一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方法。鼻腔分泌物的處理液，包括依次使用的清洗液、消化液和保護(hù)液，先用清洗液對(duì)鼻腔分泌物進(jìn)行懸浮，同時(shí)用消化液對(duì)鼻腔分泌物中的粘性成分進(jìn)行裂解，并通過(guò)細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾和離心，去除雜質(zhì)和粘性物質(zhì)，然后加入保護(hù)液，使細(xì)胞在保護(hù)液中均勻分散，將均勻分散的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至細(xì)胞濾網(wǎng)，再將細(xì)胞濾網(wǎng)上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片上，固定，得到細(xì)胞分布薄而均勻，清晰美觀的細(xì)胞涂片，采用顯微鏡觀察時(shí)細(xì)胞分布均勻，具有代表性，不僅細(xì)胞無(wú)重疊，而且去除了阻礙觀察的粘液和雜質(zhì)的影響，并可以直接進(jìn)行免疫組化染色。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鼻腔分泌物的細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)臨床的診斷和治療具有很重要的意義。傳統(tǒng)的鼻分泌 物細(xì)胞學(xué)檢查是將分泌物或粘膜刮出物直接涂在載玻片中心，干燥固定后直接進(jìn)行染色處 理，但是，鼻分泌物含有大量的雜質(zhì)和粘性物質(zhì)，導(dǎo)致分泌物中的目的細(xì)胞不能在載玻片均 勻分散，不能進(jìn)行免疫組化染色；此外，分泌物中的雜質(zhì)還會(huì)對(duì)涂片的染色效果和結(jié)果的正 確判斷有著很大影響。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方法，以解決上述的問(wèn) 題。
[0004] 在本發(fā)明的實(shí)施例中提供了一種鼻腔分泌物的處理液，包括依次使用的清洗液、 消化液和保護(hù)液；
[0005] 所述清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、 重蒸水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 4g/L，所述甲醇 與所述重蒸水的體積比為1:0. 5?1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 1. 0?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉 與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1? 〇. 3g/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ;
[0006] 所述消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和 鹽酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為90?110g/L，所述磷酸氫二鈉與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸 水的質(zhì)量體積比為〇. 1?〇. 3g/L，所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ;
[0007] 所述保護(hù)液包括吐溫、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、 氯化鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫與所述重蒸水的體積比為0.04?0.06:1，所述乙二胺 四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 4g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為 1:0. 5?1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 0?1. 5g/L，所述磷酸二氫 鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1?0. 3g/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH 調(diào)至7. 2?7. 4。
[0008] 優(yōu)選地，所述吐溫為吐溫20、吐溫21、吐溫40、吐溫60、吐溫61、吐溫80、吐溫81 和吐溫85中的任一種或多種混合。
[0009] 優(yōu)選地，所述鼻腔分泌物的處理液還包括固定液I，所述固定液I由多聚甲醛、磷 酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽酸組成，所述多聚甲醛與所述重蒸水的 質(zhì)量體積比為35?45g/L,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 0?1. 5g/L, 所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的 質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1?0. 3g/L，所述鹽 酸將固定液I的pH調(diào)至7. 2?7. 4。
[0010] 優(yōu)選地，所述鼻腔分泌物的處理液還包括固定液II，所述固定液II由甲醇和丙酮 以體積比為1 :〇. 5?1. 5配制而成。
[0011] 鼻腔分泌物的處理方法包括以下步驟：
[0012] (a)取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至所述清洗液20?40ml中，加入所 述消化液，加入的所述消化液與所述清洗液的體積比為1?5 :100,振蕩器400?600rpm， 20?40分鐘振蕩混勻；
