寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)人體寄生蟲學(xué)領(lǐng)域,提供一種寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本的制作方法,該方法通過蟲卵清洗固定、離心沉淀、冷凍干燥、中性樹膠浸潤、封片步驟制成。通過該方法可以將有價(jià)值的蟲卵制成玻片標(biāo)本永久保存,避免蟲卵(特別是稀有蟲卵)浪費(fèi);尤其在教學(xué)科研領(lǐng)域,可使教學(xué)玻片標(biāo)本長期重復(fù)使用,節(jié)約大量的人力、財(cái)力及物力。
【專利說明】寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)寄生蟲學(xué)領(lǐng)域,涉及一種寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法,可用于制作各種寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本,尤其可在人體寄生蟲學(xué)教學(xué)及科研中使用。
【背景技術(shù)】
[0002]寄生蟲卵是寄生蟲病的主要診斷階段,也是寄生蟲學(xué)教學(xué)科研過程中重要的實(shí)驗(yàn)材料。目如,寄生蟲卵玻片標(biāo)本分為臨時(shí)涂片標(biāo)本和長期玻片標(biāo)本,臨時(shí)涂片標(biāo)本只能一次性使用,長期玻片標(biāo)本也只能保存2~3年。由于這類標(biāo)本保存使用時(shí)間短,需要浪費(fèi)大量的蟲卵不斷地制作補(bǔ)充,因此在寄生蟲學(xué)教學(xué)科研中,尤其是一些難采集到的寄生蟲卵,更需要制作成永久玻片標(biāo)本供教學(xué)科研長期使用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的是提供一種寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法,制作的蟲卵標(biāo)本可長期使用及保存。
[0004]本發(fā)明提供的寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法,按下列步驟進(jìn)行:
a、蟲卵清洗固定:將收集的蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的30%~50%酒精,震蕩混勻,放置6~12小時(shí);
b、離心沉淀:將離心管放入離心機(jī),1500^3000轉(zhuǎn)/分,離心3~8分鐘,棄上清,留取沉淀物;`
C、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機(jī)中,12~24小時(shí);
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調(diào)整懸浮液中蟲卵濃度為500-1500個(gè)/ml,放置f 2小時(shí);
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成蟲卵永久玻片標(biāo)本。
[0005]本發(fā)明的有益效果是,創(chuàng)造了寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作的新方法。通過該方法可以將有價(jià)值的蟲卵制成玻片標(biāo)本永久保存,避免蟲卵(特別是稀有蟲卵)浪費(fèi);尤其在教學(xué)科研領(lǐng)域,可使教學(xué)玻片標(biāo)本長期重復(fù)使用,節(jié)約大量的人力、財(cái)力及物力。
[0006]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1
短膜殼絳蟲卵永久玻片標(biāo)本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的短膜殼絳蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的40%酒精,震蕩混勻,放置8小時(shí);
b、離心沉淀:將離心管放入離心機(jī),2500轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,棄上清,留取沉淀物;
C、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機(jī)中,15小時(shí);
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調(diào)整懸浮液中蟲卵濃度為800個(gè)/ml,放置I小時(shí); e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成短膜殼絳蟲卵永久玻片標(biāo)本。
[0007]實(shí)施例2
衛(wèi)氏并殖吸蟲卵永久玻片標(biāo)本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的衛(wèi)氏并殖吸蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的50%酒精,震蕩混勻,放置10小時(shí);
b、離心沉淀:將離心管放入離心機(jī),2000轉(zhuǎn)/分,離心6分鐘,棄上清,留取沉淀物;
C、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機(jī)中,18小時(shí);
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調(diào)整懸浮液中蟲卵濃度為600個(gè)/ml,放置2小時(shí);
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成衛(wèi)氏并殖吸蟲卵永久玻片標(biāo)本。
[0008]實(shí)施例3
未受精蛔蟲卵永久玻片標(biāo)本制作,步驟如下:
a、蟲卵清洗固定:將收集的未受精蛔蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的50%酒精,震蕩混勻,放置12小時(shí);
b、離心沉淀:將離心管放入離心機(jī),1800轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,棄上清,留取沉淀物;
C、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機(jī)中,20小時(shí);
d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調(diào)整懸浮液中蟲卵濃度為1000個(gè)/ml,放置1.5小時(shí);
e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成未受精蛔蟲卵永久玻片標(biāo)本。
【權(quán)利要求】
1.一種寄生蟲卵永久玻片標(biāo)本制作方法,其特征在于: a、蟲卵清洗固定:將收集的蟲卵放入離心管,加入兩倍體積的30%~50%酒精,震蕩混勻,放置6~12小時(shí); b、離心沉淀:將離心管放入離心機(jī),1500^3000轉(zhuǎn)/分,離心3~8分鐘,棄上清,留取沉淀物; C、冷凍干燥:把沉淀物放入真空冷凍干燥機(jī)中,12~24小時(shí); d、中性樹膠浸潤:將中性樹膠和二甲苯按體積比1:1混合,加入到干燥的沉淀物中,攪拌混勻使之成為蟲卵懸浮液,調(diào)整懸浮液中蟲卵濃度為500-1500個(gè)/ml,放置f 2小時(shí); e、封片:攪拌混勻蟲卵懸浮液,用吸管吸取一滴蟲卵懸浮液滴到載玻片上,蓋上蓋玻片,晾干,即制成蟲卵永久 玻片標(biāo)本。
【文檔編號】G01N1/28GK103868774SQ201410115789
【公開日】2014年6月18日 申請日期:2014年3月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月26日
【發(fā)明者】常志尚, 呂銳, 王秋波, 張艷麗, 張文卿 申請人:青島大學(xué)