一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法，該方法通過(guò)以無(wú)毒無(wú)副作用的甘油、乳酸、蒸餾水混合液作為浮載劑，再用石蠟熱融形成均勻的蠟環(huán)封固蓋玻片，冷卻后成為致密的密閉環(huán)境，得到植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本，石蠟既作為支撐物，又作為封固劑，不用涂上指甲油、樹(shù)脂或凡士林等封片劑，操作簡(jiǎn)單，載玻片加熱時(shí)氣體受熱會(huì)自動(dòng)逸出，植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本可保存標(biāo)本6個(gè)月以上，因此是一種安全便捷，無(wú)毒無(wú)副作用，易于觀察，保存期較長(zhǎng)的臨時(shí)玻片。
【專利說(shuō)明】一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于密封載玻片標(biāo)本制作，具體涉及一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本玻片的制作方法。
【背景技術(shù)】
[0002]植物病原真菌是指能夠造成植物病害、利用柯赫法則可以加以鑒定的一類真菌病原物。該類真菌以多種機(jī)制影響植物生長(zhǎng)發(fā)育，造成植物出現(xiàn)不同程度的病害。準(zhǔn)確、有效地鑒定和檢測(cè)這些病原物是進(jìn)行檢疫、監(jiān)測(cè)及防治等工作的重要基礎(chǔ)。
[0003]對(duì)植物病原真菌進(jìn)行分類鑒定和形態(tài)研究，一般首先要制作真菌玻片，真菌玻片可以分為臨時(shí)玻片和永久玻片，目前臨時(shí)玻片制作一般直接用水做浮載劑，蓋上蓋玻片后直接觀察，但臨時(shí)玻片只能保存使用數(shù)十分鐘，時(shí)間稍長(zhǎng)水分便會(huì)揮發(fā)，影響進(jìn)一步觀察，并容易形成氣泡，且不能進(jìn)一步封固保存。也有人用乳酚油做浮載劑，蓋上蓋玻片后，蓋玻片周圍涂上透明的指甲油、樹(shù)脂或凡士林等封片固定，這種臨時(shí)玻片可保存標(biāo)本數(shù)天至數(shù)周，但其制片過(guò)程較為復(fù)雜，不易長(zhǎng)時(shí)間保存，影響觀察。但是乳酚油容易產(chǎn)生氣泡，還可能影響某些真菌孢子的大小，甚至有時(shí)可使某些真菌孢子破裂。乳酚油中含酸，可溶解真菌色素。同時(shí)乳酚油的折射率與孢子和菌絲體非常相近，比較難于觀察和測(cè)量，且難于封固玻片。乳酚油中苯酚氣味較重，并且有致癌作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的是提供一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法，該制作方法制作簡(jiǎn)單，無(wú)毒無(wú)副作用，易于觀察，保存期較長(zhǎng)的臨時(shí)玻片。
[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法，步驟如下:
a、在載玻片中央滴加浮載劑2.5 μ L，所述浮載劑為甘油:乳酸:蒸餾水以體積比2:1:1比例配制得到；浮載劑作用在于防止干燥和光線擴(kuò)散；
b、用挑針挑取植物病原真菌的菌絲體或子實(shí)體，置于載玻片上的浮載劑內(nèi)，在解剖鏡下觀察并調(diào)整植物病原真菌形態(tài)；
C、在載玻片上的浮載劑的左上角和右下角各放置一塊體積為2?3 mm3的石蠟，在石蠟和浮載劑上蓋上蓋玻片，載玻片置于64 V的加熱板上加熱，待石蠟融化后自然冷卻，得到植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本。石蠟具有很好的密封性，且不溶于水，不對(duì)標(biāo)本造成影響，克服了一般方法制作的標(biāo)本在較短時(shí)間會(huì)干，不能長(zhǎng)時(shí)間保存和觀察的缺點(diǎn)。