[0013] (b) 1500?2500rpm離心5?15分鐘，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入 20?40ml所述保護(hù)液并混勻，用孔徑為30?200 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0014] (C)將所述過(guò)濾液用孔徑為3?8μπι的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移 至載玻片上，得到細(xì)胞涂片；
[0015] (d)對(duì)所述細(xì)胞涂片進(jìn)行細(xì)胞固定，染色處理，然后通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞涂片。
[0016] 優(yōu)選地，在所述步驟（c)中，所述過(guò)濾液通過(guò)細(xì)胞涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片。
[0017] 優(yōu)選地，所述細(xì)胞涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片具體為：
[0018] 將所述細(xì)胞濾膜進(jìn)行負(fù)壓處理，當(dāng)細(xì)胞濾膜上覆蓋了 8?15%面積的細(xì)胞，負(fù)壓 吸引停止，所述過(guò)濾液中的細(xì)胞吸附在所述細(xì)胞濾膜表面；
[0019] 將所述細(xì)胞濾膜吸附有細(xì)胞的一側(cè)貼附在載玻片上，通過(guò)正壓鼓氣和靜電吸附作 用，使吸附在細(xì)胞濾膜表面的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片上，得到細(xì)胞涂片。
[0020] 優(yōu)選地，在所述（d)中，所述細(xì)胞固定采用本發(fā)明提供的固定液I或固定液II進(jìn) 行固定。
[0021] 優(yōu)選地，在所述（b)中，所述細(xì)胞濾網(wǎng)的孔徑為80?100 μ m。
[0022] 優(yōu)選地，在所述（a)中，采用取樣器對(duì)鼻腔分泌物進(jìn)行取樣。
[0023] 本發(fā)明實(shí)施例提供的鼻腔分泌物的處理液及其處理方法，采用清洗液對(duì)鼻腔分泌 物進(jìn)行懸浮，同時(shí)用消化液對(duì)鼻腔分泌物中的粘性成分進(jìn)行裂解，并通過(guò)細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾和 離心，去除雜質(zhì)和粘性物質(zhì)，然后加入保護(hù)液，使細(xì)胞在保護(hù)液中均勻分散，將均勻分散的 細(xì)胞轉(zhuǎn)移至細(xì)胞濾網(wǎng)，再將細(xì)胞濾網(wǎng)上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片上，固定，得到細(xì)胞分布薄而均 勻，清晰美觀的細(xì)胞涂片，采用顯微鏡觀察時(shí)細(xì)胞分布均勻，具有代表性，不僅細(xì)胞無(wú)重疊， 而且去除了阻礙觀察的粘液和雜質(zhì)的影響，并可以直接進(jìn)行免疫組化染色。
【專(zhuān)利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0024] 圖1示出了本發(fā)明實(shí)施例1細(xì)胞HE染色的顯微鏡100倍鏡下觀察圖；
[0025] 圖2示出了本發(fā)明實(shí)施例1對(duì)照組細(xì)胞HE染色的顯微鏡100倍鏡下觀察圖；
[0026] 圖3示出了本發(fā)明實(shí)施例2細(xì)胞HE染色的顯微鏡100倍鏡下觀察圖；
[0027] 圖4示出了本發(fā)明實(shí)施例2對(duì)照組細(xì)胞HE染色的顯微鏡100倍鏡下觀察圖；
[0028] 圖5示出了本發(fā)明實(shí)施例3中MUC5AC染色通過(guò)顯微鏡400倍鏡觀察圖；
[0029] 圖6示出了本發(fā)明實(shí)施例3中MUC5AC染色通過(guò)顯微鏡1000倍鏡觀察圖；
[0030] 圖7示出了本發(fā)明實(shí)施例3中MUC2染色通過(guò)顯微鏡400倍鏡觀察圖；
[0031] 圖8示出了本發(fā)明實(shí)施例3中MUC2染色通過(guò)顯微鏡1000倍鏡觀察圖；
[0032] 圖9示出了本發(fā)明實(shí)施例4中tubulin染色通過(guò)顯微鏡100倍鏡觀察圖；
[0033] 圖10示出了本發(fā)明實(shí)施例4中tubulin染色通過(guò)顯微鏡1000倍鏡觀察圖。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 下面通過(guò)具體的實(shí)施例子對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
[0035] 本發(fā)明實(shí)施例中提供了 一種鼻腔分泌物的處理液及其處理方法。
[0036] -種鼻腔分泌物的處理液，包括依次使用的清洗液、消化液和保護(hù)液；
[0037] 所述清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、 重蒸水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 4g/L，所述甲醇 與所述重蒸水的體積比為1:0. 5?1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 1. 0?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉 與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1? 〇. 3g/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ;
[0038] 所述消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和 鹽酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為90?110g/L，所述磷酸氫二鈉與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸 水的質(zhì)量體積比為〇. 1?〇. 3g/L，所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ;
