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二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極（1），該選擇電極包括一個(gè)二硫蘇糖醇膜層（25）修飾工作金膜（12）的基片（11），該基片（11）上覆蓋的工作金膜（12）與引腳金膜（13）通過(guò)金膜層相連，引腳金膜（13）與外包有塑料絕緣層（14）的金屬絲導(dǎo)線(xiàn)（15）通過(guò)焊錫（16）相連接；所述基片（11）是在拋光的硅硼酸鹽基板（21）上逐步濺射沉積二氧化硅膜層（22）、金屬鈦膜層（23）、銅合金膜層（24）及金膜層；且工作金膜（12）表面上組裝修飾二硫蘇糖醇膜層（25）。該選擇電極制作簡(jiǎn)單、成本低廉、使用方便，可用于環(huán)境中微量汞離子的快速檢測(cè)，檢測(cè)下限達(dá)到5.4nmol/L。
【專(zhuān)利說(shuō)明】二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種基于二硫蘇糖醇的汞離子選擇電極，屬于化學(xué)/生物傳感【技術(shù)領(lǐng)域】，適用于環(huán)境安全檢測(cè)。
【背景技術(shù)】
[0002]汞污染是一個(gè)全球性的問(wèn)題，由于其劇毒和生物蓄積性，它已受到越來(lái)越多的關(guān)注。二價(jià)汞離子(Hg2+)是最穩(wěn)定的無(wú)機(jī)汞，存在于天然水體中，Hg2+即使是微量濃度也能產(chǎn)生毒性，它能夠在生物體內(nèi)累積，通過(guò)食物鏈轉(zhuǎn)移到人體內(nèi)，而人體內(nèi)累積的微量汞無(wú)法通過(guò)自身代謝進(jìn)行排泄，將直接導(dǎo)致心臟、肝、甲狀腺疾病，引起神經(jīng)系統(tǒng)紊亂，慢性汞中毒，甚至引發(fā)惡性腫瘤的形成。其次，汞離子的微生物的生態(tài)甲基化產(chǎn)物甲基汞，也是一種強(qiáng)有力的毒素，可通過(guò)食物鏈傳遞到魚(yú)類(lèi)和海洋哺乳動(dòng)物的組織中，轉(zhuǎn)換成為劇毒的有機(jī)汞。因此，能快速準(zhǔn)確分析生活環(huán)境中水體等介質(zhì)中的重金屬汞含量，對(duì)于提高人類(lèi)的生存質(zhì)量、保護(hù)地球環(huán)境具有十分重要的意義。
[0003]目前，檢測(cè)重金屬汞離子的方法有很多，如原子光譜法、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES法)、分光光度法、高效液相色譜法，電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICPMS)、化學(xué)發(fā)光法和熒光分析法等。然而，這些方法往往需要昂貴的精密儀器、復(fù)雜的樣品制備流程和熟練的操作人員，不能或不方便在戶(hù)外進(jìn)行快速檢測(cè)，在很大程度上限制了其應(yīng)用。作為非常便攜的離子選擇性電極(ISE)是七十年代發(fā)展起來(lái)的一類(lèi)新型的電化學(xué)傳感器，與傳統(tǒng)方法相比，由于其具有成本低、操作簡(jiǎn)單且易小型化等優(yōu)點(diǎn)，受到了許多研究學(xué)者的青睞；而且，分子自組裝單層膜(Self-assembled Monolayers, SAMs)是近年來(lái)新興的一種電化學(xué)分析界面活性敏感膜技術(shù)，在結(jié)構(gòu)和性能上具有類(lèi)似生物膜的特性，逐漸成為電化學(xué)傳感技術(shù)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。
[0004]基于目前的相關(guān)研究，結(jié)合自組裝膜技術(shù)和離子選擇電極方法實(shí)現(xiàn)對(duì)汞離子進(jìn)行定性或者定量的研究還未見(jiàn)報(bào)道。為此，本發(fā)明通過(guò)單分子自組裝方法將二硫蘇糖醇組裝修飾到金膜表面，形成一種基于二硫蘇糖醇自組裝膜的汞離子選擇電極。該選擇電極制作簡(jiǎn)單、成本低廉、使用方便、靈敏度很高，優(yōu)于傳統(tǒng)的儀器分析方法，可用于環(huán)境中微量汞離子的快速檢測(cè)，在環(huán)境監(jiān)測(cè)、農(nóng)業(yè)食品與生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中具有非常重要的應(yīng)用前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種制作簡(jiǎn)單、成本低廉、使用方便、靈敏度高的二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極，可用于環(huán)境安全檢測(cè)。
