)體熒光納米微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體和鼠IgG，檢測(cè)抗體為能與待檢測(cè)物質(zhì)特異性結(jié)合的單克隆抗體；免疫層析試紙為固定有檢測(cè)線和質(zhì)控線的纖維層析材料，檢測(cè)線固定有與待檢物質(zhì)特異性結(jié)合的BSA (牛血清白蛋白)偶聯(lián)物，質(zhì)控線固定有羊抗鼠內(nèi)參抗體。
[0023]上述檢測(cè)試劑盒是利用競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)目標(biāo)分子(待檢測(cè)物質(zhì)):在免疫層析試紙的檢測(cè)線上固定的是目標(biāo)分子-BSA偶聯(lián)物，在質(zhì)控線上固定的是內(nèi)參羊抗鼠。微球管中預(yù)先干燥了兩種熒光微球抗體的混合物，分別是抗目標(biāo)分子的單抗和鼠IgG。將樣品液和上樣緩沖液按1:1加入到微球中，混勻，滴加到試紙上，樣品中的目標(biāo)分子與它的微球單抗結(jié)合，迅速通過檢測(cè)線和質(zhì)控線；而多余的沒有飽和的微球單抗則被檢測(cè)線上的目標(biāo)分子捕捉，鼠IgG則被羊抗鼠多抗捕捉在質(zhì)控線。反應(yīng)結(jié)束后，掃描熒光強(qiáng)度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出樣品中目標(biāo)分子的濃度。目標(biāo)分子濃度越高，則檢測(cè)線的熒光強(qiáng)度越弱。
[0024]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
1、本發(fā)明米用的實(shí)體突光微球技術(shù)不同于一般的表面突光微球技術(shù)。表面突光微球技術(shù)是通過活化分子，對(duì)微球表面的羧基或氨基進(jìn)行活化后，將熒光分子通過取代反應(yīng)偶聯(lián)到微球表面，反應(yīng)過程由于必須在常溫常壓下進(jìn)行，往往造成偶聯(lián)反應(yīng)的不徹底，因此，得到的表面突光微球具有微球間突光強(qiáng)弱不均勻、突光強(qiáng)度低等缺點(diǎn)，還由于表面突光分子的覆蓋，往往還會(huì)造成蛋白分子偶聯(lián)的低效率和致死性。而本發(fā)明首先將熒光分子偶聯(lián)到苯乙烯分子上，合成得到熒光苯乙烯，再按一定的比例將熒光苯乙烯和苯乙烯混合，聚合成熒光聚苯乙烯。在聚合的過程中，熒光分子嵌入到聚苯乙烯的空間網(wǎng)絡(luò)中，得到實(shí)體熒光微球。本發(fā)明得到的實(shí)體熒光微球具有微球間熒光強(qiáng)弱均勻一致、熒光強(qiáng)度高、信號(hào)放大倍數(shù)高等特點(diǎn)，而且由于微球表面沒有熒光分子的阻礙，微球能與蛋白進(jìn)行高效率、高產(chǎn)率的偶聯(lián)。而且，本發(fā)明采用的是羅丹明B，激發(fā)波長(zhǎng)547nm，具有較高的能量，能完全激發(fā)微球內(nèi)部熒光分子的活化；吸收波長(zhǎng)610nm，屬于紅外波長(zhǎng)，所產(chǎn)生的熒光背景低，不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的精確性。
[0025]2、熒光微球用于診斷試劑，可以放大生物信號(hào)，極大提高靈敏度。根據(jù)粒徑的不同，本發(fā)明的每個(gè)實(shí)體微球中含有幾十至幾千個(gè)熒光分子，當(dāng)標(biāo)記了抗體的熒光微球與抗原偶聯(lián)后，單分子的抗原信號(hào)就被放大成幾百幾千倍的熒光信號(hào)，更易于被熒光掃描儀所捕捉。
[0026]3、實(shí)體熒光微球在側(cè)向?qū)游隹焖贆z測(cè)試劑的應(yīng)用中可用于生產(chǎn)高精度的定量產(chǎn)品。本發(fā)明利用實(shí)體突光微球技術(shù)，將突光微球標(biāo)記到抗體上，結(jié)合CMOS光感應(yīng)技術(shù),即使很微弱的熒光也可以捕捉到。因此，本發(fā)明所制備的快速檢測(cè)試紙具有高精度、高分辨率和低誤差的優(yōu)點(diǎn)，屬于全定量檢測(cè)產(chǎn)品。本發(fā)明解決了傳統(tǒng)熒光微球熒光較弱、熒光均一性差、信號(hào)放大不穩(wěn)定的問題，提高了檢測(cè)試劑中熒光的強(qiáng)度、均一性和靈敏度。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0027]圖1、是羅丹明B和苯乙炔水合成羅丹明B-苯乙烯的路線圖。
[0028]圖2、是苯乙烯和羅丹明B-苯乙烯按5:1的摩爾比聚合成羅丹明聚苯乙烯的路線圖，其中R基表示羅丹明B基團(tuán)。
[0029]圖3是免疫層析卡示意圖，其中，I濾血墊，2硝酸纖維素膜，3檢測(cè)線，4質(zhì)控線，5吸水墊。
[0030]圖4是NT-proBNP標(biāo)準(zhǔn)曲線，橫坐標(biāo)為NT-proBNP濃度，縱坐標(biāo)為信號(hào)值。
[0031]圖5是對(duì)NT-proBNP血液樣品的檢測(cè)結(jié)果圖，橫坐標(biāo)為熒光掃描范圍，縱坐標(biāo)為熒光強(qiáng)度。
[0032]圖6是對(duì)cTnl血液樣品的檢測(cè)結(jié)果圖，橫坐標(biāo)為熒光掃描范圍，縱坐標(biāo)為熒光強(qiáng)度。
【具體實(shí)施方式】
[0033]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以更好地理解本發(fā)明并能予以實(shí)施，但所舉實(shí)施例不作為對(duì)本發(fā)明的限定。實(shí)施例中使用的試劑、藥品均為市售商品。