[0039] 所述保護(hù)液包括吐溫、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、 氯化鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫與所述重蒸水的體積比為0.04?0.06:1，所述乙二胺 四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 4g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為 1:0. 5?1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 0?1. 5g/L，所述磷酸二氫 鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1?0. 3g/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH 調(diào)至7. 2?7. 4。
[0040] 本發(fā)明實(shí)施例提供的鼻腔分泌物的處理液及其處理方法，采用清洗液對(duì)鼻腔分泌 物進(jìn)行懸浮，根據(jù)分泌物中粘液的多少加入消化液，消化液對(duì)鼻腔分泌物中的粘性成分進(jìn) 行裂解，并通過(guò)細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾和離心，去除雜質(zhì)和粘性物質(zhì)，然后加入保護(hù)液，使細(xì)胞在保 護(hù)液中均勻分散，將均勻分散的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至細(xì)胞濾網(wǎng)，再將細(xì)胞濾網(wǎng)上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻 片上，固定，得到細(xì)胞分布薄而均勻，清晰美觀的細(xì)胞涂片，采用顯微鏡觀察時(shí)細(xì)胞分布均 勻，具有代表性，不僅細(xì)胞無(wú)重疊，而且去除了阻礙觀察的粘液和雜質(zhì)的影響，并可以直接 進(jìn)行免疫組化染色。
[0041] 吐溫（或聚山梨酯）為非離子型表面活性劑，具有很好的保護(hù)細(xì)胞的作用。優(yōu)選 地，所述吐溫為吐溫20、吐溫21、吐溫40、吐溫60、吐溫61、吐溫80、吐溫81和吐溫85中的 任一種或多種混合。
[0042] 為了得到更好的固定效果，優(yōu)選地，所述鼻腔分泌物的處理液還包括固定液I，所 述固定液I由多聚甲醛、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽酸組成，所 述多聚甲醛與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為35?45g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì) 量體積比為1. 0?1. 5g/L,所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 3g/L, 所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積 比為0. 1?0. 3g/L，所述鹽酸將固定液I的pH調(diào)至7. 2?7. 4。固定液I用于常規(guī)細(xì)胞形 態(tài)學(xué)觀察的細(xì)胞的固定，固定效果好。
[0043] 優(yōu)選地，所述鼻腔分泌物的處理液還包括固定液II，所述固定液II由甲醇和丙酮 以體積比為1 :〇. 5?1. 5配制而成。固定液II用于對(duì)細(xì)胞核觀察的細(xì)胞的固定，固定效果 好。
[0044] 鼻腔分泌物的處理方法包括以下步驟：
[0045] (a)取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至所述清洗液20?40ml中，加入所 述消化液，加入的所述消化液與所述清洗液的體積比為1?5 :100,振蕩器400?600rpm， 20?40分鐘振蕩混勻；
[0046] (b) 1500?2500rpm離心5?15分鐘，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入 20?40ml所述保護(hù)液并混勻，用孔徑為30?200 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0047] (c)將所述過(guò)濾液用孔徑為3?8 μ m的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移 至載玻片上，得到細(xì)胞涂片；
[0048] (d)對(duì)所述細(xì)胞涂片進(jìn)行細(xì)胞固定，染色處理，然后通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞涂片。
[0049] 本鼻腔分泌物的處理方法步驟簡(jiǎn)單易行，且得到的細(xì)胞涂片細(xì)胞分布薄而均勻， 清晰美觀的細(xì)胞涂片，采用顯微鏡觀察時(shí)細(xì)胞分布均勻，具有代表性，不僅細(xì)胞無(wú)重疊，而 且去除了阻礙觀察的粘液和雜質(zhì)的影響，并可以直接進(jìn)行免疫組化染色。
[0050] 其中，細(xì)胞固定中細(xì)胞涂片浸入固定液20?30分鐘，以達(dá)到更好的固定效果。在 所述步驟（b)中，離心采用1500?2500rpm離心5?15分鐘，足以分散細(xì)胞，又不破壞細(xì) 胞形態(tài)。
[0051] 優(yōu)選地，在所述步驟（c)中，所述過(guò)濾液通過(guò)細(xì)胞涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片。使用細(xì)胞 涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片，效率高，節(jié)約人力，且得到的細(xì)胞涂片細(xì)胞分布均勻。
[0052] 優(yōu)選地，所述細(xì)胞涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片具體為：
[0053] 將所述細(xì)胞濾膜進(jìn)行負(fù)壓處理，當(dāng)細(xì)胞濾膜上覆蓋了 8?15%面積的細(xì)胞，負(fù)壓 吸引停止，所述過(guò)濾液中的細(xì)胞吸附在所述細(xì)胞濾膜表面；