[0006]為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極，其特征在于該選擇電極包括一個(gè)二硫蘇糖醇膜層修飾的工作金膜的基片，該基片上覆蓋的工作金膜與引腳金膜通過(guò)金膜層相連，引腳金膜與外包有塑料絕緣層的金屬絲導(dǎo)線(xiàn)通過(guò)焊錫相連接，金屬絲導(dǎo)線(xiàn)的材料為銅絲、鋁絲或銀絲，連接處用環(huán)氧樹(shù)脂膠包裹密封，以保證良好的導(dǎo)電、導(dǎo)通性，并保證工作金膜的使用面積和工作傳導(dǎo)的唯一性，不受干擾影響。值得注意的是，所述基片的外形設(shè)計(jì)立意新穎，如下所示:基片上覆蓋的工作金膜的形狀為正方形，邊長(zhǎng)為2~12mm ;引腳金膜的形狀為小長(zhǎng)方形,長(zhǎng)為6mm,寬為4mm ;整個(gè)基片的形狀為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)為3~18mm，寬為2~12mm，其四周邊緣均用環(huán)氧樹(shù)脂膠密封，以保證良好的電絕緣性。整個(gè)基片的外形設(shè)計(jì)既能充分保證所有選擇電極工作金膜的正方形有效使用面積的一致性，又能保證選擇電極使用壽命的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。
[0007]在選擇電極的設(shè)計(jì)與制備方面，與傳統(tǒng)離子選擇電極方法不同的還有所述基片的制備是通過(guò)真空鍍膜沉積來(lái)形成致密的傳感器件結(jié)構(gòu)，將有效保證選擇電極的可控制備和選擇電極長(zhǎng)期使用的穩(wěn)定性，其制備過(guò)程如下:采用磁控濺射鍍膜法，通過(guò)控制鍍膜真空度< 2.0\10_午&，鍍膜速度< 2.0A/s，在拋光的硅硼酸鹽基板表面上逐步濺射沉積二氧化硅膜層、金屬鈦膜層、銅合金膜層；銅合金膜層經(jīng)拋光處理后，再采用掩膜版法在其表面上濺射沉積工作金膜和引腳金膜；工作金膜經(jīng)化學(xué)清洗處理后再在其表面上組裝修飾二硫蘇糖醇膜層。其中，在拋光的硅硼酸鹽基板表面上逐步濺射沉積的二氧化硅膜層的厚度為60~400nm，金屬鈦膜層的厚度為20~l20nm，銅合金膜層的厚度為60~400nm ;銅合金膜層經(jīng)拋光處理后，在其表面上所沉積工作金膜和引腳金膜的厚度為20~420nm。而且，銅合金膜層材料各組份的質(zhì)量百分含量分別為:Cu 45~60%、Mn 20~28%、Ni 12~24%、Fe 4~9%、Ti
0.1~0.4%、Nb 0.01~0.05%，其中，鈮的使用使銅合金的晶粒更加細(xì)致均勻，鈦的使用使銅合金更加有韌性，并提高耐酸堿和防腐蝕能力。
[0008]在選擇電極膜修飾方面，本發(fā)明提出了一種簡(jiǎn)單的二硫蘇糖醇膜層的組裝修飾方法，即先將選擇電極基片的工作金膜表面用高純純凈水清洗，依次在高純純凈水、無(wú)水乙醇中超聲清洗各0.1~20分鐘，然后取出浸入0.r200mmol/L的二硫蘇糖醇/無(wú)水乙醇溶液中，于4°C冰箱中自組裝f 72小時(shí)，取出干燥，得二硫蘇糖醇膜層修飾的選擇電極，不用時(shí)置于去離子水中于4° C冰箱密封保存。其中，所述高純純凈水為電阻率大于18ΜΩ ^cm的高純水，無(wú)水乙醇為重新蒸餾的無(wú)水乙醇溶劑。
[0009]在選擇電極的電化學(xué)測(cè)試方面，測(cè)試裝置簡(jiǎn)單，操作方便，即該二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極的電化學(xué)測(cè)試裝置如下:以該二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，兩個(gè)電極通過(guò)導(dǎo)線(xiàn)與電位計(jì)相連；測(cè)試時(shí)，二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極和飽和甘汞電極插入裝有攪拌磁子的燒杯中，燒杯放置在磁力攪拌器上，燒杯內(nèi)裝有含汞離子的PH緩沖溶液；通過(guò)測(cè)試一系列已知濃度的汞離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的電位值，以電位值對(duì)濃度值做工作曲線(xiàn)，然后測(cè)試未知濃度汞離子樣品溶液的電位值，通過(guò)工作曲線(xiàn)求出樣品溶液中汞離子的濃度值或含量。其中，所述PH緩沖溶液為ρΗ4.0-ΙΟ.0的Tris-HCl溶液，其配制方法是將0.lmol/L的Tris溶液和0.lmol/L的HCl溶液按適當(dāng)比例混合，用0.1mol/L的NaOH溶液或0.lmol/L的HCl溶液調(diào)節(jié)其pH值。通過(guò)測(cè)試實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該選擇電極的電位響應(yīng)值與汞離子的濃度在1.0X 10_8~1.0X 10_4mol/L范圍內(nèi)成線(xiàn)性關(guān)系，對(duì)汞離子的檢測(cè)下限達(dá)到 5.4X ICT9 mol/L,即 5.4nmol/L。
