一種基于顯微鏡的細胞點標裝置及顯微鏡的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種基于顯微鏡的細胞點標裝置及顯微鏡，該細胞點標裝置包括：固定部，用于固定在顯微鏡上；連接部，與所述固定部連接；以及點標部，與所述連接部連接，所述點標部的末端垂直地指向所述顯微鏡的光路中心，用于對載物臺上的目標位置進行標記。所述顯微鏡包括該細胞點標裝置。本實施例提供的細胞點標裝置，能夠固定在顯微鏡上，只要將點標部對準顯微鏡光路的中心位置，通過下壓點標部就能夠對目標細胞做標記，準確度高，節(jié)省人力；而且通過在固定部上開設調節(jié)槽，方便調節(jié)細胞點標裝置在顯微鏡上的位置。
【專利說明】一種基于顯微鏡的細胞點標裝置及顯微鏡
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及顯微鏡【技術領域】，尤其涉及一種基于顯微鏡的細胞點標裝置及包括該細胞點標裝置的顯微鏡。
【背景技術】
[0002]透射電子顯微鏡(Transmiss1n electron microscope, TEM)技術是檢測和研究病毒的重要手段，是診斷未知病原和鑒定生物恐怖襲擊病原的首選技術之一。超薄切片技術是組成生物TEM技術體系的重要技術。通常情況下，貼壁培養(yǎng)細胞超薄切片制樣過程需要以下步驟完成:首先直接用細胞刮子刮脫細胞或通過胰酶消化使細胞脫離培養(yǎng)界面，再將脫壁的細胞進行離心使其聚集成團塊，繼而對細胞團塊進行醛類和四氧化鋨雙固定、梯度乙醇(或環(huán)氧丙烷或丙酮)脫水、樹脂浸潤、包埋、聚合、修塊和切片等處理程序。刮取及酶消化等處理會導致細胞超微結構發(fā)生改變，從而難以反映貼壁細胞的真實自然狀態(tài)。上述處理使細胞脫離了固有位置，經過離心聚集形成團塊，使得細胞隨機分布在細胞團塊內，經過上述處理后，在切片上有很多細胞，難以實現(xiàn)通過透射電子顯微鏡觀察光學顯微鏡所觀察到的同一細胞，大大降低了透射電子顯微鏡對細胞超薄切片的檢測效率。
[0003]為了能夠在透射電子顯微鏡下觀察到光學顯微鏡所觀察到的目標細胞， 申請人:的在先前的一件專利建立了定位超薄切片技術(申請?zhí)枮?01310470347.8的專利《一種針對感染病毒的病變細胞的定位超薄切片方法》)。在應用定位超薄切片技術時，為了方便在切片前標記目標細胞的位置，通常以手工的方式對目標細胞所在位置進行標記，具體方法是在顯微鏡觀察視野內用記號筆在載玻片上標記目標細胞的位置。由于手工標記微米級的細胞位置對手工操作而言難度較大，因而對操作者有較高的要求，例如要求操作者具有良好的手臂穩(wěn)定性，在標記過程中不能出現(xiàn)手臂抖動，并需要操作者具備顯微鏡下的良好的立體感等。一旦手部發(fā)生些許抖動，將導致標記位置遠離目標細胞的位置。另外，用于標記的記號筆的筆尖一般較粗，標記染料區(qū)域的大小遠大于目標細胞區(qū)域，這也導致標記位置不準確。如上所述，手工對細胞位置進行標記的方式準確度和效率都較低。
【發(fā)明內容】
[0004]摶術問是頁
[0005]有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術問題是，如何準確高效的對載玻片上的目標細胞的位置進行標記，以方便后續(xù)的針對目標細胞的定位查找、分離細胞和進行目標細胞的超薄切片。
[0006]解決方案
[0007]為了解決上述技術問題，根據(jù)本發(fā)明的一實施例，提供了一種基于顯微鏡的細胞點標裝置，包括:
[0008]固定部，用于固定在顯微鏡上；
[0009]連接部,與所述固定部連接；以及
[0010]點標部，與所述連接部連接，所述點標部的末端垂直地指向所述顯微鏡的光路中心，用于對載物臺上的目標位置進行標記。
[0011]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述固定部上開設有至少一對調節(jié)槽，所述調節(jié)槽位于水平方向和/或豎直方向上。
[0012]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述點標部包括:
[0013]壓件，通過彈性部件設置在所述連接部的遠離所述固定部的一端；以及
[0014]點標件，以垂直于所述載物臺的方向安裝在所述壓件上，為中空結構。
[0015]為了解決上述技術問題，根據(jù)本發(fā)明的另一實施例，還提供了一種顯微鏡，包括上述基于顯微鏡的細胞點標裝置。
[0016]為了解決上述技術問題，根據(jù)本發(fā)明的又一實施例，還提供了一種基于顯微鏡的細胞點標裝置，包括:
[0017]固定部，用于固定在顯微鏡上；
[0018]調節(jié)部，與所述固定部連接，所述調節(jié)部的長度和寬度可以調節(jié)；以及
