色譜介質的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供能不使用其它構件而進行目標物質的分離和檢測的色譜介質。色譜介質，其是具有用于分離目標物質的分離劑層、用于在分離前述目標物質前將前述目標物質固定的填充劑層、和用于前述分離劑層所分離的目標物質進行滲透的被滲透層的色譜介質，其中，前述填充劑層通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面與前述分離劑層相接，并且位于前述展開方向的上游側，前述分離劑層具有對前述目標物質的分離性和對紫外線的光學響應性，前述被滲透層具有與前述目標物質和前述分離劑層不同的光學響應性。
【專利說明】色譜介質
[0001]
【技術領域】
本發(fā)明涉及至少具有對紫外線的光學響應性不同的兩種層、還具有另外的層的色譜介質。
【背景技術】
[0002]作為從混合物中分離、檢測特定成分的方法，已知薄層色譜(以下也稱為“TLC”)。利用TLC的成分的分離例如是基于分離劑層與檢測對象成分的光學響應性的不同，通過對展開試樣所得的斑點進行紫外線照射或顯色試劑的顯色處理來進行檢測。
[0003]另一方面，作為光學異構體用分離劑，已知含有多糖的苯基酯等多糖衍生物的分離劑。這種含有芳香族環(huán)的分離劑在用于TLC板的分離劑層時，在紫外線的照射或顯色試劑的顯色處理中，有時無法檢測到檢測對象成分。
[0004]對于這樣的問題，已知一種TLC板，其中，對目標物質具有分離能力但不具有光學響應性的第一分離劑層、與不具有分離能力但具有光學響應性的第二分離劑層并排形成于同一基板上(例如，參照專利文獻I)。在該TLC板中，使試樣中的目標物質從第一分離劑層展開至第二分離劑層，在第一分離劑層中分離的斑點移動至相鄰的第二分離劑層，并在第二分離劑層根據光學響應性進行檢測。
[0005]該TLC板中，試樣中的易被第一分離劑層吸附的提取成分有時不會充分到達第二分離劑層。此外，通常，斑點在各分離劑層中的移動速度不同，因而第一分離劑層中的斑點的位置關系有時不會正確維持至第二分離劑層。如此，前述TLC板，有時無法正確地檢測第一分離劑層中的分離狀態(tài)，至少在該方面還留有研究的余地。
[0006]現有技術文獻專利文獻
專利文獻1:日本專利第3140138號公報。
【發(fā)明內容】
[0007]發(fā)明要解決的技術問題
本發(fā)明提供可以用單一試劑盒進行目標物質的分離和檢測的色譜介質。
[0008]解決問題的方法
本發(fā)明人等發(fā)現通過使用如下所述的色譜介質可以解決前述問題，從而完成本發(fā)明。所述色譜介質是具有用于分離目標物質的分離劑層、用于在分離前述目標物質前將前述目標物質固定的填充劑層、和用于前述分離劑層所分離的目標物質進行滲透的被滲透層的色譜介質，其中，前述填充劑層通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面與前述分離劑層相接，并且位于前述展開方向的上游側，作為前述分離劑層，使用具有對前述目標物質的分離能力和對紫外線的光學響應性的物質，作為前述被滲透層，使用具有與分離劑層不同的光學響應性的物質。
[0009]即本發(fā)明提供下述發(fā)明。
[0010]< I >色譜介質，其是具有用于分離目標物質的分離劑層、用于在分離前述目標物質前將前述目標物質固定的填充劑層、和用于前述分離劑層所分離的目標物質進行滲透的被滲透層的色譜介質，其中，
前述填充劑層通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面與前述分離劑層相接，并且位于前述展開方向的上游側，
前述分離劑層具有對前述目標物質的分離性和對紫外線的光學響應性，
前述被滲透層具有與前述目標物質和前述分離劑層不同的光學響應性。
〈2> 〈1>所述的色譜介質，其中，前述填充劑層層疊于從前述色譜介質中的用于展開前述目標物質的展開液浸潰的浸潰端部起直至該色譜介質的展開方向的長度的1/20?1/2之間的區(qū)域；
<3> 〈1>或〈2>所述的色譜介質，其中，前述被滲透層在色譜介質的展開方向上不連續(xù)地層疊；
<4> 〈1>?〈3>中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層以圓點狀層疊于前述分離劑層上；
<5> 〈4>所述的色譜介質，其中，前述以圓點狀層疊的被滲透層中，該圓點的平均直徑為0.01?5mm,圓點間的間距為0.015?5mm ；
<6> <1>?〈3>中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層以與色譜介質的展開方向交叉的帶狀的列的方式層疊于前述分離劑層上；