[0010]本發(fā)明的有益效果是，該選擇電極制作簡(jiǎn)單、成本低廉、使用方便，且金膜平整度高、易進(jìn)行表面修飾，靈敏度很高，優(yōu)于傳統(tǒng)的儀器分析方法，可用于環(huán)境中微量汞離子的快速檢測(cè)，在環(huán)境監(jiān)測(cè)、農(nóng)業(yè)食品與生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中具有非常重要的應(yīng)用前景。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】[0011]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明。
[0012]附圖1是二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極的電化學(xué)測(cè)試裝置示意圖。
[0013]附圖2是二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極的平面結(jié)構(gòu)示意圖。
[0014]附圖3是二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極基片的剖面結(jié)構(gòu)示意圖。
[0015]附圖1中，1.二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極，2.飽和甘汞電極，3.電位計(jì)，4.攪拌磁子，5.燒杯,6.磁力攪拌器。
[0016]附圖2和附圖3中，11.基片，12.工作金膜，13.引腳金膜，14.塑料絕緣層，15.金屬絲導(dǎo)線(xiàn)，16.焊錫，17.環(huán)氧樹(shù)脂膠，21.硅硼酸鹽基板，22.二氧化硅膜層，23.金屬鈦膜層，24.銅合金膜層，25.二硫蘇糖醇膜層，26.二硫蘇糖醇分子。
【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1
選擇電極的組裝制備:
一種二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極的平面結(jié)構(gòu)示意圖如圖2所示，該選擇電極包括一個(gè)二硫蘇糖醇膜層25修飾的工作金膜12的基片11，該基片11上覆蓋的工作金膜12與引腳金膜13通過(guò)金膜層相連，引腳金膜13與外包有塑料絕緣層14的金屬絲導(dǎo)線(xiàn)15通過(guò)焊錫16相連接，金屬絲導(dǎo)線(xiàn)15的材料為銅絲，連接處用環(huán)氧樹(shù)脂膠17包裹密封，以保證良好的導(dǎo)電、導(dǎo)通性。
[0018]如圖2所示，對(duì)所述基片11的外形設(shè)計(jì)如下:基片11上覆蓋的工作金膜12的形狀為正方形，邊長(zhǎng)為6mm ;引腳金膜13的形狀為小長(zhǎng)方形,長(zhǎng)為3mm,寬為Imm ;整個(gè)基片11的形狀為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)為9mm,寬為6mm,其四周邊緣均用環(huán)氧樹(shù)脂膠密封。
[0019]如圖3所示，所述基片11的制備過(guò)程如下:采用磁控濺射鍍膜法，控制鍍膜真空度為1.2X 10_3 Pa，鍍膜速度為1.0 A/s，在拋光的硅硼酸鹽基板21表面上逐步濺射沉積二氧化硅膜層22、金屬鈦膜層23、銅合金膜層24 ;銅合金膜層24經(jīng)拋光處理后，再采用掩膜版法在其表面上濺射沉積工作金膜12和引腳金膜13 ;工作金膜12經(jīng)化學(xué)清洗處理后再在其表面上組裝修飾二硫蘇糖醇膜層25。其中，在拋光的硅硼酸鹽基板21表面上逐步濺射沉積的二氧化硅膜層22的厚度為280nm，金屬鈦膜層23的厚度為40nm，銅合金膜層24的厚度為220nm ;銅合金膜層24經(jīng)拋光處理后，在其表面上所沉積工作金膜12和引腳金膜13的厚度為150nm ;銅合金膜層24材料各組份的質(zhì)量百分含量分別控制為:Cu 54.8%、Mn 23.7%、Ni 14.9%、Fe 6.36%、Ti 0.21%、Nb 0.03%。
