一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，該方法包括以下步驟：(1)原藥吡蟲啉溶解到丙酮中稀釋成5個濃度；(2)稀釋藥液注入指型管底，傾斜放平轉(zhuǎn)動指形管；(3)將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，檢查結(jié)果，獲得LC60，LC70和LC80等；(4)以LC60，LC70和LC80濃度的吡蟲啉均勻展布在指型管中，將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，檢查結(jié)果，初步確定診斷劑量及符合度；(5)利用診斷劑量測定田間蘋果繡線菊蚜的抗藥性。本發(fā)明使用玻璃指型管，提高了抗性監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確性，降低藥劑的使用量節(jié)約成本。本發(fā)明測定試劑盒，適合于果園中直接測定蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉的抗藥性，操作簡單，方便，能快速測定結(jié)果。
【專利說明】一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，屬于農(nóng)藥學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]蘋果繡線菊姆(Aphiscitricola Vander Goot)屬于同翅目(Homoptera)蟲牙科(Aphididae aphids),主要寄主有蘋果、梨、山植、繡線菊等植物，是我國北方果園中為害果樹的主要害蟲之一。楊軍玉等(2013)稱蘋果繡線菊蚜各省均有發(fā)生，發(fā)生嚴(yán)重的省份是河北、河南、山西和山東，甘肅、遼寧、云南和陜西發(fā)生較輕；殺蟲劑使用概率從高到低分別為吡蟲啉、阿維菌素和高效氯氰菊酯。由于多年的化學(xué)防治為主，致使其產(chǎn)生一定的抗藥性。為了延緩蘋果繡線菊蚜抗藥性的發(fā)展，及時制定抗性治理措施，抗藥性監(jiān)測成為準(zhǔn)確獲知蘋果繡線菊蚜在某地抗性水平的有效手段。在國內(nèi)外關(guān)于蘋果繡線菊蚜抗藥性是1977年Brader最初報道的，姚洪渭(2002)對世界上報道的同翅目抗性害蟲種類作了粗略估計，其中蘋果黃蚜在韓國己對有機磷和氨基甲酸醋類殺蟲劑產(chǎn)生了抗性。王金信等(1998)等采用點滴法測定了河北滄州、河南商丘、山東蒙陰、遼寧朝陽、山東泰安、河北昌黎、安徽碭山、山東榮城等地蘋果繡線菊蚜對氰戊菊酯和氧化樂果的抗藥性。徐琴等(2002)采用點滴法測定了山西省晉中、忻州和運城三地蘋果黃蚜對7種菊酯類殺蟲劑的抗藥性測定。彭波等(2010)采用點滴法對山東省濰坊市、煙臺市、泰安市、榮成市、文登市、龍口市、萊西市、平度市、費縣、蒙陰縣、棲霞市和沂源縣等地對順式氯氰菊酯、吡蟲啉、氧化樂果和啶蟲脒進(jìn)行了抗藥性測定。封云濤(2012年)采用浸潰法對山西運城地區(qū)蘋果繡線菊蚜對啶蟲脒、吡蟲啉、聯(lián)苯菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、辛硫磷和馬拉硫磷進(jìn)行了抗藥性測定。
[0003]上述蘋果繡線菊蚜的抗藥性測定工作確實為其田間防治及抗性治理提供了極大的幫助，但是測定方法多采用點滴法和浸潰法，存在操作不易掌握和繁瑣以及方法不規(guī)范的問題。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有監(jiān)測方法中存在的不足，在已有研究方法的基礎(chǔ)供一種簡便、快速、準(zhǔn)確的抗性監(jiān)測方法，以滿足當(dāng)前果園抗藥性監(jiān)測的需要。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下。
[0006]一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，該方法包括以下步驟:
[0007](I)原藥吡蟲啉溶解到丙酮中稀釋成5個濃度；
[0008](2)稀釋藥液注入指型管底，小心傾斜放平轉(zhuǎn)動指形管直至無液滴，室溫放置2h ；
[0009](3)將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，一定時間后檢查結(jié)果，獲得LC6tl, LC70和LC8tl等，初步獲得備選診斷劑量；
[0010](4)以LC6tl, LC70和LC8tl濃度的吡蟲啉均勻展布在指型管中，將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，一定時間后檢查結(jié)果，初步確定診斷劑量及符合度；[0011](5)利用診斷劑量測定田間蘋果繡線菊蚜的抗藥性。
[0012]進(jìn)一步地,所述步驟(2)中稀釋藥液注入指型管中(長度*內(nèi)徑=75mm*16mm),體積數(shù)為220uL，輕放平，此時藥液正好流至管口而不外溢，室溫滾動，直至丙酮全部揮發(fā)。并且在室溫放置2h后方能進(jìn)行蘋果繡線菊蚜的抗藥性測定。
[0013]進(jìn)一步地，所述步驟(3)中蘋果繡線菊蚜從足輕挑，放置于指型管中，不能傷及口針。室溫放置2h后觀察蘋果繡線菊蚜死亡情況，蘋果繡線菊蚜不能自由爬行即為死亡，自由爬行即為存活。
