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一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，包括如下步驟：(1)樣品制備：準(zhǔn)確稱取5.0g蜂蜜樣品于燒杯中，加入7.5mL酶解緩沖液和10mL的蒸餾水，攪拌樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻；(2)酶解：準(zhǔn)確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12.5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解10min或20min；(3)顯色：吸取酶解液于盛有顯色液和蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5min；(4)檢測：把顯色液顏色與多色比色卡對比，確定蜂蜜中淀粉酶值。本發(fā)明的特點(diǎn)是使淀粉酶在常溫下與淀粉作用，并配合比色卡法進(jìn)行檢測。具有操作簡便、條件簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)。
【專利說明】一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明具體涉及一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，屬于食品質(zhì)量安全檢測【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]淀粉酶值的高低是衡量蜂蜜生物活性、成熟度和新鮮度的重要質(zhì)量指標(biāo)之一。目前測定蜂蜜中的淀粉酶值的方法主要有分光光度計(jì)法、試管目測法、標(biāo)準(zhǔn)參考比色板法和試劑盒法等。第一種方法是國際通用的方法，此法準(zhǔn)確、快速，但需分光光度計(jì)等設(shè)備，對檢測人員的技術(shù)要求較高，不適于現(xiàn)場快速檢測；第二種方法檢測步驟復(fù)雜，且耗時(shí)；第三種方法是在第一種方法的基礎(chǔ)上研究出來的比色卡，較為方便，但只有一種顏色，對于酶值低的樣品，需檢測一個(gè)小時(shí)以上，第四種方法實(shí)質(zhì)上也是分光光度計(jì)法。此外，以上所有方法還都不能在常溫下進(jìn)行檢測(需要在40°C水浴下酶解)。本發(fā)明在前人對蜂蜜中淀粉酶值研究的基礎(chǔ)上，通過常溫下酶解與酶值的關(guān)系，制作出多種顏色和對應(yīng)酶值的比色卡，建立了一種能在常溫下對蜂蜜中的淀粉酶值進(jìn)行快速測定的檢測方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是在于提供一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，能夠現(xiàn)場完成對蜂蜜中淀粉酶值的快速測定，具有操作簡便、條件簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：
(1)樣品的制備：準(zhǔn)確稱取5.O g蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻；
(2)酶解：準(zhǔn)確吸取2.5 mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的試管中混勻；在常溫下酶解10 min或20 min ；
(3)顯色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL顯色液和6.6 mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min ；
(4)檢測：通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，確定蜂蜜中的淀粉酶值。
[0005]上述步驟（I)中所述的酶解緩沖液，其組成為乙酸鈉（0.43 moL/L)、氯化鈉（O. ImoL/L)和冰醋酸（O. 7wt. %);上述步驟（2)中所述的淀粉溶液濃度為O. 04wt. % ;上述步驟
(3)中所述的顯色液，其組成為碘化鉀（4.04wt.%)和碘（O. OlSwt. % );上述步驟（3)所述比色管為25mL具塞比色管（管徑2cm，管長15cm);上述（4)中所述的比色卡的制作及范圍如下：在常溫下，將一系列已知酶值的蜂蜜按I中所述步驟制備、酶解和顯色，根據(jù)所獲顏色，制成多色比色卡，對應(yīng)的淀粉酶值分別為：
(1)0-24: O, 6，12，18，24 (顯色時(shí)間 10 分鐘）；
(2)0-14.5 : O, 2，4，7.5，14. 5 (顯色時(shí)間 20 分鐘）。
[0006]本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明建立的采用多色比色卡法快速檢測蜂蜜中淀粉酶值的方法。其顯著特點(diǎn)是可以在常溫下進(jìn)行測定，不需要分光光度計(jì)、便攜式儀器和水浴加熱等儀器設(shè)備，具有操作簡便、條件簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)。因此該方法適合應(yīng)用到工商、質(zhì)檢、超市和家庭等現(xiàn)場快速檢測蜂蜜中的淀粉酶值，對蜂蜜產(chǎn)品的質(zhì)量水平作出快速判斷，以維護(hù)人們的經(jīng)濟(jì)利益和保證人們的食用安全。
[0007]【具體實(shí)施方式】：
實(shí)施例I:
比色卡的制作方法
(I)樣品的制備：取已知酶值大于24的蜂蜜用蒸餾水稀釋成酶值分別為6，12，18和24的蜂蜜樣品；準(zhǔn)確稱取5. Og上述蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；以蒸餾水代替蜂蜜，作為酶值為O的樣品。
