一種光甘草定含量的測定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種光甘草定含量的測定方法,包括(1)設定高效液相色譜條件;(2)制備對照品溶液;(3)制備供試品溶液;(4)利用高效液相色譜法,且通過梯度洗脫的方式進行含量測定。本發(fā)明所述的方法具有專一性,能夠準確的測定光甘草定的含量,而采用梯度洗脫進行分析,具有很好的分離效果,能夠有效縮短分析時間,因此,具有所測成分分離度、線性關系、重現(xiàn)性、精密度、穩(wěn)定性、回收率均較好的優(yōu)勢,能夠準確,簡便,快捷的得到光甘草定的含量。
【專利說明】一種光甘草定含量的測定方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種光甘草定含量的測定方法,屬于含量檢測方法【技術領域】。
【背景技術】
[0002]甘草為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草 G.1nf IataBat.或光果甘草G.glabraL.的干燥根及根莖,具有補脾益氣,清熱解毒,祛痰止咳,緩急止痛,調和諸藥的功能。光果甘草中還含有特有的黃酮類成分光甘草定,它具有較強的抗炎,抗氧化和抗菌作用,應用前景廣闊。
[0003]光甘草定能深入皮膚內部并保持高活性,美白并高效抗氧化。有效抑制黑色素生成過程中多種酶的活性,特別是抑制酪胺酸酵素活性。同時還具有防止皮膚粗糙和抗炎、抗菌的功效。光甘草定是目前療效好、功能全面的美白成分。光甘草經過多年來的使用,作用明顯,安全性好。是目前國際上高檔美白化妝品的主要功效成分。
[0004]在專利號為201110230297.7的專利《香草醛-硫酸比色法測定光甘草定含量的方法》一文中采用香草醛-硫酸顯色后,利用比色法來測定光甘草定的含量,但是香草醛-硫酸是一種通用顯色劑,針對光甘草定不具有專一性,可見用來測定待測物種一類化合物的含量,比如說甘草中總黃酮的含量,其包括但不僅僅是光甘草定的含量。
[0005]而在《高效液相色譜法測定光果甘草中光甘草定的含量》等相關文獻報導中,采用等度洗脫的方式,但光甘草定分離度不佳。
【發(fā)明內容】
[0006]為了克服現(xiàn)有技術問題,本發(fā)明的目的在于提供一種簡便、快捷、重復性好的光甘草定含量的測定方法。
[0007]為解決上述技術問題,本發(fā)明采用的技術方案為:
一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,包括以下步驟:
(O設定高效液相色譜條件:溫度為室溫,相對濕度為25~40%,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈為流動相A,以濃度為1%冰醋酸溶液為流動相B,洗脫方式為梯度洗脫,流速為0.8~1.2ml/min,柱溫為25~40°C,檢測波長為278~282nm ;
(2)制備對照品溶液:將光甘草定對照品用有機溶劑溶解,形成對照品溶液,且所述的對照品溶液中,光甘草定對照品的濃度為0.1 "0.5mg/ml ;
(3)制備供試品溶液:將光甘草定粗提物用有機溶劑利用超聲溶解5~20min,然后,冷卻至室溫,得到供試品溶液,且所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為0.2^2mg/ml ;
(4)含量測定:分別取對照品溶液和供試品溶液各20μ 1,注入液相色譜儀,進行高效液相色譜儀的操作,并記錄色譜圖,然后,利用色譜圖計算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
[0008]進一步,步驟(1)中,所述的室溫的溫度優(yōu)選為20°C,相對濕度優(yōu)選為35%,洗脫時的流速優(yōu)選為lml/min,柱溫優(yōu)選為30°C,檢測波長優(yōu)選為280nm。
[0009]此外,步驟(1)中,所述的梯度洗脫中流動相A和流動相B在不同的時間段的濃度關系如下表所示:
【權利要求】
1.一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,包括以下步驟: (O設定高效液相色譜條件:溫度為室溫,相對濕度為25~40%,以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈為流動相A,以濃度為1%冰醋酸溶液為流動相B,洗脫方式為梯度洗脫,流速為0.8~1.2ml/min,柱溫為25~40°C,檢測波長為278~282nm ; (2)制備對照品溶液:將光甘草定對照品用有機溶劑溶解,形成對照品溶液,且所述的對照品溶液中,光甘草定對照品的濃度為0.1 ~0.5mg/ml ; (3)制備供試品溶液:將光甘草定粗提物用有機溶劑利用超聲溶解5~20min,然后,冷卻至室溫,得到供試品溶液,且所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為0.2~2mg/ml ; (4)含量測定:分別取對照品溶液和供試品溶液各20μ 1,注入液相色譜儀,進行高效液相色譜儀的操作,并記錄色譜圖,然后,利用色譜圖計算光甘草定粗提物中光甘草定的含量。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(1)中,所述的室溫的溫度為20°C,相對濕度為35%,洗脫時的流速為lml/min,柱溫為30°C,檢測波長為 280nm。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(1)中,所述的梯度洗脫中流動相A和流動相B在不同的時間段的濃度關系如下表所示:
4.根據(jù)權利要求1或3所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(1)中,所述的梯度洗脫中流動相A和流動相B在不同的時間段的濃度關系如下表所示:
5.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(2)和步驟(3)中所述的有機溶劑為濃度為30-60%的甲醇。
6.根據(jù)權利要求5所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(2)和步驟(3)中所述的有機溶劑為濃度為40%的甲醇。
7.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(2)中,所述的對照品溶液中,光甘草定對照品的濃度為0.2mg/mlo
8.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(3)中,所述的供試品溶液中光甘草定粗提物的濃度為lmg/ml。
9.根據(jù)權利要求1所述的一種光甘草定含量的測定方法,其特征在于,步驟(3)中,超聲溶解的時間為15min。
【文檔編號】G01N30/74GK104076110SQ201410346494
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年7月21日 優(yōu)先權日:2014年7月21日
【發(fā)明者】易銘, 鐘慧, 楊永安, 湯文建 申請人:江蘇天晟藥業(yè)有限公司