[0019]點標部，與所述固定部連接，所述點標部的末端垂直地指向所述顯微鏡的光路中心，用于對載物臺上的目標位置進行標記。
[0020]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述固定部包括:
[0021]固定板，所述固定板上開設有至少一對調節(jié)槽，所述調節(jié)槽位于水平方向和/或豎直方向上；以及
[0022]連接件，與所述調節(jié)部在水平方向上可轉動地連接。
[0023]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述連接件與所述調節(jié)部連接的部分通過銷進行鎖止。
[0024]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述調節(jié)部包括:
[0025]第一調節(jié)件，所述第一調節(jié)件在沿所述調節(jié)部的長度方向上設置有滑軌；以及
[0026]第二調節(jié)件，所述第二調節(jié)件在沿所述調節(jié)部的長度方向上設置有滑塊，所述滑塊在所述滑軌中滑動，所述滑塊上設置有緊固件。
[0027]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述滑塊設置在滑塊載體上，所述滑塊載體通過螺釘與所述第二調節(jié)件連接。
[0028]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述滑軌的端部設置有阻擋件以及限位件。
[0029]對于上述基于顯微鏡的細胞點標裝置，在一種可能的實現(xiàn)方式中，所述點標部包括:
[0030]壓件，通過彈性部件設置在所述調節(jié)部的遠離所述固定部的一端；以及
[0031]點標件，以垂直于所述載物臺的方向安裝在所述壓件上，為中空結構。
[0032]為了解決上述技術問題，根據(jù)本發(fā)明的再一實施例，提供了一種顯微鏡，包括上述基于顯微鏡的細胞點標裝置。
[0033]有益.效果
[0034]本實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置，能夠固定在顯微鏡上，只要將點標部對準顯微鏡光路的中心位置，通過下壓點標部就能夠對目標細胞做標記，準確度高，節(jié)省人力。而且通過在固定部上開設調節(jié)槽，方便調節(jié)細胞點標裝置在顯微鏡上的位置。進一步地，由于調節(jié)部的長度和寬度都能夠調節(jié)，從而使得該細胞點標裝置能夠應用于不同規(guī)格的顯微鏡上。本發(fā)明提供的細胞點標裝置，能夠代替人工對微米級細胞的位置輕松實現(xiàn)精確標記，對操作者無特殊要求，操作簡單，精確度高，重復性好，易于推廣。
[0035]根據(jù)下面參考附圖對示例性實施例的詳細說明，本發(fā)明的其它特征及方面將變得清楚。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0036]包含在說明書中并且構成說明書的一部分的附圖與說明書一起示出了本發(fā)明的示例性實施例、特征和方面，并且用于解釋本發(fā)明的原理。
[0037]圖1示出根據(jù)本發(fā)明一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的結構示意圖；
[0038]圖2示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的結構示意圖；
[0039]圖3示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的主視圖；
[0040]圖4示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的俯視圖；
[0041]圖5示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的部分結構示意圖；
[0042]圖6示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的部分結構示意圖；
[0043]圖7示出根據(jù)本發(fā)明另一個實施例提供的顯微鏡的結構示意圖；
[0044]圖8示出根據(jù)本發(fā)明實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置在載玻片上做出標記的示意圖；以及
[0045]圖9(A)-圖9(D)分別為采用本發(fā)明提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置所標記出的目標細胞的示意圖。
【具體實施方式】