[0008](2)酶解：準(zhǔn)確吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解IOmin。
[0009](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中顯色，根據(jù)所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應(yīng)的酶值范圍為0-24。
[0010]實(shí)際樣品測定
(1)樣品的制備：準(zhǔn)確稱取5.Og蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；
(2)酶解：準(zhǔn)確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解10 min。
[0011](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min。
[0012](4)檢測：通過顯色液與比色卡的顏色對比，其顏色與酶值為24的色澤最為接近，故確定蜂蜜樣品中的淀粉酶值為24。
[0013]實(shí)施例2:
比色卡的制作方法
(O樣品的制備：取已知酶值大于15的蜂蜜用蒸餾水稀釋成酶值分別為2，4，7. 5和14. 5的蜂蜜樣品，準(zhǔn)確稱取5. Og上述蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；以蒸餾水代替蜂蜜，作為酶值為O的樣品。
[0014](2)酶解：準(zhǔn)確吸取2. 5mL上述溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解20 min。
[0015](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸懼水的比色管中顯色，根據(jù)所獲顏色，制成比色卡，比色卡對應(yīng)的酶值范圍為0-14. 5。
[0016]實(shí)際樣品測定
(1)樣品的制備：準(zhǔn)確稱取5.Og蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和約10mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解。然后移入25mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度并搖勻；
(2)酶解：準(zhǔn)確吸取2.5mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5mL淀粉溶液的試管中混勻，在常溫下酶解20 min。
[0017](3)顯色：吸取上述酶解液5. OmL于盛有2. 5mL顯色液和6. 6mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min。
[0018](4)檢測：通過顯色液與比色卡的顏色對比，其顏色介于酶值為2和4的色澤之間，故估算蜂蜜樣品中的淀粉酶值為3。
[0019]備注：上文中淀粉酶值的單位均為mL/(g · h)。
[0020]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，凡依本發(fā)明申請專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵蓋范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于包括以下步驟： (1)樣品的制備：準(zhǔn)確稱取5.O g蜂蜜樣液于燒杯中，加入7. 5 mL酶解緩沖液和10 mL的蒸餾水，攪拌使樣品完全溶解，然后移入25 mL容量瓶中，加入蒸餾水定容至刻度，搖勻； (2)酶解：準(zhǔn)確吸取2.5 mL制備好的樣品溶液于盛有12. 5 mL淀粉溶液的試管中混勻；酶解 10 min 或 20 min ； (3)顯色：吸取上述酶解液5.O mL于盛有2.5 mL顯色液和6.6 mL蒸餾水的比色管中，常溫下顯色5 min ； (4)檢測：通過顯色后溶液的顏色與比色卡的顏色對比，確定蜂蜜中的淀粉酶值。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：所述的酶解緩沖液的組成為O. 43 moL/L乙酸鈉、O. I moL/L氯化鈉和O. 7wt. %冰醋酸。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（2)淀粉溶液的濃度為O. 04wt. %。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（2)在常溫下酶解。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：步驟（3)中顯色液的組成為4. 04wt. %碘化鉀和O. 018wt. %碘。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：比色管為25mL具塞比色管，管徑2 cm，管高15 cm。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種蜂蜜中淀粉酶值的快速檢測方法，其特征在于：在常溫下，將一系列已知酶值的蜂蜜按所述步驟制備、酶解和顯色，根據(jù)所獲顏色，制成多色比色卡，比色卡對應(yīng)的酶值范圍分別為0-24和0-14. 5。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK104132939SQ201410330025
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年7月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月12日
【發(fā)明者】張金彪, 張素平, 周碧青 申請人:福建農(nóng)林大學(xué)