一種1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的分析檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種對(duì)1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的分析檢測(cè)方法。本發(fā)明采用高效液相色譜法,色譜條件為:聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物色譜柱:MKF-RP-HH,柱規(guī)格:柱長(zhǎng)為100~300mm,柱內(nèi)徑為4.0~8.0mm,填料粒徑為:4~8μm;流動(dòng)相:乙腈/水,洗脫梯度:在6-10min,50~75%乙腈升至85~100%乙腈;流速:0.8~1.2mL/min;檢測(cè)波為:214±10nm和或250±10nm;進(jìn)樣量:10~20μL;使用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式,在最大檢測(cè)靈敏度條件下對(duì)1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了檢測(cè),方法簡(jiǎn)單,快速,準(zhǔn)確。
【專利說明】一種1-苯基-2-硝基丙稀及其相關(guān)物質(zhì)的分析檢測(cè)方法 (一)
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種高效液相色譜(HPLC)分析檢測(cè)方法,具體涉及一種以聚苯乙烯 二乙烯基苯色譜介質(zhì)為分離載體的分析檢測(cè)1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的方法。 (二)
【背景技術(shù)】
[0002] 在化學(xué)合成方面,1-苯基-2-硝基丙烯(MNS)可作為一種重要的合成中間體,通過 不同方法轉(zhuǎn)變成多種官能團(tuán),得到不同類型的化合物,例如:胺、腈、醇、醛、酮等化合物。在 生物學(xué)方面,MNS具有明顯的抗腫瘤及殺菌作用,可以作為一種高效的抗腫瘤藥物,因此,對(duì) 1-苯基-2-硝基丙烯的質(zhì)量控制非常重要。
[0003] 麗S合成過程中的主要相關(guān)物質(zhì)為硝基乙烷和苯甲醛。硝基乙烷的一般檢測(cè)方 法為氣相色譜法,而苯甲醛的傳統(tǒng)的測(cè)定方法則有氣相色譜法、單波長(zhǎng)紫外吸收法和高效 液相色譜法[參文獻(xiàn):高敏,曾新安,肖利民.青梅酒中苯甲醛含量的測(cè)定[J].釀酒科技, 2009,(5) :110?112]。但關(guān)于MNS的測(cè)定,及對(duì)相關(guān)物質(zhì)的分析檢測(cè),尚未見有關(guān)文獻(xiàn)報(bào) 道。MNS的沸點(diǎn)比較高,為263°C (at760mmHg),且在高溫條件下易聚合,而氣相色譜法要求 的檢測(cè)溫度要高于被檢測(cè)物質(zhì)的沸點(diǎn),所以氣相色譜法不適合于三種物質(zhì)的分離檢測(cè)。因 此開發(fā)一種操作快速簡(jiǎn)單,分析成本較低的檢測(cè)方法分析測(cè)定1-苯基-2-硝基丙烯及其相 關(guān)物質(zhì)具有重要意義。
[0004] 本發(fā)明主要采用聚合物色譜柱與雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式,優(yōu)化了流動(dòng)相梯度, 在最大檢測(cè)靈敏度的條件下對(duì)1-苯基-2-硝基丙烯及相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行了快速檢測(cè)。該方法 簡(jiǎn)單,分析速度快,靈敏度高,節(jié)約成本,分析效果好。 (三)
【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明的目的是開發(fā)研究一種能對(duì)1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確 檢測(cè)的分析檢測(cè)方法。 本發(fā)明的技術(shù)方案如下,一種1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜快速 分析檢測(cè)方法,其特點(diǎn)在于采用一種多孔型聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物為固定相的高聚 物色譜柱與雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式,高效液相色譜操作條件為: a.高聚物色譜柱:MKF-RP-HH(南京麥科菲高效分離載體有限公司),柱規(guī)格:柱長(zhǎng)為 100?300mm,柱內(nèi)徑為4. 0?8. 0mm,填料粒徑為:4?8 μ m ; 13.流動(dòng)相:乙腈/7欠,洗脫梯度:在6-1011^11,50?75%乙腈升至85?100%乙腈 ; c. 流速:0· 8?L 2mL/min,進(jìn)樣量:10?20μ L,柱溫:室溫; d. 采用UV檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)為214±10nm和或250±10nm。 與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和效果如下: 1、 選用高聚物色譜柱,流動(dòng)相梯度為:在6-10min,50?75 %乙腈升至85?100 %乙腈 的范圍內(nèi),1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)達(dá)到了有效的分離。 2、 采用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式,在相關(guān)物質(zhì)最大靈敏度條件下對(duì)其進(jìn)行測(cè)定,能準(zhǔn) 確測(cè)定相關(guān)物質(zhì)的含量。 3、本發(fā)明操作簡(jiǎn)單,分析成本低,為1-苯基-2-硝基丙烯的質(zhì)量檢測(cè)提供了技術(shù)支持。 (四) 【專利附圖】