[0046]以下將參考附圖詳細說明本發(fā)明的各種示例性實施例、特征和方面。附圖中相同的附圖標記表示功能相同或相似的元件。盡管在附圖中示出了實施例的各種方面，但是除非特別指出，不必按比例繪制附圖。
[0047]在這里專用的詞“示例性”意為“用作例子、實施例或說明性”。這里作為“示例性”所說明的任何實施例不必解釋為優(yōu)于或好于其它實施例。
[0048]另外，為了更好的說明本發(fā)明，在下文的【具體實施方式】中給出了眾多的具體細節(jié)。本領域技術人員應當理解，沒有某些具體細節(jié)，本發(fā)明同樣可以實施。在一些實例中，對于本領域技術人員熟知的方法、手段、元件和電路未作詳細描述，以便于凸顯本發(fā)明的主旨。
[0049]實施例1
[0050]圖1示出根據(jù)本發(fā)明一個實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的結構示意圖,如圖1所示,本實施例提供的細胞點標裝置100包括固定部1、連接部2以及點標部3。
[0051]其中，固定部I用于將整個細胞點標裝置100固定在顯微鏡上，由于大多數(shù)顯微鏡的鏡臂上具有螺孔，為了便于安裝，因此優(yōu)選地將細胞點標裝置100固定在鏡臂上。連接部2與固定部I連接，點標部3與連接部2連接，點標部3的末端垂直地指向顯微鏡的光路中心，能夠對載物臺上的目標位置進行標記。
[0052]其中，固定部I上開設有至少一對調節(jié)槽4，可以使用螺釘?shù)葘⒐潭ú縄固定在顯微鏡上。調節(jié)槽4可以位于水平方向和/或豎直方向上，以便調節(jié)整個細胞點標裝置100在顯微鏡上的位置。固定部I的形狀構造不限于本實施例所列舉的形式，可將固定部I依據(jù)顯微鏡的不同而做不同的設計、加工成不同形狀和形式。
[0053]連接部2可以為長方體或圓柱體結構。連接部2可以與固定部I固定連接，只要保證連接部2和點標部3的長度，使得點標部3末端恰好垂直地指向顯微鏡光路中心的位置即可。連接部2也可以與固定部I可轉動地連接，例如鉸接，并且當連接部2轉到適當?shù)奈恢脮r，通過銷釘進行鎖止，從而能夠在水平方向上調節(jié)點標部3的位置。
[0054]點標部3包括壓件5和點標件6。其中壓件5通過彈性部件(未圖示)設置在連接部2的遠離固定部I的一端，點標件6在垂直于載物臺的方向上安裝在壓件5上，點標件6為中空結構。點標件6與壓件5可拆卸連接，由此方便不同規(guī)格(例如長度)的點標件6的更換。當在點標件6的末端涂抹顏料之后，通過按壓壓件5，點標件6能夠標記出載玻片上的目標細胞的位置。
[0055]本實施例提供的細胞點標裝置，利用顯微鏡上自帶的螺孔，無需改變顯微鏡的結構，就能夠把細胞點標裝置固定在顯微鏡上，只要將點標部對準顯微鏡光路的中心位置，通過下壓點標部就能夠對目標細胞做標記，準確度高，節(jié)省人力。而且通過在固定部上開設調節(jié)槽，方便調節(jié)細胞點標裝置在顯微鏡上的位置。
[0056]實施例2
[0057]圖2示出根據(jù)本發(fā)明另一實施例提供的基于顯微鏡的細胞點標裝置的結構示意圖，圖3示出對應的主視圖，圖4示出對應的俯視圖，如圖2-圖4所示，該細胞點標裝置200主要包括固定部10、調節(jié)部20以及點標部30。
[0058]其中，固定部10用于將整個細胞點標裝置200固定在顯微鏡上。優(yōu)選地，本實施例中，固定部10固定在顯微鏡的鏡臂上。調節(jié)部20與固定部10連接，調節(jié)部20位于載物臺上方，調節(jié)部20在圖2中的X方向上的長度以及在圖2中的y方向上的寬度均能夠調節(jié)。點標部30與調節(jié)部20連接，用于垂直地對置于載玻片上的目標細胞的位置進行標記。
[0059]具體而言，如圖5所示，固定部10包括固定板11和連接件12。固定板11上開設有調節(jié)槽13，通過調節(jié)槽13可以使用螺母將固定板10固定在鏡臂上。其中，調節(jié)槽13的個數(shù)優(yōu)選為2，可以將調節(jié)槽13設置為沿豎直方向或水平方向延伸，也可以在兩個方向上都設置調節(jié)槽13。通過在固定板11上開設具有一定長度的調節(jié)槽13，能夠調節(jié)固定部10在鏡臂上的高度，或在水平方向上的位置，也就是說能夠調節(jié)整個細胞點標裝置200在顯微鏡上的位置。連接件12用于與調節(jié)部20連接，連接件12固定設置在固定板11的一側，可以與固定板11分體形成并組裝在一起，也可以與固定板11 一體形成。固定部I的形狀構造不限于本實施例所列舉的形式，可將固定部I依據(jù)顯微鏡的不同而做不同的設計、力口工成不同形狀和形式。
[0060]固定部10與調節(jié)部20可以固定連接也可以可轉動地連接，例如鉸接。在本實施例中，連接件12可以包括平行且對稱的兩個夾持板121，兩個夾持板121之間具有凹部122，兩個夾持板上121分別開設有第一孔(未圖示)，兩個第一孔相互對應。