[0054] 將所述細(xì)胞濾膜吸附有細(xì)胞的一側(cè)貼附在載玻片上，通過(guò)正壓鼓氣和靜電吸附作 用，使吸附在細(xì)胞濾膜表面的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片上，得到細(xì)胞涂片。
[0055] 采用這種方式制作細(xì)胞涂片，細(xì)胞的雜質(zhì)含量少，通過(guò)控制細(xì)胞濾膜上的覆蓋細(xì) 胞的數(shù)量，可以避免細(xì)胞的重疊，且細(xì)胞在載玻片上分布薄且均勻，制得的細(xì)胞涂片進(jìn)行觀 察，清晰美觀，細(xì)胞分布均勻，具有代表性，不僅細(xì)胞無(wú)重疊，而且去除了阻礙觀察的粘液和 雜質(zhì)的影響，并可以直接進(jìn)行免疫組化染色。
[0056] 固定液I用于常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察的細(xì)胞的固定；固定液II用于對(duì)細(xì)胞核觀察的 細(xì)胞的固定；兩者根據(jù)不同的細(xì)胞固定的觀察目的而使用，且兩者固定效果好。優(yōu)選地，在 所述（d)中，所述細(xì)胞固定采用本發(fā)明提供的固定液I或固定液II進(jìn)行固定。
[0057] 細(xì)胞直徑為10?20 μ m，細(xì)胞濾網(wǎng)是將液體成份中大于細(xì)胞體積的雜質(zhì)成份過(guò)濾 掉。優(yōu)選地，在所述（b)中，所述細(xì)胞濾網(wǎng)的孔徑為80?100 μ m。
[0058] 優(yōu)選地，在所述（a)中，采用取樣器對(duì)鼻腔分泌物進(jìn)行取樣。
[0059] 鼻腔分泌物取樣器，包括：刷頭、刷體和刷柄，所述刷頭和刷柄分別位于所述刷體 的兩端；
[0060] 所述刷頭的長(zhǎng)度為3?30mm，寬度為1?5mm，厚度為2?10mm ;所述刷體的長(zhǎng)度 為50?80mm,所述刷柄的長(zhǎng)度為50?80mm ;
[0061] 所述刷頭為柱體，所述刷頭的前端端面和其側(cè)面分別設(shè)置有刷毛。
[0062] 優(yōu)選地，所述刷體和所述刷柄之間還設(shè)置有銜接部；
[0063] 所述銜接部的一端與所述刷體連接，另一端與所述刷柄連接，所述刷體與所述刷 柄分別位于所述銜接部的兩側(cè)，所述刷柄和所述刷體的延長(zhǎng)線之間的夾角為0?30度。 [0064] 優(yōu)選地，所述刷毛的橫截面為圓形或橢圓形或十字形或多邊形。
[0065] 優(yōu)選地，所述刷毛的材質(zhì)為聚酰胺6,所述刷毛的橫截面直徑為0. 05?0. 5mm。
[0066] 優(yōu)選地，所述刷毛的長(zhǎng)度為2?5mm。
[0067] 優(yōu)選地，所述刷毛在距所述端面或所述側(cè)面的邊緣0. 1?5mm處設(shè)置。
[0068] 優(yōu)選地，所述刷柄呈長(zhǎng)條狀，所述刷柄的橫截面為扁平狀或圓柱狀，其寬度或直徑 為2?10mm η
[0069] 優(yōu)選地，所述刷體的寬度沿所述刷頭的方向逐漸減小，所述刷體與所述銜接部連 接的部位其寬度為4?6mm，所述刷體與所述刷頭連接的部位其寬度為2?3mm。
[0070] 優(yōu)選地，所述刷柄的表面設(shè)置有防滑槽。
[0071] 刷頭的長(zhǎng)度為3?30mm，刷頭的寬度為1?5mm，刷頭的厚度為2?10mm，刷體的 長(zhǎng)度為50?80mm，刷柄的長(zhǎng)度為50?80mm，鼻腔分泌物取樣器的大小與鼻孔相適；刷頭為 柱體，刷頭的端面和側(cè)面設(shè)置有刷毛。通過(guò)在刷頭側(cè)面設(shè)置的刷毛在鼻腔刷取，來(lái)收集鼻腔 側(cè)壁上的分泌物；通過(guò)在刷頭前端設(shè)置的刷毛，可以精準(zhǔn)定位刷取指定范圍的分泌物，收集 的樣本定位點(diǎn)準(zhǔn)確且更為全面，此外，采用刷毛收集分泌物后，刷毛直接在溶液中涮洗，刷 毛本身沒(méi)有殘留物，并且不會(huì)對(duì)標(biāo)本產(chǎn)生額外的干擾物。
[0072] 實(shí)施例1
[0073] 清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸 水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 3g/L，所述甲醇與所述重蒸 水的體積比為1:1，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 44g/L，所述磷酸二氫 鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 24g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為8g/ L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 3 ;
[0074] 消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽 酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為l〇〇g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水 的質(zhì)量體積比為1. 44g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 24g/L，所述氯 化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為8g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/ L，所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 3 ;
[0075] 保護(hù)液包括吐溫-20、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化 鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫-20與所述重蒸水的體積比為0.05:1，所述乙二胺四乙酸與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇.3g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為1:1，所述磷酸氫二 鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 44g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 0. 24g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為8g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量 體積比為0. 2g/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH調(diào)至7. 3。
