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一種高通量微孔板的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種高通量微孔板，微孔板包括多個(gè)微孔組，微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴(kuò)散通道。利用本實(shí)用新型提供的高通量微孔板，能夠高通量的實(shí)現(xiàn)酶抑制劑的篩選，檢測(cè)靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
【專利說明】一種高通量微孔板
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種生化檢測(cè)裝置，尤其涉及一種微孔板。
【背景技術(shù)】
[0002]微孔板，也常稱作多孔樣品盤，用于容納多個(gè)(如6，12，24，48，96，384或更多)樣品。能夠通過放射自顯影、液體閃爍計(jì)數(shù)、發(fā)光測(cè)量法等多種技術(shù)進(jìn)行檢定這些樣品。
[0003]多孔微孔板主要用在化學(xué)、生物、藥學(xué)領(lǐng)域中的檢測(cè)方面，對(duì)液體標(biāo)本進(jìn)行分析和/或研究。標(biāo)準(zhǔn)微孔板裝置通常包括具有多個(gè)開放式孔的微孔板和用于對(duì)孔進(jìn)行封閉的可選擇閉合裝置。通常微孔板一般包括單一的模制結(jié)構(gòu)，該模制結(jié)構(gòu)包括用于容納按矩形陣列排列的多個(gè)開放式孔的剛性框架。微孔板的尺寸多種多樣；孔的尺寸大到可以容納五毫升液體，小到僅能容納少許液體。此外，微孔板的材料也多種多樣，如聚苯乙烯、聚碳酸脂、聚丙稀、特氟鄉(xiāng)侖、玻璃、陶資和石英。多種常見的傳統(tǒng)微孔板包括開放式孔按8X12矩形陣列排列的96孔板，微孔數(shù)量更多的有16X24矩形陣列排列的384孔板和32X48矩形陣列排列的1536孔板。
[0004]在高通量檢測(cè)過程中，如果能夠在反應(yīng)體系中直接檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)，則這種檢測(cè)是比較容易實(shí)現(xiàn)的，比如反應(yīng)過后直接用酶標(biāo)儀檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)，(中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)“一種快速篩選、評(píng)價(jià)抗菌生物活性物質(zhì)的方法”，申請(qǐng)?zhí)?201010154968.1)。如果反應(yīng)后的目標(biāo)物質(zhì)無法直接檢測(cè)，例如，需要在反應(yīng)后的反應(yīng)體系中加入檢測(cè)試劑，目標(biāo)物質(zhì)與檢測(cè)試劑反應(yīng)后才能使用儀器進(jìn)行檢測(cè)，則這種情況在一定程度上阻礙了高通量檢測(cè)的進(jìn)度。技術(shù)人員在高通量檢測(cè)過程中常遇到的一個(gè)更大的困難是，生物和/或化學(xué)反應(yīng)和目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)根本無法在同一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行。造成這種困難的原因，包括檢測(cè)試劑會(huì)干擾生物和/或化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行，或者，生物和/或化學(xué)反應(yīng)中的其他物質(zhì)會(huì)干擾檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。這些困難導(dǎo)致了此類反應(yīng)無法使用高通量的手段進(jìn)行檢測(cè)，極大的阻礙了研發(fā)的進(jìn)度。
[0005]特別是涉及到酶催化的反應(yīng)，由于酶的催化活性，及易受到環(huán)境的影響，對(duì)酶催化產(chǎn)物的檢測(cè)一般很難直接在酶催化體系中進(jìn)行檢測(cè)。例如，H2S是一個(gè)重要的氣體信號(hào)分子，其具有廣泛的生理功能。H2S在人體內(nèi)主要通過Cystathionine β -synthase (CBS)和Cystathionine y -lyase (CSE)維生素B6依賴酶催化產(chǎn)生。到現(xiàn)在為止，還沒有報(bào)道對(duì)CBS或CSE的高效和選擇性的抑制劑的高通量檢測(cè)方法。如何高通量的檢測(cè)CBS或CSE催化產(chǎn)生H2S氣體，是高通量檢測(cè)CBS或CSE活力以及開發(fā)其活性調(diào)節(jié)劑的長(zhǎng)期存在的一個(gè)研究瓶頸。無法高通量的檢測(cè)CBS或CSE催化產(chǎn)生H2S氣體的原因?yàn)?，如果將用于檢測(cè)H2S氣體的Ellman試劑[5，5’ -二硫代二(2-硝基苯甲酸；DTNB]加入酶催化體系中會(huì)干擾酶反應(yīng)，且反應(yīng)體系中的其他成分會(huì)干擾檢測(cè)的特異性、準(zhǔn)確性和靈敏度。
[0006]因此，本領(lǐng)域的技術(shù)人員致力于開發(fā)一種適用于高通量檢測(cè)的，生物和/或化學(xué)反應(yīng)和目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)互不干擾的技術(shù)方案，特別是開發(fā)出一種能夠高通量的篩選酶活性調(diào)節(jié)劑的技術(shù)方案。實(shí)用新型內(nèi)容
[0007]有鑒于現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是如何高通量檢測(cè)生化反應(yīng)中的產(chǎn)物，且能夠避免生化學(xué)反應(yīng)和目標(biāo)物質(zhì)檢測(cè)的相互干擾。