[0061]如圖2?圖5所示，調節(jié)部20包括第一調節(jié)件21和第二調節(jié)件22。具體而言，第一調節(jié)件21的一端為凸部211，凸部211的寬度與連接件12上的凹部122的寬度相適應，且該凸部211上對應于第一孔的位置開設有第二孔，從而通過螺母123能夠實現(xiàn)凸部211與凹部122的鉸接，即能夠實現(xiàn)固定部10和調節(jié)部20的可轉動連接。此外，凸部211和凹部122上對應的位置還設置有對應的第三孔212，當調整細胞點標裝置200使得點標部30對準載玻片上目標細胞的位置之后，將銷釘插入第三孔212中，能夠鎖止固定部10與調節(jié)部20，使之不能再轉動，便于點標部30穩(wěn)固地做標記。
[0062]第二調節(jié)件22與第一調節(jié)件21在長度方向上可活動的連接，例如，第二調節(jié)件22能夠與第一調節(jié)件21在長度方向上相對運動，從而使得調節(jié)部20在長度方向上的長度可調，也即使得細胞點標裝置200在長度方向上的長度可調。
[0063]具體而言，本實施例中，第一調節(jié)件21的側面具有滑軌23，第二調節(jié)件22的側面設置有滑塊24，通過滑塊24在滑軌23中滑動，能夠調整調節(jié)部20的長度?；瑝K24上具有緊固件25，用于在滑塊24滑到適當?shù)奈恢脮r對滑塊24進行緊固。優(yōu)選地，滑軌23設置有兩條，每個滑軌23中設置兩個滑塊24。為簡化裝置只設置一條滑軌23也可以。此外，緊固件25可以為銷釘。
[0064]進一步地，滑軌23的一端或兩端具有阻擋件26，用于阻擋滑塊24滑出滑軌23，該阻擋件26可以安裝固定在第一調節(jié)件21上，也可以與第一調節(jié)件21 —體形成。阻擋件26上還設置有限位件27，以調整滑塊24在滑軌23中能夠抵達的位置。本實施例中的限位件27具體可以為螺釘29，通過調節(jié)螺釘29伸出阻擋件26的長度，能夠調節(jié)滑塊24在滑軌23中的移動范圍，螺釘29的數(shù)量和位置均與滑軌23相適應。
[0065]如圖6所示，進一步地，第二調節(jié)件22與第一調節(jié)件21之間的寬度距離可調。具體地，滑塊24固定在滑塊載體28上，滑塊載體28與第二調節(jié)件22分體設置且通過螺釘29相互連接，通過調節(jié)螺釘29伸出第二調節(jié)件22的長度，能夠調整滑塊載體28與第二調節(jié)件22之間的距離，從而實現(xiàn)調整細胞點標裝置200的寬度。圖6中以4個螺釘為例進行了說明，事實上3個螺釘也可以實現(xiàn)本發(fā)明。
[0066]如圖6所示，點標部30具體包括壓件31和點標件32。其中，第二調節(jié)件22的端部內部設置有彈性部件(未示出)，壓件31的一端與彈性部件連接。點標件32設置在壓件31上，垂直于載物臺的方向，為中空結構，本實施例中點標件32的外徑可以為1.5_，與后續(xù)工藝中鉆頭的外徑相吻合。通過按壓壓件31或通過設置按鈕33來按壓壓件31，能夠帶動點標件32豎直向下運動，點中放置在顯微鏡光路中心載玻片上的目標細胞的位置進行
T 己 O
[0067]本實施例提供的細胞點標裝置，利用顯微鏡上自帶的螺孔，無需改變顯微鏡的結構，就能夠把細胞點標裝置固定在顯微鏡上，只要將點標部對準顯微鏡光路的中心位置，并將細胞點標裝置的各個部件進行固定，通過下壓點標部就能夠對目標細胞做標記，準確度高，節(jié)省人力。而且通過在固定部上開設調節(jié)槽，能夠方便調節(jié)細胞點標裝置在顯微鏡上的位置，此外調節(jié)部的長度和寬度都能夠調節(jié)，從而使得該細胞點標裝置能夠應用于不同規(guī)格的顯微鏡上。需要說明的是，雖然本實施例中以滑塊、鉸接的方式為例進行了說明，本領域技術人員能夠理解的是，齒輪傳動、樞轉等機械結構都可以用于實現(xiàn)本發(fā)明。
[0068]實施例3
[0069]本實施例提供了一種顯微鏡(未圖示)，包括上述實施例1中的細胞點標裝置100。
[0070]實施例4
[0071]如圖7所示,本實施例提供了一種顯微鏡300,包括上述實施例2中的細胞點標裝置200，該細胞點標裝置200安裝在顯微鏡300的鏡臂301上。本實施例目標細胞可為攜帶綠色熒光蛋白基因病毒感染的細胞，相應地顯微鏡300可具體為熒光顯微鏡，從而通過顯微鏡300的紫外線激發(fā)能夠清楚的觀察到熒光目標細胞。
[0072]采用本發(fā)明提供的細胞點標裝置200對目標細胞進行標記和觀察的過程具體如下:將載玻片302置于顯微鏡300的載物臺303上，調整點標部32使其恰好指向顯微鏡300的光路中心的位置，調整載玻片302的位置，使得目標細胞位于顯微鏡300的視野中心區(qū)域，然后按下按鈕33對目標細胞的位置進行標記。如圖8所示，在載玻片302上對應于目標細胞的位置具有一圓圈，即是細胞點標裝置200所做的標記。圖9(A)和圖9(B)分別為在顯微鏡300下和在可見光下看到的目標細胞，然后對該目標細胞進行超薄切片和觀察，能夠容易地找到細胞內所含的大量病毒顆粒，其中圖9 (C)示出了放大后的目標細胞，圖9 (D)示出了目標細胞中包含的病毒。