[0076] 固定液I，由多聚甲醛、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽酸組 成，所述多聚甲醛與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為40g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì) 量體積比為1. 44g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 24g/L，所述氯化鈉 與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為8g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所 述鹽酸將固定液I的pH調(diào)至7. 3。
[0077] 鼻腔分泌物的處理方法，包括以下步驟：
[0078] (a)采用取樣器取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至清洗液20ml中，加入 0. 2ml消化液，用振蕩器500rpm，20min，振蕩混勻；
[0079] (b)用離心機(jī)離心，2000rpm，lOmin，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入30ml 保護(hù)液并混勻，用孔徑為1〇〇 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0080] (c)將過(guò)濾液用孔徑為3μπι的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片 上，得到細(xì)胞涂片；
[0081] (d)采用固定液I對(duì)細(xì)胞涂片進(jìn)行細(xì)胞固定，固定液對(duì)細(xì)胞涂片上的細(xì)胞固定是 將細(xì)胞涂片直接浸沒(méi)在固定液20min，用于常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察，然后進(jìn)行HE染色處理，HE 染色按常規(guī)方法進(jìn)行，然后通過(guò)顯微鏡100倍觀察細(xì)胞涂片，結(jié)果如圖1所示；對(duì)照組采用 常規(guī)的方式處理鼻腔分泌物然后進(jìn)行HE染色處理，然后通過(guò)顯微鏡100倍觀察細(xì)胞涂片， 結(jié)果如圖2所示。從圖1可以看出，細(xì)胞分散效果好，且基本沒(méi)有重疊現(xiàn)象，而圖2中細(xì)胞 重疊嚴(yán)重，分散性差。
[0082] 實(shí)施例2
[0083] 清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸 水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所述甲醇與所述重蒸 水的體積比為1:0. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. Og/L，所述磷酸二 氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/ L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. lg/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 2 ;
[0084] 消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽 酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為90g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的 質(zhì)量體積比為1. 〇g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所述氯化鈉 與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. lg/L，所 述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 2;
[0085] 保護(hù)液包括吐溫-80、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化 鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫-80與所述重蒸水的體積比為0.04:1，所述乙二胺四乙酸與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為1:0. 5,所述磷酸氫 二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 0. 2g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量 體積比為0. lg/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH調(diào)至7. 2。
[0086] 固定液I，由多聚甲醛、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽酸組 成，所述多聚甲醛與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為35g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì) 量體積比為1. 〇g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所述氯化鈉與 所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. lg/L，所述 鹽酸將固定液I的pH調(diào)至7. 2。