[0020]值得注意的是二硫蘇糖醇膜層16的組裝修飾方法，即先將選擇電極基片11的工作金膜12表面用高純純凈水清洗，依次在高純純凈水、無(wú)水乙醇中超聲清洗各I分鐘，然后取出浸入lOmmol/L的二硫蘇糖醇/無(wú)水乙醇溶液中，于4°C冰箱中自組裝12小時(shí)，取出干燥，得二硫蘇糖醇膜層25修飾的選擇電極，不用時(shí)置于去離子水中于4° C冰箱密封保存。其中，高純純凈水為電阻率等于18.3ΜΩ -cm的高純水，無(wú)水乙醇為重新蒸餾的無(wú)水乙醇溶劑。
[0021]實(shí)施例2
汞離子的檢測(cè):
將上述方法組裝修飾的二硫蘇糖醇膜層25修飾的汞離子選擇電極I為工作電極，飽和甘汞電極2作為參比電極，兩個(gè)電極通過(guò)導(dǎo)線(xiàn)與電位計(jì)3相連，進(jìn)行電化學(xué)電位測(cè)試；測(cè)試時(shí)，二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極I和飽和甘汞電極2插入裝有攪拌磁子4的燒杯5中，燒杯5放置在磁力攪拌器6上，燒杯5內(nèi)裝有含汞離子的pH緩沖溶液；通過(guò)測(cè)試一系列已知濃度的汞離子標(biāo)準(zhǔn)溶液的電位值，以電位值對(duì)濃度值做工作曲線(xiàn)，然后測(cè)試未知濃度汞離子樣品溶液的電位值，通過(guò)工作曲線(xiàn)求出樣品溶液中汞離子的濃度值或含量。通過(guò)測(cè)試實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該選擇電極的電位響應(yīng)值與汞離子的濃度在1.0X 10_8~1.0X 10_4mol/L范圍內(nèi)成線(xiàn)性關(guān)系，對(duì)汞離子的檢測(cè)下限達(dá)到5.4X 10_9 mol/L,即5.4nmol/L。
[0022]實(shí)施例3 選擇電極的重現(xiàn)性:
將按上述方法組裝修飾的10支二硫蘇糖醇膜層25修飾的汞離子選擇電極I為工作電極，飽和甘汞電極2作為參比電極，分別對(duì)1.0Χ10-6 mol/L和1.0Χ10-7 mol/L的汞離子溶液樣品進(jìn)行電化學(xué)電位測(cè)試，可以看出，在連續(xù)進(jìn)行10次測(cè)定后，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為
2.4%和3.1%，表明該選擇電極檢測(cè)方法的重現(xiàn)性好。
[0023]實(shí)施例4 選擇電極的選擇性:
將按上述方法組裝修飾的10支二硫蘇糖醇膜層25修飾的汞離子選擇電極I為工作電極，飽和甘汞電極2作為參比電極，分別考察了常見(jiàn)陽(yáng)離子對(duì)汞離子測(cè)定的影響，發(fā)現(xiàn)K+、Ca2+、Na+、Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Ag+、Zn2+、Bi3+、Co2+、Sr2+、Mn2+、NH4+ 等十六種金屬離子的干擾不明顯，表明該選擇 電極檢測(cè)方法的選擇性好。
[0024]實(shí)施例5
環(huán)境廢水樣品中汞離子的測(cè)定:
將按上述方法組裝修飾的10支二硫蘇糖醇膜層25修飾的汞離子選擇電極I為工作電極，飽和甘汞電極2作為參比電極，分別考察了 8個(gè)水樣品中汞離子的加標(biāo)檢測(cè)，回收率在94.6^105.2%之間，說(shuō)明該方法回收率好；并與標(biāo)準(zhǔn)雙硫腙分光光度法對(duì)照，樣品的測(cè)量結(jié)果比較一致，符合定量分析的要求，說(shuō)明該選擇電極可應(yīng)用于實(shí)際廢水樣品中汞離子的檢測(cè)。
【權(quán)利要求】
1.一種二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極（1)，其特征在于該選擇電極包括一個(gè)二硫蘇糖 醇膜層（25)修飾的工作金膜（12)的基片（11)，該基片（11)上覆蓋的工作金膜（12)與引腳 金膜（13)通過(guò)金膜層相連，引腳金膜（13)與外包有塑料絕緣層（14)的金屬絲導(dǎo)線(xiàn)（15)通 過(guò)焊錫（16)相連接，連接處用環(huán)氧樹(shù)脂膠（17)包裹密封。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇電極，其特征在于所述基片（11)的外形設(shè)計(jì)如下：基片 (11)上覆蓋的工作金膜（12)的形狀為正方形，邊長(zhǎng)為2?12mm;引腳金膜（13)的形狀為小長(zhǎng) 方形，長(zhǎng)為1?6mm,寬為1?4mm ;整個(gè)基片（11)的形狀為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)為3?18mm,寬為2?12mm, 其四周邊緣均用環(huán)氧樹(shù)脂膠密封。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇電極，其特征在于所述金屬絲導(dǎo)線(xiàn)（15)的材料為銅絲、 鋁絲或銀絲。