[0006]與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法，該方法通過(guò)以無(wú)毒無(wú)副作用的甘油、乳酸、蒸餾水混合液作為浮載劑，再用石蠟熱融形成均勻的蠟環(huán)封固蓋玻片，冷卻后成為致密的密閉環(huán)境，得到植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本，石蠟既作為支撐物，又作為封固劑，不用涂上指甲油、樹(shù)脂或凡士林等封片劑，操作簡(jiǎn)單，載玻片加熱時(shí)氣體受熱會(huì)自動(dòng)逸出，植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本可保存標(biāo)本6個(gè)月以上，因此是一種安全便捷，無(wú)毒無(wú)副作用，易于觀察，保存期較長(zhǎng)的臨時(shí)玻片。
【具體實(shí)施方式】
[0007]以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0008]實(shí)施例1
1、通過(guò)培養(yǎng)大麗輪枝菌VI，獲得純培養(yǎng)的Vl菌絲體、微菌核、輪枝狀分生孢子梗和分生孢子；2、按照甘油:乳酸:蒸餾水體積比為2:1:1的比例，配制成無(wú)毒無(wú)副作用的浮載劑1mL,滅菌后備用；3、在干凈載玻片中央使用移液器滴加浮載劑2.5 μ L，用滅菌挑針挑取上述已培養(yǎng)好的Vl菌絲體或微菌核或輪枝狀分生孢子?；蚍稚咦?，置于載玻片上的浮載劑內(nèi)，在解剖鏡下觀察并調(diào)整Vl菌絲體等形態(tài)，使得各種微觀形態(tài)較為清晰可見(jiàn)；4、在載玻片上浮載劑的上角和右下角各放置一塊體積為2?3 mm3的石蠟，在石蠟和浮載劑上蓋上蓋玻片，載玻片置于64 1:的加熱板上加熱(加熱時(shí)間大約為30-40 S)，待石蠟融化后自然冷卻，得到植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本。5、在蓋玻片上加貼包括植物病原真菌中文名、學(xué)名、寄主、來(lái)源、采集地等相關(guān)信息的紙質(zhì)標(biāo)簽，用膠水粘貼在蓋玻片相應(yīng)位置上，制作完成，可保存6個(gè)月以上。6、將密封好的載玻片標(biāo)本水平的放在顯微鏡的載物臺(tái)上；7、開(kāi)啟顯微鏡，調(diào)整顯微鏡亮度，將顯微鏡調(diào)整到聚焦?fàn)顟B(tài)，對(duì)玻片標(biāo)本進(jìn)行顯微觀察，觀察容易。
[0009]實(shí)施例2
與實(shí)施例1基本相同，所不同的只是大麗輪枝菌由黑白輪枝菌替代，當(dāng)然也可以由其它植物病原真菌替代，在此不一一列舉。
【權(quán)利要求】
1.一種植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本的制作方法，其特征在于步驟如下: a、在載玻片中央滴加浮載劑2.5 μ L，所述浮載劑為甘油:乳酸:蒸餾水以體積比2:1:1比例配制得到； b、用挑針挑取植物病原真菌的菌絲體或子實(shí)體，置于載玻片上的浮載劑內(nèi)，在解剖鏡下觀察并調(diào)整植物病原真菌形態(tài)； C、在載玻片上的浮載劑的左上角和右下角各放置一塊體積為2?3 mm3的石蠟，在石蠟和浮載劑上蓋上蓋玻片，載玻片置于64 V的加熱板上加熱，待石蠟融化后自然冷卻，得到植物病原真菌密封載玻片標(biāo)本。
【文檔編號(hào)】G01N1/28GK104374616SQ201410525853
【公開(kāi)日】2015年2月25日 申請(qǐng)日期:2014年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月9日
【發(fā)明者】段維軍, 郭立新, 顧建鋒, 陳先鋒 申請(qǐng)人:寧波檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院
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