[0087] 鼻腔分泌物的處理方法，包括以下步驟：
[0088] (a)采用取樣器取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至清洗液20ml中，加入 0. 2ml消化液，用振蕩器500rpm，20min，振蕩混勻；
[0089] (b)用離心機(jī)離心，2000rpm，lOmin，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入30ml 保護(hù)液并混勻，用孔徑為80 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0090] (c)將過(guò)濾液用孔徑為3μπι的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片 上，得到細(xì)胞涂片；
[0091] (d)采用固定液I對(duì)細(xì)胞涂片進(jìn)行細(xì)胞固定，固定液對(duì)細(xì)胞涂片上的細(xì)胞固定是 將細(xì)胞涂片直接浸沒(méi)在固定液20min，用于常規(guī)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察，然后進(jìn)行HE染色處理，HE 染色按常規(guī)方法進(jìn)行，通過(guò)顯微鏡100倍觀察細(xì)胞涂片，結(jié)果如圖3所示；對(duì)照組采用常規(guī) 的方式處理鼻腔分泌物然后進(jìn)行HE染色處理，然后通過(guò)顯微鏡100倍觀察細(xì)胞涂片，結(jié)果 如圖4所示。從圖3可以看出，細(xì)胞分散效果好，且基本沒(méi)有重疊現(xiàn)象，而圖4中細(xì)胞重疊 嚴(yán)重，分散性差。
[0092] 實(shí)施例3
[0093] 清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸 水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇.4g/L，所述甲醇與所述重蒸 水的體積比為1:1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 5g/L，所述磷酸二 氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為9g/ L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 3g/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 4 ;
[0094] 消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽 酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為ll〇g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水 的質(zhì)量體積比為1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 3g/L，所述氯化 鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 3g/L， 所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 4 ;
[0095] 保護(hù)液包括吐溫-20、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化 鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫-20與所述重蒸水的體積比為0.06:1，所述乙二胺四乙酸與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇.4g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為1:1. 5,所述磷酸氫 二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 〇. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量 體積比為0. 3g/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH調(diào)至7. 4。
[0096] 固定液II由甲醇和丙酮以體積比為1 :0. 5配制而成。
[0097] 鼻腔分泌物的處理方法，包括以下步驟：
[0098] (a)采用取樣器取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至清洗液40ml中，加入 lml消化液，用振蕩器600rpm，30min，振蕩混勻；
[0099] (b)用離心機(jī)離心，1500rpm，15min，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入40ml 保護(hù)液并混勻，用孔徑為200 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0100] (c)將過(guò)濾液用孔徑為8μπι的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片 上，得到細(xì)胞涂片；
[0101] (d)采用固定液II進(jìn)行固定，用于對(duì)細(xì)胞核的觀察，固定液對(duì)細(xì)胞涂片上的細(xì)胞 固定是將細(xì)胞涂片直接浸沒(méi)在固定液l〇min，取出，然后進(jìn)行免疫組化染色，MUC5AC染色和 MUC2染色，分別通過(guò)顯微鏡400倍和1000倍觀察細(xì)胞涂片，MUC5AC染色通過(guò)顯微鏡400倍 如圖5所示；MUC5AC染色通過(guò)顯微鏡1000倍如圖6所示；MUC2染色通過(guò)顯微鏡400倍如圖 7所示；MUC2染色通過(guò)顯微鏡1000倍如圖8所示。從圖5?8中可以看出，細(xì)胞染色效果 非常好，且觀察背景純凈，無(wú)其他雜質(zhì)干擾。
[0102] 實(shí)施例4