[0034]實(shí)施例1:實(shí)體熒光納米微球的合成
1、將I?IOmmol的羅丹明B溶解于IOmL的DMSO中。
[0035]2、將I?IOmmol苯乙炔溶解于IOmL的DMSO中，然后與羅丹明B的DMSO溶液混
口 ο
[0036]3、在步驟2的反應(yīng)體系中加入20mL的I?IOmmol的CuCl2水溶液，在混合液中加入50?300mL的水，在室溫下以300rpm的轉(zhuǎn)速通氮?dú)獗Ｗo(hù)攪拌反應(yīng)2?4h。
[0037]4、在步驟3的反應(yīng)體系中加入0.5?5g十二烷基磺酸鈉(SDS)作為乳化劑，
0.29?2.9g過氧化羥基二異丙苯(CHPO)和0.23?2.3g四乙烯五胺(TEPA)作為氧化-還原引發(fā)劑，5?50mmol的苯乙烯的IOmL的DMSO溶液作為反應(yīng)劑，通入氮?dú)?N2),持續(xù)以1000?5000rmp的轉(zhuǎn)速攪拌，42°C聚合反應(yīng)2?4h。[0038]5、將所得聚合物在8000~1000Orpm的轉(zhuǎn)速下離心，取沉淀，用乙醇洗滌后真空干燥，即為近紅外實(shí)體熒光納米微球(以下簡(jiǎn)稱微球)，粒徑大小50~300納米。
[0039]表1不同轉(zhuǎn)速在聚合反應(yīng)中對(duì)微球粒徑大小的影響
【權(quán)利要求】
1.一種實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，由羧基羅丹明B與苯乙炔共價(jià)加成得到羅丹明B-苯乙烯，再由羅丹明B-苯乙烯與苯乙烯按照1:1?12的摩爾比聚合，獲得實(shí)體熒光納米微球。
2.權(quán)利要求1所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，步驟如下: (1)羅丹明B的DMSO溶液與苯乙炔的DMSO溶液混合，混合液中加入CuCl2的水溶液，混合得反應(yīng)體系，再加水，在惰性氣體保護(hù)下攪拌反應(yīng)2?4小時(shí)； (2)步驟(I)反應(yīng)結(jié)束后，加入SDS、CHPO,ΤΕΡΑ,以及苯乙烯的DMSO溶液，惰性氣體保護(hù)下攪拌反應(yīng)2?4h，獲得聚合物； (3)聚合物經(jīng)過離心，取沉淀洗滌，干燥，得到實(shí)體熒光納米微球。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)所述羅丹明B的DMSO溶液中羅丹明B的濃度為0.1?lmol/L ;所述苯乙炔的DMSO溶液中苯乙炔的濃度為0.1?lmol/L ;所述CuCl2的水溶液中CuCl2的濃度為0.05?0.5mol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，步驟(I)加水的量與反應(yīng)體系的體積比為5?30:4。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述苯乙烯的DMSO溶液中苯乙烯濃度為0.5?5mol/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法，其特征在于，所述惰性氣體為氮?dú)?；步驟(2)攪拌速度為1000?5000rpm，反應(yīng)溫度為41?43°C。
7.由權(quán)利要求1?6任一所述的實(shí)體熒光納米微球的制備方法獲得的實(shí)體熒光納米微球。
8.權(quán)利要求7所述的實(shí)體熒光納米微球在制備熒光檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。
9.一種熒光定量檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括:由權(quán)利要求7所述的實(shí)體熒光納米微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體和免疫層析試紙，檢測(cè)抗體能與待檢測(cè)物質(zhì)特異性結(jié)合； 所述免疫層析試紙為固定有檢測(cè)線和質(zhì)控線的纖維層析材料，檢測(cè)線固定有與檢測(cè)抗體特異性結(jié)合的捕捉抗體，質(zhì)控線固定有其他抗體，所述其他抗體能與檢測(cè)抗體結(jié)合但不與待檢測(cè)物質(zhì)結(jié)合。
10.一種突光定量檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括突光微球抗體混合物和免疫層析試紙； 熒光微球混合物包括由權(quán)利要求7所述的實(shí)體熒光納米微球標(biāo)記的檢測(cè)抗體和鼠IgG，檢測(cè)抗體為能與待檢測(cè)物質(zhì)特異性結(jié)合的單克隆抗體； 免疫層析試紙為固定有檢測(cè)線和質(zhì)控線的纖維層析材料，檢測(cè)線固定有與待檢物質(zhì)特異性結(jié)合的BSA偶聯(lián)物，質(zhì)控線固定有羊抗鼠內(nèi)參抗體。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK103940798SQ201410185839
【公開日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年5月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月5日
【發(fā)明者】鄭忠亮, 吳瓊水, 蔡磊, 朱輝 申請(qǐng)人:武漢紐康度生物科技有限公司