[0014]該發(fā)明的有益效果在于:
[0015](I)本發(fā)明使用玻璃指型管(長度*內(nèi)徑=75mm*16mm),利于藥劑的均勻附著,提高了抗性監(jiān)測結(jié)果的準(zhǔn)確性；同時降低藥劑的使用量節(jié)約成本。
[0016](2)本發(fā)明蘋果繡線菊蚜抗藥性測定試劑盒，適合于果園中直接測定蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉的抗藥性，操作簡單，方便，快速測定結(jié)果。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】進(jìn)行描述，以便更好的理解本發(fā)明。
[0018]實施例
[0019]一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，具體包括以下方面:
[0020](I)試劑盒診斷劑量的初步確定:
[0021]稱取計算質(zhì)量為0.1042g的96%的吡蟲啉原藥，用IOOmL丙酮溶解，配成IOOmg/L的吡蟲啉母液，后用丙酮稀釋成25.6，12.8，6.4，1.6，0.4和0.lmg/L,丙酮為對照，每個處理3次重復(fù)。然后用微量移液器吸取220uL藥液注入指型管底(75mm*16mm)，小心傾斜放平指形管，藥液隨著丙酮的揮發(fā)而固著在玻璃管整個內(nèi)壁上，待丙酮全部揮發(fā)后，玻璃管藥膜放置室溫2h。輕挑蘋果繡線菊蚜(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗田)放入管中，每管內(nèi)15~20頭，用紗布蓋住管口。處理后試蟲放置在溫度25°C、光周期L: D = 14h: IOh的培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)，2h后檢查試蟲死亡數(shù)和存活數(shù)，根據(jù)毒力方程計算LC5tl、選取連續(xù)三次LC5tl最為接近、測定結(jié)果穩(wěn)定的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)合并，然后計算LC6(1、LC70和LC8tlt5
[0022]此次試驗由于快速檢測僅2h后即查結(jié)果，故檢查時所用具體的死亡判定標(biāo)準(zhǔn)非常重要，經(jīng)過多次試驗最終確定標(biāo)準(zhǔn)為:蘋果繡線菊蚜不能爬行即為死亡，自由爬行即為存活。
[0023]結(jié)果如下:
[0024]對青島農(nóng)業(yè)大學(xué)標(biāo)本園蘋果繡線菊蚜種群采用指形管藥膜法進(jìn)行生物測定，選取連續(xù)三次LC5tl最為接近、測定結(jié)果穩(wěn)定的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)合并(見表1)，采用Probit軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，分別計算LC6(1、LC70, LC80所對應(yīng)的濃度，并作為備選診斷劑量。
[0025]表1:
[0026]
【權(quán)利要求】
1.一種蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)原藥吡蟲啉溶解到丙酮中稀釋成5個濃度； (2)稀釋藥液注入指型管底，傾斜放平轉(zhuǎn)動指形管直至無液滴，室溫放置2h； (3)將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，檢查結(jié)果，獲得LC6tl,LC7tl和LC8tl等，初步獲得備選診斷劑量； (4)以LC6tl,LC7tl和LC8tl濃度的吡蟲啉均勻展布在指型管中，將蘋果繡線菊蚜用毛筆輕挑轉(zhuǎn)至指型管，檢查結(jié)果，初步確定診斷劑量及符合度； (5)利用診斷劑量測定田間蘋果繡線菊蚜的抗藥性。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，其特征在于:所述步驟⑵中稀釋藥液注入指型管中(長度*內(nèi)徑=75mm*16mm)，體積數(shù)為220uL，輕放平，此時藥液正好流至管口而不外溢，室溫滾動，直至丙酮全部揮發(fā)，并且在室溫放置2h后進(jìn)行蘋果繡線菊蚜的抗藥性測定。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果繡線菊蚜對吡蟲啉抗藥性的監(jiān)測方法，其特征在于:所述步驟(3)中蘋果繡線菊蚜從足輕挑，放置于指型管中，不能傷及口針；室溫放置2h后觀察蘋果繡線菊蚜死亡情況，蘋果繡線菊蚜不能自由爬行即為死亡，自由爬行即為存活。
【文檔編號】G01N33/48GK103776992SQ201410043998
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2014年1月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月26日
【發(fā)明者】王俊平, 鄭長英 申請人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
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