[0103] 清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸 水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2g/L，所述甲醇與所述重蒸 水的體積比為1:0. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. Og/L，所述磷酸二 氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/ L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. lg/L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 2 ;
[0104] 消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽 酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為l〇〇g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水 的質(zhì)量體積比為1. 〇g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2g/L，所述氯化 鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. lg/L， 所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 2 ;
[0105] 保護(hù)液包括吐溫-60、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化 鉀、重蒸水和鹽酸，所述吐溫-60與所述重蒸水的體積比為0.04:1，所述乙二胺四乙酸與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為1:0. 5,所述磷酸氫 二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為 0. 2g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量 體積比為0. lg/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH調(diào)至7. 2。
[0106] 固定液II由甲醇和丙酮以體積比為1 :1. 5配制而成。
[0107] 鼻腔分泌物的處理方法，包括以下步驟：
[0108] (a)采用取樣器取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至清洗液30ml中，加入 0. 3ml消化液，用振蕩器400rpm，40min，振蕩混勻；
[0109] (b)用離心機(jī)離心，2500rpm，5min，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入20ml 保護(hù)液并混勻，用孔徑為30 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液；
[0110] (C)將過(guò)濾液用孔徑為5μπι的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片 上，得到細(xì)胞涂片；
[0111] (d)采用固定液II進(jìn)行固定，用于對(duì)細(xì)胞核的觀察，固定液對(duì)細(xì)胞涂片上的細(xì) 胞固定是將細(xì)胞涂片直接浸沒(méi)在固定液15min，取出，然后進(jìn)行免疫組化染色，然后進(jìn)行 tubulin染色，分別通過(guò)顯微鏡100倍（圖9)和1000倍（圖10)觀察細(xì)胞涂片。從圖9和 圖10中可以看出，細(xì)胞染色效果非常好，且觀察背景純凈，無(wú)其他雜質(zhì)干擾。
[0112] 本發(fā)明提供的鼻腔分泌物的處理液及其處理方法，不僅繼承了傳統(tǒng)檢查方法的所 有優(yōu)點(diǎn)，更解決傳統(tǒng)分泌物涂片技術(shù)存在細(xì)胞丟失、不能全部被染色、分泌物中粘性液體、 雜質(zhì)存在和細(xì)胞不能均勻分散、重疊等對(duì)結(jié)果正確判斷的影響問(wèn)題。采用本發(fā)明提供的鼻 腔分泌物的處理液及其處理方法，使鼻分泌物中的有效目的細(xì)胞呈單層、均勻地平鋪到載 玻片上，制成細(xì)胞成份豐富、背景清晰、形態(tài)完整、分布均勻的超薄細(xì)胞涂片，并可以直接進(jìn) 行免疫組化染色，對(duì)結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性大大提高。
[0113] 以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技 術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修 改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1. 一種鼻腔分泌物的處理液，其特征在于，包括依次使用的清洗液、消化液和保護(hù)液； 所述清洗液包括乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸 水和鹽酸，所述乙二胺四乙酸與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 4g/L，所述甲醇與所 述重蒸水的體積比為1:0. 5?1. 5,所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 0? 1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述 重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 1?0. 3g/ L，所述鹽酸將清洗液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ; 所述消化液包括二硫蘇糖醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重蒸水和鹽 酸，所述二硫蘇糖醇與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為90?110g/L，所述磷酸氫二鈉與所述重 蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為0. 