[0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型提供了一種高通量微孔板，所述微孔板包括多個(gè)微孔組，所述微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴(kuò)散通道。本實(shí)用新型中，高通量微孔板是指能夠高通量的對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)的微孔板。
[0009]優(yōu)選地，所述氣體擴(kuò)散通道設(shè)置于所述第一微孔和所述第二微孔間的微孔壁上。本實(shí)用新型中所述的微孔壁是指微孔板中微孔之間的部分，即，用于隔開不同微孔使每個(gè)微孔形成獨(dú)立空間的框架。
[0010]進(jìn)一步地，所述第一微孔為反應(yīng)孔，所述第二微孔為檢測(cè)孔，所述氣體擴(kuò)散通道允許所述第一微孔中的至少一種反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)所述氣體擴(kuò)散通道進(jìn)入所述第二微孔。
[0011]優(yōu)選地，所述氣體擴(kuò)散通道為圓形、方形或矩形管狀的通道。
[0012]優(yōu)選地，所述氣體擴(kuò)散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0013]優(yōu)選地，所述氣體擴(kuò)散通道中設(shè)有具有選擇性通透作用的膜。具有選擇性通透作用的膜是指對(duì)不同粒子的通過具有選擇性的薄膜，即，一種只給某種或某類分子或粒子擴(kuò)散進(jìn)出的薄膜。
[0014]優(yōu)選地，所述微孔板上的微孔程矩形陣列排列，所述第一微孔和所述第二微孔間隔排列。
[0015]進(jìn)一步地，為了適用于高通量檢測(cè)生化反應(yīng)中產(chǎn)生的氣體目標(biāo)物質(zhì)，本實(shí)用新型提供了一種簡(jiǎn)單的氣體擴(kuò)散通道設(shè)置方式，即，所述氣體擴(kuò)散通道為在所述微孔壁頂部設(shè)置的凹槽。這種設(shè)置方式，加工簡(jiǎn)單方便，使用效果也很好。
[0016]優(yōu)選地，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0017]更優(yōu)選地，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。本實(shí)用新型中，關(guān)于凹槽的設(shè)置深度，只要保證第一微孔或第二微孔中的液體不會(huì)漫過凹槽進(jìn)入另一偵牝就能夠達(dá)到本實(shí)用新型的效果。
[0018]進(jìn)一步地，本實(shí)用新型提供的用于高通量檢測(cè)的微孔板，其中所述微孔組還包括三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之間設(shè)有第二通道，所述第二通道中設(shè)有具有選擇性通透作用的膜。
[0019]優(yōu)選地，所述第三微孔為物料孔，所述第三微孔中的反應(yīng)原料經(jīng)所述第二通道進(jìn)入所述第一微孔中，反應(yīng)后產(chǎn)物經(jīng)所述氣體擴(kuò)散通道進(jìn)入所述第二微孔。
[0020]本實(shí)用新型設(shè)置第三微孔的目的在于，在一些實(shí)施方式中，能夠在第一微孔中培養(yǎng)細(xì)胞或微生物，第三微孔可以通過第二通道為這些生命體提供新鮮的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，滿足第一微孔中生命體的代謝需要。第一微孔中生命體代謝產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，能夠通過氣體擴(kuò)散通道，進(jìn)入第二微孔中，被定性或定量的檢測(cè)出來。
[0021]優(yōu)選地，本實(shí)用新型提供的微孔板，還包括密封所述微孔的密封裝置，如封板膜。
[0022]技術(shù)效果
[0023]利用本實(shí)用新型提供的高通量微孔板，高通量的實(shí)現(xiàn)酶抑制劑的篩選，檢測(cè)靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。通過篩選約7200個(gè)小分子化合物，最終篩選得到了 9個(gè)CBS酶抑制劑，其Κ5(ι〈50μΜ，為高效CBS抑制劑。
[0024]以下將結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型的構(gòu)思、具體結(jié)構(gòu)及產(chǎn)生的技術(shù)效果作進(jìn)一步說明，以充分地了解本實(shí)用新型的目的、特征和效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0025]圖1是本實(shí)用新型的一個(gè)較佳實(shí)施例的圓形孔微孔板的立體圖
[0026]圖2是圖1中的A-A剖視圖
[0027]圖3是設(shè)有選擇性通透作用的膜的微孔板結(jié)構(gòu)
[0028]圖4是本實(shí)用新型的具有凹槽通道的微孔板
[0029]圖5是圖4中A-A剖視圖
[0030]圖6本實(shí)用新型的具有凹槽通道的方形孔微孔板
【具體實(shí)施方式】
[0031]實(shí)施例1
[0032]如圖1和圖2所示，本實(shí)施例提供了一種用于高通量檢測(cè)的微孔板，為8X12矩形陣列排列的96孔板，包括具有48個(gè)微孔組的基板I ;每個(gè)微孔組包括第一微孔11和第二微孔12,第一微孔和第二微孔之間設(shè)有氣體擴(kuò)散通道111。微孔為一端開放式孔,開口于基板I的一個(gè)表面；
[0033]氣體擴(kuò)散通道111設(shè)置于第一微孔11和第二微孔12間的微孔壁110上。
