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杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測(cè)定方法，其特征在于：將杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150～1:20的料液比將杭白菊放入有機(jī)溶劑中提取，重復(fù)提取1～5次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，得到芹菜素和葉黃素。所述測(cè)量方法采用高效液相色譜法。本發(fā)明操作簡(jiǎn)單，可以同時(shí)提取并測(cè)定杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質(zhì)含量，減少了分別提取測(cè)量的繁瑣，并最大限度的減少了有效物質(zhì)的損失，為杭白菊相關(guān)產(chǎn)品的進(jìn)一步推廣和深度加工提供理論依據(jù)。
【專利說明】杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取及含量測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及物質(zhì)含量測(cè)定范疇，具體涉及的是同時(shí)提取杭白菊中芹菜素和葉黃素，并進(jìn)行含量測(cè)定的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]杭白菊，又名甘菊、白菊花、茶菊、藥菊，是甘菊中的佳品。杭白菊主產(chǎn)于浙江桐鄉(xiāng)，為道地藥材“浙江八味”之一，亦為衛(wèi)生部新批的藥食兩用資源。杭白菊有很高的藥用價(jià)值，還有延年益壽的功效?！堆a(bǔ)農(nóng)書》載“甘菊性甘溫，久服最有益”，元代《本草衍義補(bǔ)遺》說“菊花能補(bǔ)陰”，李時(shí)珍《本草綱目》道“菊能利五脈，調(diào)四肢，治頭風(fēng)熱補(bǔ)”，可見杭白菊的功效。經(jīng)常飲用，能增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力，抑制毛細(xì)血管的通性，起到抗炎強(qiáng)身的作用。
[0003]芹菜素和葉黃素分別是杭白菊中的有效成分。芹菜素屬于黃酮類，分子式C15HltlO5,該物質(zhì)具有抑制致癌物質(zhì)的致癌活性，可以作為治療HIV和其它病毒感染的抗病毒藥物、MAP激酶的抑制劑，治療各種炎癥，做抗氧化劑，有鎮(zhèn)靜、安神、降壓功效。葉黃素是類胡蘿卜素之一，屬光和色素，分子式為C4(iH5602。葉黃素有保護(hù)視力的作用，缺乏該物質(zhì)時(shí)易引起黃斑退化和視力模糊，進(jìn)而出現(xiàn)視力退化近視等癥狀。葉黃素有較強(qiáng)的氧化作用，能抑制活性氧自由基的活性，阻止活性氧自由基對(duì)正常細(xì)胞的破壞，同時(shí)其還有降低白內(nèi)障的發(fā)生率延緩動(dòng)脈硬化及抗癌等作用。
[0004]桐鄉(xiāng)當(dāng)?shù)貙?duì)于杭白菊的應(yīng)用主要是制作菊花茶，將菊花只進(jìn)行整體初加工，而對(duì)于杭白菊中有效成分的研究很少，更沒有將其中的具有保健功能的有效成分進(jìn)行提取加工做成產(chǎn)品。杭白菊的價(jià)值沒有得到更好的利用。
[0005]經(jīng)對(duì)現(xiàn)有的技術(shù)文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，專利02128803.8利用乙醇熱回流提取真菊中的芹菜素，專利200510097010.2報(bào)道了用柚皮素半合成芹菜素的方法，國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T19427-2003)公布了蜂膠中芹菜素含量的測(cè)定方法。專利201310149262.X介紹了萬壽菊葉黃素制備工藝，國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T23209-2008)公布了奶粉中葉黃素的測(cè)定。尚沒有文獻(xiàn)報(bào)道在同一條件下提取杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質(zhì)，并進(jìn)行含量測(cè)定的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，本發(fā)明的目的是提供一種可以同時(shí)提取杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質(zhì)并進(jìn)行含量測(cè)定的方法。
[0007]根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供一種可以同時(shí)提取芹菜素和葉黃素兩種物質(zhì)的方法，具體為:將杭白菊烘干，粉碎，以料液比1:150?1:20的料液比將杭白菊放入有機(jī)溶劑中提取，重復(fù)提取I?5次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容，用于檢測(cè)含量。
[0008]優(yōu)選地，所述將杭白菊烘干是指:將杭白菊在20?100°C溫箱中烘干。
[0009]優(yōu)選地，所述有機(jī)溶劑為常用溶劑，如甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
[0010]優(yōu)選地，所述提取的時(shí)間為15?120分鐘。[0011 ] 根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供一種同時(shí)對(duì)提取溶液進(jìn)行芹菜素和葉黃素的含量測(cè)定方法，具體為高效液相色譜法:
[0012]色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為芹菜素328nm，葉黃素444nm ;
[0013]對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品適量，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；
[0014]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供試品溶液；
[0015]測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密吸取等量供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量。
[0016]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果:
[0017]本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單，可以同時(shí)提取并測(cè)定杭白菊中芹菜素和葉黃素兩種物質(zhì)含量，減少了分別提取測(cè)量的繁瑣，并最大限度的減少了有效物質(zhì)的損失，為杭白菊相關(guān)產(chǎn)品的進(jìn)一步推廣和深度加工提供理論依據(jù)。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。以下實(shí)施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)。這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。以下實(shí)施例中沒有詳細(xì)說明的部分均可以采用現(xiàn)有技術(shù)實(shí)現(xiàn)。