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇電極，其特征在于所述基片（11)的制備過(guò)程如下：采 用磁控濺射鍍膜法，通過(guò)控制鍍膜真空度< 2. OX 10_3 Pa，鍍膜速度< 2. 0 A/s，在拋光的 硅硼酸鹽基板（21)表面上逐步濺射沉積二氧化硅膜層（22)、金屬鈦膜層（23)、銅合金膜層(24);銅合金膜層（24)經(jīng)拋光處理后，再采用掩膜版法在其表面上濺射沉積工作金膜（12) 和引腳金膜（13);工作金膜（12)經(jīng)化學(xué)清洗處理后再在其表面上組裝修飾二硫蘇糖醇膜層(25)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的選擇電極，其特征是：在拋光的硅硼酸鹽基板（21)表面上逐 步濺射沉積的二氧化硅膜層（22)的厚度為6(T400nm，金屬鈦膜層（23)的厚度為2(Tl20nm， 銅合金膜層（24)的厚度為6(T400nm ;銅合金膜層（24)經(jīng)拋光處理后，在其表面上所沉積工 作金膜（12)和引腳金膜（13)的厚度為2(T420nm。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的選擇電極，其特征在于銅合金膜層（24)材料各組份的質(zhì)量百 分含量分別為：Cu 45?60%、Mn 20?28%、Ni 12?24%、Fe 4?9%、Ti 0. 1 ?0. 4%、Nb 0. 01 ?0. 05%。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的選擇電極，其特征在于二硫蘇糖醇膜層（25)的組裝修飾方 法，即先將選擇電極基片（11)的工作金膜（12)表面用高純純凈水清洗，依次在高純純凈 水、無(wú)水乙醇中超聲清洗各0. r20分鐘，然后取出浸入0. r200mmol/L的二硫蘇糖醇/無(wú) 水乙醇溶液中，于4°C冰箱中自組裝f 72小時(shí)，取出干燥，得二硫蘇糖醇膜層（25)修飾的選 擇電極，不用時(shí)置于去離子水中于4° C冰箱密封保存。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的選擇電極，其特征在于所述高純純凈水為電阻率大于 18MQ ? cm的高純水，無(wú)水乙醇為重新蒸懼的無(wú)水乙醇溶劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的選擇電極，其特征在于該二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極（1) 的電化學(xué)測(cè)試裝置如下：以該二硫蘇糖醇膜汞離子選擇電極（1)為工作電極，飽和甘汞電 極（2)為參比電極，兩個(gè)電極通過(guò)導(dǎo)線(xiàn)與電位計(jì)（3)相連；測(cè)試時(shí)，二硫蘇糖醇膜汞離子選 擇電極（1)和飽和甘汞電極（2 )插入裝有攪拌磁子（4 )的燒杯（5 )中，燒杯（5 )放置在磁力 攪拌器（6)上，燒杯（5)內(nèi)裝有含汞離子的pH緩沖溶液；通過(guò)測(cè)試一系列已知濃度的汞離 子標(biāo)準(zhǔn)溶液的電位值，以電位值對(duì)濃度值做工作曲線(xiàn)，然后測(cè)試未知濃度汞離子樣品溶液 的電位值，通過(guò)工作曲線(xiàn)求出樣品溶液中汞離子的濃度值或含量。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的選擇電極，其特征在于所述pH緩沖溶液為pH4.(Tl0.0的 Tris-HCl溶液，其配制方法是將0. lmol/L的Tris溶液和0. lmol/L的HC1溶液按適當(dāng)比例 混合，用0. lmol/L的NaOH溶液或0. lmol/L的HC1溶液調(diào)節(jié)其pH值。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的選擇電極，其特征在于該選擇電極的電位響應(yīng)值與汞離子的濃度在1.0X10_8~1.0X10_4mol/L范圍內(nèi)成線(xiàn)性關(guān)系，對(duì)汞離子的檢測(cè)下限達(dá)到.4X 10 9 m ol/L,5.4nmol/L。
【文檔編號(hào)】G01N27/333GK103760205SQ201410064648
【公開(kāi)日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2014年2月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月26日
【發(fā)明者】曹忠, 梁海琴, 曹婷婷, 袁美玲, 付勇, 肖忠良 申請(qǐng)人:長(zhǎng)沙理工大學(xué)