〈7> 〈6>所述的色譜介質，其中，形成前述帶狀的列的帶選自直線、波浪線和它們的虛線.<8> <1>?〈7>中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層的厚度比前述分離劑層薄；
<9> <1>?〈8>中任一項所述的色譜介質，其中，構成前述分離劑層的分離劑是光學異構體用分離劑；
<10> <9>所述的色譜介質，其特征在于，前述光學異構體用分離劑含有多糖衍生物，該多糖衍生物由多糖與替代多糖的羥基或氨基的一部分或全部的芳香族酯基、芳香族氨基甲?；⒎枷阕迕鸦汪驶械娜我徽咝纬?；
<11> 〈1>?〈10>中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層含有多孔體和熒光指示劑或顯色試劑作為構成材料；
< 12 > 〈1廣〈12>中任一項所述的色譜介質，其中，前述填充劑層含有多孔體作為構成材料。
<13> < 11 >或< 12 >所述的色譜介質，其中，前述多孔體為硅膠或經表面處理的硅膠；
<14> 〈11廣〈13>中任一項所述的色譜介質，其中，進一步含有粘合劑作為構成材料；<15> 〈1>?〈14>中任一項所述的色譜介質，其中，在前述被滲透層上存在刻度和/或文字；
<16> 〈15>所述的色譜介質，其中，前述刻度和/或文字與前述被滲透層具有不同的光學響應性；
〈17> <1>?〈16>中任一項所述的色譜介質,其具有面向前述分離劑層或面向前述被滲透層、且用于支撐前述色譜介質的基材；
〈18> <1>?<17〉中任一項所述的色譜介質,其中，前述色譜介質為板狀、筒狀或柱狀；
<19> TLC板，其具有〈1>?〈16>中任一項所述的色譜介質和用于支撐該色譜介質的基材，且在前述基材上的多個區(qū)域層疊有前述色譜介質；
<20> TLC材料，其包含〈1>?〈16>中任一項所述的色譜介質和用于支撐該色譜介質的基材。
[0011]發(fā)明效果
本發(fā)明的色譜介質中，面向分離劑層層疊有用于經分離的目標物質進行滲透的被滲透層，并且該被滲透層與分離劑層具有不同的光學響應性，因而通過將無法利用光學響應性進行檢測的存在于分離劑層中且與分離劑層具有相同光學響應性的目標物質滲透至被滲透層，可以利用光學響應性來檢測滲透至被滲透層的目標物質。
[0012]另外，在本發(fā)明的色譜介質中，填充劑層通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面而與前述分離劑層相接，并且位于前述展開方向的上游側。由此，在含有該填充劑層的部分固定前述目標物質而進行展開時，填充劑層和分離劑層的目標物質的保持力不同，因此在填充劑層和分離劑層的分離劑層側的邊界，目標物質暫時濃縮。而然后引起分離劑層中的目標物質的分離，由此即使含有點樣的目標物質的溶液中的目標物質的濃度低時，也能以可可靠進行目標物質的檢測的的程度形成目標物質的斑點。進而，目標物質的分離能力提高。
[0013]此外，本發(fā)明的色譜介質可以在不使用其它構件的情形下以單一的試劑盒進行目標物質的分離和檢測，因而目標物質的分離和檢測不需要復雜的步驟。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014][圖1](a)是示出使用實施例1中制作的TLC板(從展開液的浸潰端部起直至
2.0cm用填充劑層層疊，且在填充劑層上還層疊有被滲透層)，將反式-二苯乙烯氧化物(t-SO, trans-stilbene oxide)、Troeger堿(卜 > 力'一塩基)和黃燒酮用作為展開液的己烷/乙醇(90:10，v/v)展開而得的斑點的圖(照片)。(b)是使用比較例I中制作的TLC板，除此之外與實施例1進行相同操作得到的照片；
[圖2] (a)是示出制作與實施例1中制作的TLC板相同的TLC板、并將與實施例1相同的目標物質用作為展開液的甲醇展開而得的斑點的圖(照片)(實施例2)。(b)是使用比較例2中制作的TLC板，除此之外與實施例2進行相同操作得到的照片；
[圖3]是示出本發(fā)明的色譜介質中板狀的方式的概略圖。(I)是示出分離劑層上僅層疊有被滲透層、填充劑層露出的一個方式的圖。被滲透層在分離劑層上以圓點狀層疊。(2)是示出被滲透層加在分離劑層上、在填充劑層也層疊的一個方式的圖。被滲透層以圓點狀層置。
[圖4]是示出本發(fā)明的色譜介質中，被滲透層以帶狀的列的形式層疊于分離劑層及填充劑層上的實例的圖((I)?(4))；
[圖5]是示出本發(fā)明的色譜介質中，被滲透層以圓點狀層疊時的圓點的直徑(Φ)和間距(Pt)的一例的圖； [圖6] (a)是示出本發(fā)明的色譜介質的板狀的一個方式的截面的概略圖。(b)是示出本發(fā)明的色譜介質的板狀的另一方式的截面的概略圖。(C)示出本發(fā)明的色譜介質的板狀的另一方式的截面的概略圖。
[圖7]是示出本發(fā)明的色譜介質的柱狀(a)、(b)、(a’)及筒狀(c)、(c’)的一個方式的概略圖；