[0073]以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實施方式】，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本【技術領域】的技術人員在本發(fā)明揭露的技術范圍內，可輕易想到變化或替換，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內。因此，本發(fā)明的保護范圍應以所述權利要求的保護范圍為準。
【權利要求】
1.一種基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，包括: 固定部，用于固定在顯微鏡上； 連接部，與所述固定部連接；以及 點標部，與所述連接部連接，所述點標部的末端垂直地指向所述顯微鏡的光路中心，用于對載物臺上的目標位置進行標記。
2.根據(jù)權利要求1所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述固定部上開設有至少一對調節(jié)槽，所述調節(jié)槽位于水平方向和/或豎直方向上。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述點標部包括: 壓件，通過彈性部件設置在所述連接部的遠離所述固定部的一端；以及 點標件，以垂直于所述載物臺的方向安裝在所述壓件上，為中空結構。
4.一種顯微鏡,其特征在于,包括權利要求1-3任一項所述的基于顯微鏡的細胞點標>j-U ρ?α裝直。
5.一種基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，包括: 固定部，用于固定在顯微鏡上； 調節(jié)部，與所述固定部連接，所述調節(jié)部的長度和寬度可以調節(jié)；以及點標部，與所述固定部連接，所述點標部的末端垂直地指向所述顯微鏡的光路中心，用于對載物臺上的目標位置進行標記。
6.根據(jù)權利要求5所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述固定部包括: 固定板，所述固定板上開設有至少一對調節(jié)槽，所述調節(jié)槽位于水平方向和/或豎直方向上；以及 連接件，與所述調節(jié)部在水平方向上可轉動地連接。
7.根據(jù)權利要求6所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述連接件與所述調節(jié)部連接的部分通過銷進行鎖止。
8.根據(jù)權利要求5所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述調節(jié)部包括: 第一調節(jié)件，所述第一調節(jié)件在沿所述調節(jié)部的長度方向上設置有滑軌；以及 第二調節(jié)件，所述第二調節(jié)件在沿所述調節(jié)部的長度方向上設置有滑塊，所述滑塊在所述滑軌中滑動，所述滑塊上設置有緊固件。
9.根據(jù)權利要求8所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述滑塊設置在滑塊載體上，所述滑塊載體通過螺釘與所述第二調節(jié)件連接。
10.根據(jù)權利要求8所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述滑軌的端部設置有阻擋件以及限位件。
11.根據(jù)權利要求5-10任一項所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置，其特征在于，所述點標部包括: 壓件，通過彈性部件設置在所述調節(jié)部的遠離所述固定部的一端；以及 點標件，以垂直于所述載物臺的方向安裝在所述壓件上，為中空結構。
12.—種顯微鏡,其特征在于,包括權利要求5-11任一項所述的基于顯微鏡的細胞點標裝置。
【文檔編號】G01N1/28GK104198255SQ201410498599
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月25日 優(yōu)先權日:2014年9月25日
【發(fā)明者】宋敬東, 屈建國, 洪濤 申請人:中國疾病預防控制中心病毒病預防控制所
專業(yè)數(shù)控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