[0019]實(shí)施例1
[0020]將杭白菊在20°C溫箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在50mL95%酒精中提取120分鐘，重復(fù)提取3次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測(cè)。
[0021]色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0022]對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含IOug的溶液，作為對(duì)照品溶液；
[0023]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10mL，得到供試品溶液；
[0024]測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，精密吸取5ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為3.4mg，葉黃素
0.07mgo
[0025]實(shí)施例2
[0026]將杭白菊在100°C溫箱中烘干，粉碎，取2g杭白菊在50mL丙酮中提取30分鐘，重復(fù)提取2次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至IOOmL,使用HPLC檢測(cè)。
[0027]色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0028]對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含20ug的溶液，作為對(duì)照品溶液；
[0029]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至50mL，得到供試品溶液；
[0030]測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，精密吸取IOul供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為5.2mg，葉黃素
0.04mgo
[0031]實(shí)施例3
[0032]將杭白菊在50°C溫箱中烘干，粉碎，取Ig杭白菊在30mL丙酮中提取60分鐘，重復(fù)提取I次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測(cè)。
[0033]色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0034]對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作為對(duì)照品溶液；
[0035]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至25mL，得到供試品溶液；
[0036]測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，精密吸取5ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為3.9mg，葉黃素
0.05mgo
[0037]實(shí)施例4
[0038]將杭白菊在100°C溫箱中烘干，粉碎，取5g杭白菊在150mL甲醇中提取15分鐘，重復(fù)提取3次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，用甲醇定容至10mL，使用HPLC檢測(cè)。
[0039]色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為芹菜素328nm，葉黃素444nm ；
[0040]對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含50ug的溶液，作為對(duì)照品溶液；
[0041]供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至IOOmL,得到供試品溶液；
[0042]測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，精密吸取20ul供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量，得到Ig干菊花中含芹菜素為6.7mg，葉黃素
0.06mgo
[0043]以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述特定實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影響本發(fā)明的實(shí)質(zhì)內(nèi)容。
【權(quán)利要求】
1.一種杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于:將杭白菊烘干，粉碎，以1:150?1:20的料液比將杭白菊放入有機(jī)溶劑中提取，重復(fù)提取I?5次，將提取液經(jīng)過過濾減壓濃縮至蒸干，得到芹菜素和葉黃素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述將杭白菊烘干是指:將杭白菊在20?100°C溫箱中烘干。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯中一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的杭白菊中芹菜素和葉黃素的提取方法，其特征在于，所述提取的時(shí)間為15?120分鐘。
5.—種權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述方法提取得到的杭白菊中芹菜素和葉黃素的測(cè)量方法，其特征在于，所述測(cè)量方法采用高效液相色譜法，具體為: 色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，甲醇-水-乙腈為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為:芹菜素328nm，葉黃素444nm ； 對(duì)照品溶液的制備:精密稱取芹菜素和葉黃素對(duì)照品，置于棕色瓶中，加甲醇制成每ImL含0.0Olmg?0.200mg的溶液,作為對(duì)照品溶液； 供試品溶液的制備:將提取液濃縮蒸干后，用甲醇定容至10?IOOOmL,得到供試品溶液； 測(cè)定法:分別精密吸取不同濃度對(duì)照品溶液，得到兩種物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，精密吸取等量供試品溶液，注入液相色譜儀，測(cè)定，所得色譜中，找出與對(duì)照品色譜保留時(shí)間相同的色譜圖，通過峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算其含量。
【文檔編號(hào)】G01N30/06GK103940927SQ201410175271
【公開日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月28日
【發(fā)明者】代光輝, 王艷艷, 桂娟, 王新華, 陳義娟, 龐倩茹, 郭松, 朱慧郅, 姚琳琳, 周潔 申請(qǐng)人:上海交通大學(xué)