2? 〇. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所述重蒸水的 質(zhì)量體積比為〇. 1?〇. 3g/L，所述鹽酸將消化液pH調(diào)至7. 2?7. 4 ; 所述保護(hù)液包括吐溫、乙二胺四乙酸、甲醇、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、 重蒸水和鹽酸，所述吐溫與所述重蒸水的體積比為〇. 04?0. 06:1，所述乙二胺四乙酸與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 4g/L，所述甲醇與所述重蒸水的體積比為1:0. 5?1. 5， 所述磷酸氫二鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸 水的質(zhì)量體積比為〇. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所 述氯化鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 1?〇. 3g/L，所述鹽酸將保護(hù)液pH調(diào)至7. 2? 7. 4。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼻腔分泌物的處理液，其特征在于，所述吐溫為吐溫20、吐溫 21、吐溫40、吐溫60、吐溫61、吐溫80、吐溫81和吐溫85中的任一種或多種混合。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼻腔分泌物的處理液，其特征在于，所述鼻腔分泌物的處理 液還包括固定液I，所述固定液I由多聚甲醛、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、重 蒸水和鹽酸組成，所述多聚甲醛與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為35?45g/L，所述磷酸氫二 鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為1. 〇?1. 5g/L，所述磷酸二氫鉀與所述重蒸水的質(zhì)量體積 比為0. 2?0. 3g/L，所述氯化鈉與所述重蒸水的質(zhì)量體積比為7?9g/L，所述氯化鉀與所 述重蒸水的質(zhì)量體積比為〇. 1?〇. 3g/L，所述鹽酸將固定液I的pH調(diào)至7. 2?7. 4。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的鼻腔分泌物的處理液，其特征在于，所述鼻腔分泌物的處理 液還包括固定液II，所述固定液II由甲醇和丙酮以體積比為1 :0.5?1.5配制而成。
5. 采用權(quán)利要求1或2所述的處理液進(jìn)行鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，包括以 下步驟： (a) 取鼻腔分泌物，將得到的鼻腔分泌物轉(zhuǎn)移至所述清洗液20?40ml中，加入所述消 化液，加入的所述消化液與所述清洗液的體積比為1?5 :100,振蕩器400?600rpm，20? 40分鐘振蕩混勻； (b) 1500?2500rpm離心5?15分鐘，棄去上清，輕輕震散開(kāi)底部的沉淀，加入20? 40ml所述保護(hù)液并混勻，用孔徑為30?200 μ m細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾，收集過(guò)濾液； (c) 將所述過(guò)濾液用孔徑為3?8 μ m的細(xì)胞濾膜過(guò)濾，將細(xì)胞濾膜上的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載 玻片上，得到細(xì)胞涂片； (d) 對(duì)所述細(xì)胞涂片進(jìn)行細(xì)胞固定，染色處理，然后通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞涂片。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，在所述步驟（c)中，所 述過(guò)濾液通過(guò)細(xì)胞涂片機(jī)制作細(xì)胞涂片。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，所述細(xì)胞涂片機(jī)制作 細(xì)胞涂片具體為： 將所述細(xì)胞濾膜進(jìn)行負(fù)壓處理，當(dāng)細(xì)胞濾膜上覆蓋了 8?15%面積的細(xì)胞，負(fù)壓吸引 停止，所述過(guò)濾液中的細(xì)胞吸附在所述細(xì)胞濾膜表面； 將所述細(xì)胞濾膜吸附有細(xì)胞的一側(cè)貼附在載玻片上，通過(guò)正壓鼓氣和靜電吸附作用， 使吸附在細(xì)胞濾膜表面的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至載玻片上，得到細(xì)胞涂片。
8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，在所述（d)中，所述細(xì) 胞固定采用權(quán)利要求3中的固定液I或權(quán)利要求4中的固定液II進(jìn)行固定。
9. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，在所述（b)中，所述細(xì) 胞濾網(wǎng)的孔徑為80?100 μ m。
10. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的鼻腔分泌物的處理方法，其特征在于，在所述（a)中，采用取 樣器對(duì)鼻腔分泌物進(jìn)行取樣。
【文檔編號(hào)】G01N1/28GK104215490SQ201410497784
【公開(kāi)日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年9月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月25日
【發(fā)明者】張羅, 佘文煜, 楊軍 申請(qǐng)人:張羅, 佘文煜
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