【附圖說明】: 圖1(液相色譜圖)為本發(fā)明的舉例方法效果圖之一,即具體條件:色譜柱: MKF-RP-HH (柱規(guī)格:柱長(zhǎng)為250mm,柱內(nèi)徑為4. 6mm,填料粒徑為:6 μ m);流動(dòng)相:乙腈和 水;洗脫梯度:74%乙腈一92%乙腈(0 - 811^11),檢測(cè)波長(zhǎng):21411111和25〇11111;流速:1.〇11117 min ;進(jìn)樣物質(zhì):供試品溶液。進(jìn)樣量:20 μ L。圖1 (液相色譜圖)中1、2、3和4分別代表 硝基乙烷峰、苯甲醛峰、1-苯基-2-甲基亞硝酸乙烯酯和1-苯基-2-硝基丙烯峰。圖1 (液 相色譜圖)為本發(fā)明的舉例方法效果圖之一,其它舉例方法圖不一一給出。 (五) 【具體實(shí)施方式】 實(shí)驗(yàn)器材及試劑: (1) 實(shí)驗(yàn)儀器: 戴安Summit型高效液相色譜系統(tǒng)(美國戴安公司),配備P680HPLC泵,UVD-170U可變 波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器,AT-330柱溫箱、8125型進(jìn)樣裝置;工作站(美國戴安Chromeleon系統(tǒng)) (2) 色譜條件: 色譜柱:MKF-RP-HH(南京麥科菲高效分離載體有限公司),柱規(guī)格:柱長(zhǎng)為100? 300mm,柱內(nèi)徑為4.0?8. 0mm,填料粒徑為:4?8μπι;流動(dòng)相:乙腈和水;洗脫梯度:在 6-10min,50?75%乙腈升至85?100%乙腈;檢測(cè)波長(zhǎng):214± 10nm和或250± 10nm雙波 長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式;流速:〇. 8?1. 2mL/min ;進(jìn)樣量:10?20 μ L ;柱溫:室溫。 (3) 實(shí)驗(yàn)試劑: 1-苯基-2-硝基丙烯供試品(合成),1-苯基-2-硝基丙烯標(biāo)準(zhǔn)品(美國 sigma-Aldrich化工試劑生產(chǎn)公司),苯甲醒和硝基乙燒(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司); 色譜純乙腈(德國merck公司),超純水(自制)。 供試品溶液的配制:取1-苯基-2-硝基丙烯供試品約2mg,精密稱定,用乙腈定容至 10mL,待測(cè)(現(xiàn)用現(xiàn)配) 對(duì)照品溶液的配置: 對(duì)照品_1 :取1_苯基_2_硝基丙烯標(biāo)準(zhǔn)品約2mg,精密稱定,用乙臆定容至10mL,待測(cè) (現(xiàn)用現(xiàn)配) 對(duì)照品-2 :取10 μ L硝基乙燒,用乙腈定容至10mL。取上溶液用乙腈稀釋至10. 5 μ g/ mL,待測(cè)(現(xiàn)用現(xiàn)配) 對(duì)照品-3 :取10 μ L苯甲醒,用乙腈定容至10mL。取上溶液用乙腈稀釋至10. 4 μ g/mL, 待測(cè)(現(xiàn)用現(xiàn)配) 實(shí)施例1 色譜條件:檢測(cè)機(jī)器:戴安Summit型高效液相色譜系統(tǒng);色譜柱:MKF-RP-HH(柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為250臟,柱內(nèi)徑為4. 6臟,填料粒徑為:8 μ m);流動(dòng)相:乙腈和水;洗脫梯度:74%乙 腈一92(%乙腈(0 - 8111;[11),流速:1.01]117111;[11;檢測(cè)波長(zhǎng):214111]1和25〇11111 ;進(jìn)樣物質(zhì):供試品 溶液與對(duì)照品-1、-2和_3。進(jìn)樣量:20 μ L。結(jié)果:1_苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)均 達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。 實(shí)施例2 色譜條件:檢測(cè)儀器、流動(dòng)相、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)施例1,色譜柱:MKF-RP-HH (柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為150mm,柱內(nèi)徑為4. 6mm,填料粒徑為:6 μ m);洗脫梯度:70%乙腈一89%乙腈 (0 - 6min);流速:0. 8mL/min ;檢測(cè)波長(zhǎng):214nm ;進(jìn)樣量:10 μ L。結(jié)果:1-苯基-2-硝基丙 烯及其相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。 