[0034]第一微孔為反應(yīng)孔，第二微孔為檢測(cè)孔，在實(shí)際使用過程中，氣體擴(kuò)散通道允許第一微孔中的至少一種氣體反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)所述氣體擴(kuò)散通道進(jìn)入所述第二微孔。
[0035]氣體擴(kuò)散通道可以設(shè)置為圓形、方形或矩形管狀的通道。
[0036]氣體擴(kuò)散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
[0037]實(shí)施例2
[0038]本實(shí)施例中的微孔板與實(shí)施例1中的結(jié)構(gòu)基本一致，不同之處僅為，氣體擴(kuò)散通道111中設(shè)有具有選擇性通透作用的膜1111。
[0039]實(shí)施例3
[0040]為了適用于高通量檢測(cè)生化反應(yīng)中產(chǎn)生的氣體目標(biāo)物質(zhì)，本實(shí)施例提供的微孔板，為8X12矩形陣列排列的96孔板，包含48個(gè)微孔組，本實(shí)施例提供了一種簡(jiǎn)單的氣體擴(kuò)散通道設(shè)置方式，如圖4和圖5所示，氣體擴(kuò)散通道為在所述微孔壁頂部設(shè)置的凹槽1112。本實(shí)施例中所述凹槽深度為第一微孔11深度的二分之一。在其他的實(shí)施方式中，可以根據(jù)具體情況設(shè)置凹槽深度，如根據(jù)生化反應(yīng)體系和檢測(cè)體系中的液體體積選擇適宜的凹槽深度，既保證兩個(gè)體系中的液體不會(huì)通過凹槽混合，又能滿足第一微孔中反應(yīng)生成的氣體能夠及時(shí)擴(kuò)散入第二微孔中。
[0041]實(shí)施例4
[0042]本實(shí)施例提供了一種方形孔的微孔板，圖6所示，除微孔形狀與實(shí)施3中不同外，微孔板的結(jié)構(gòu)與實(shí)施例3中完全相同。[0043]以上詳細(xì)描述了本實(shí)用新型的較佳具體實(shí)施例。應(yīng)當(dāng)理解，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員無需創(chuàng)造性勞動(dòng)就可以根據(jù)本實(shí)用新型的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此，凡本【技術(shù)領(lǐng)域】中技術(shù)人員依本實(shí)用新型的構(gòu)思在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上通過邏輯分析、推理或者有限的實(shí)驗(yàn)可以得到的技術(shù)方案，皆應(yīng)在由權(quán)利要求書所確定的保護(hù)范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種高通量微孔板，其特征在于，所述微孔板包括多個(gè)微孔組，所述微孔組至少包括第一微孔和第二微孔，所述微孔組還包括用于連通所述第一微孔和所述第二微孔的氣體擴(kuò)散通道。
2.如權(quán)利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴(kuò)散通道設(shè)置于所述第一微孔和所述第二微孔間的微孔壁上。
3.如權(quán)利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述第一微孔為反應(yīng)孔，所述第二微孔為檢測(cè)孔，所述氣體擴(kuò)散通道允許所述第一微孔中的至少一種氣體反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)所述氣體擴(kuò)散通道進(jìn)入所述第二微孔。
4.如權(quán)利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴(kuò)散通道為圓形、方形或矩形管狀的通道。
5.如權(quán)利要求4所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴(kuò)散通道上邊緣距離所述微孔壁頂部的距離小于所述第一微孔深度的三分之二。
6.如權(quán)利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴(kuò)散通道中設(shè)有具有選擇性通透作用的膜。
7.如權(quán)利要求2所述的微孔板，其特征在于，所述氣體擴(kuò)散通道為在所述微孔壁頂部設(shè)置的凹槽。
8.如權(quán)利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于所述第一微孔深度的三分之二。
9.如權(quán)利要求7所述的微孔板，其特征在于，所述凹槽深度小于或等于所述第一微孔深度的二分之一。
10.如權(quán)利要求1所述的微孔板，其特征在于，所述微孔組還包括第三微孔，所述第三微孔和所述第一微孔之間設(shè)有第二通道，所述第二通道中設(shè)有具有選擇性通透作用的膜。
11.如權(quán)利要求10所述的微孔板，其特征在于，所述第三微孔為物料孔，所述第三微孔中的反應(yīng)原料經(jīng)所述第二通道進(jìn)入所述第一微孔中，反應(yīng)后氣體產(chǎn)物經(jīng)所述氣體擴(kuò)散通道進(jìn)入所述第二微孔。
12.如上述任一權(quán)利要求所述的微孔板，其特征在于，所述微孔板還包括密封所述微孔的密封裝置。
13.如權(quán)利要求12所述的微孔板，其特征在于，所述微孔密封裝置為封板膜。
【文檔編號(hào)】G01N33/00GK203551540SQ201320620517
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月9日
【發(fā)明者】吳方, 周越洋, 于晶 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)