實(shí)施例3 色譜條件:檢測(cè)儀器、流動(dòng)相、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)施例1,色譜柱:MKF-RP-HH(柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為100mm,柱內(nèi)徑為4. 0mm,填料粒徑為:4 μ m);洗脫梯度:60%乙腈一100 %乙腈 (0- lOmin);流速:0. 9mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):250nm;進(jìn)樣量:15yL。結(jié)果:1-苯基-2-硝基 丙烯及其相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。 實(shí)施例4 色譜條件:檢測(cè)儀器、流動(dòng)相、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)施例1,色譜柱:MKF-RP-HH (柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為300mm,柱內(nèi)徑為8.0mm,填料粒徑為:9 μ m);洗脫梯度:50%乙腈一98%乙腈 (0 - 7min);流速:L OmL/min ;檢測(cè)波長(zhǎng):214和250nmn ;進(jìn)樣量:20μ L。結(jié)果:1-苯 基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。 實(shí)施例5 色譜條件:檢測(cè)儀器、流動(dòng)相、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)施例1,色譜柱:MKF-RP-HH(柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為200mm,柱內(nèi)徑為7.0mm,填料粒徑為:8 μ m);洗脫梯度:75%乙腈一85%乙腈 (0 - 9min);流速:1. lmL/min ;檢測(cè)波長(zhǎng):214nm ;進(jìn)樣量:10 μ L。結(jié)果:1-苯基-2-硝基丙 烯及其相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。 實(shí)施例6 色譜條件:檢測(cè)儀器、流動(dòng)相、進(jìn)樣物質(zhì)同實(shí)施例1,色譜柱:MKF-RP-HH (柱規(guī)格: 柱長(zhǎng)為250mm,柱內(nèi)徑為4. 6mm,填料粒徑為:5μπι);洗脫梯度:55%乙腈一95%乙腈 (0 - 6min),流速:0. 8mL/min檢測(cè)波長(zhǎng):250nm進(jìn)樣量:15 μ L。結(jié)果:1-苯基-2-硝基丙烯 及其相關(guān)物質(zhì)均達(dá)到了基線分離,分離度均大于1. 5。
【權(quán)利要求】
1. 一種1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜分析檢測(cè)方法,其特征在于 使用高效液相色譜儀,其色譜條件為: a.高聚物色譜柱的選用:MKF-RP-HH型色譜柱,柱規(guī)格:柱長(zhǎng)為100?300mm,柱內(nèi)徑為 4. 0?8. 0mm,填料粒徑為:4?8 μ m ;
13.流動(dòng)相:乙腈/7欠,洗脫梯度:在6-1011^11,50?75%乙腈升至85?100%乙腈 ; c. 流速:0.8?L2mL / min,進(jìn)樣量:10?20yL,柱溫:室溫; d. 采用UV檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)為214±10nm和或250±10nm雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)檢測(cè)模式。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜分析檢 測(cè)方法,其特征在于,所述的色譜柱為以聚苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)為基質(zhì)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜分析檢 測(cè)方法,其特征在于,采用214±10nm和250±10nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)模式,也可采用214nm±10 或250 ± 10nm單波長(zhǎng)檢測(cè)模式。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的1-苯基-2-硝基丙烯及其相關(guān)物質(zhì)的高效液相色譜分析檢 測(cè)方法,其特征在于,其相關(guān)物質(zhì)為硝基乙烷或苯甲醛或其光異構(gòu)化產(chǎn)物1-苯基-2-甲基 亞硝酸乙烯酯。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104142370SQ201410001986
【公開日】2014年11月12日 申請(qǐng)日期:2014年1月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月3日
【發(fā)明者】劉曉寧, 徐艷, 魏榮卿 申請(qǐng)人:南京工業(yè)大學(xué)