[圖8]是示出本發(fā)明的色譜介質層疊于一片基材上的多個區(qū)域的TLC板的概略圖； [圖9]是示出含有本發(fā)明的色譜介質和基材作為構成要素的TLC材料的概略圖。
【具體實施方式】
[0015]本發(fā)明的色譜介質具有分離劑層、用于固定分離前的目標物質的填充劑層和用于經分離劑分離的目標物質進行滲透的被滲透層。
[0016]本發(fā)明所述的色譜介質層疊有上述分離劑層和通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面而與前述分離劑層相接的填充劑層，再面向上述分離劑層層疊有被滲透層，其形狀包括板狀、柱狀和筒狀，板狀的色譜介質已知是所謂的薄層色譜(TLC)介質。另一方面,筒狀或柱狀的色譜介質有時也被稱為棒狀柱。
[0017]此外，前述分離劑層具有對目標物質的分離能力，并且具有對紫外線的光學響應性。另一方面，前述被滲透層的對紫外線的光學響應性與目標物質和分離劑層不同。
[0018]作為本發(fā)明所述的目標物質，可以例示光學異構體。具有對目標物質的分離能力是指具有分離目標物質的能力，在目標物質為光學異構體時，是指具有光學拆分能力。此夕卜，本發(fā)明所述的對紫外線的光學響應性是指熒光等由紫外線引起的發(fā)光、或紫外線的吸收。
[0019]應予說明，本發(fā)明的色譜介質中，填充劑層是通過相對于前述目標物質的展開方向垂直的面而與前述分離劑層相接，但是本發(fā)明的所述“垂直”不需要嚴格地相對于前述目標物質的展開方向為直角(90° )，可以具有在不影響目標物質的分離的范圍內的傾斜、形狀。
[0020]作為這樣的范圍，例如可以相對于前述目標物質的展開方向為88?92°。
[0021]本發(fā)明的色譜介質如上所述具有分離劑層和被滲透層，因而可將經分離劑層分離的目標物質滲透至被滲透層。繼而，由于被滲透層的光學響應性與目標物質和分離劑層的光學響應性不同，因而可以通過對滲透至被滲透層的目標物質照射紫外線等來確認。
[0022]另外，在本發(fā)明的色譜介質中，層疊有分離劑層和通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面而相接的填充劑層。而該位置關系是在色譜介質的展開方向的下游側層疊有分離劑層，在上游側層疊有填充劑層。
[0023]通過具有這樣的位置關系，在使填充劑層中被固定的目標物質展開時，目標物質在分離劑層和填充劑層的邊界的分離劑層側暫時濃縮。然后，通過與分離劑層的相互作用而分離目標物質。由此，即使展開的目標物質的濃度低時，經過在前述邊界附近的濃縮，從而可形成在之后利用目測能確認的程度的斑點。
[0024]而且，通過在分離劑層的邊界附近目標物質暫時濃縮，從而能極大地防止在目標物質的分離時斑點變寬。
[0025]應予說明，前述色譜介質中的分離劑層的區(qū)域，只要是盡可能通過分離劑層分離目標物質、并盡可能確認被滲透層中的目標物質的區(qū)域、并且可在該填充劑層的區(qū)域固定目標物質的區(qū)域，則對其大小、形狀沒有特別限制。
[0026]從確保目標物質的充分的分離的觀點出發(fā)，前述填充劑層優(yōu)選存在于從前述色譜介質中的用于展開前述目標物質的展開液浸潰的浸潰端部(以下，也稱為下側邊緣)起直至該色譜介質的展開方向的長度的1/2之間的區(qū)域。
[0027]從確保目標物質的良好分離的觀點出發(fā)，前述填充劑層更優(yōu)選存在于從前述色譜介質的下側邊緣起直至該色譜介質的展開方向的長度的1/40?1/2之間的區(qū)域、特別優(yōu)選1/20?1/2.2之間的區(qū)域。前述分離劑層和填充劑層的邊界，與目標物質的點樣位置和浸潰于展開槽時的浸液位置相比，設置于展開方向的更下游側。
[0028]此外，從生產性的觀點出發(fā)，從點樣目標物質的方向所看到的前述填充劑層的形狀，在色譜介質為板狀的情形，可列舉包括其下側邊緣的四邊形的方式。另外，例如從點樣目標物質的方向所看到的板的形狀為三角形，是浸液三角形的頂點側那樣的形狀時，也可列舉具有包括該頂點部分的倒三角形的形狀的填充劑層的形狀。
[0029]或者，前述填充劑層的形狀也可以是能夠進行目標物質點樣程度的大小的大致圓形的形狀。
[0030]此外，前述層疊有被滲透層的區(qū)域只要至少面向前述分離劑層，則并不需要是上述分離劑層的整個區(qū)域，只要能確認目標物質，則在上述分離劑層的區(qū)域中也可以部分地不層疊有被滲透層。
[0031]此外，被滲透層可以不僅僅面向分離劑層，也可以面向填充劑層進行層疊。
[0032]層疊有被滲透層的區(qū)域的面積相對于分離劑層的總面積的比例優(yōu)選為5%?90%，從能夠進行多種目標物質的分離確認的觀點出發(fā)，更優(yōu)選為10%?80%，進一步優(yōu)選20?70%。
[0033]這種未層疊有被滲透層且分離劑層露出的區(qū)域，可以通過使用在層疊分離劑層后，在使用后述涂布技術、浸潰技術或印刷技術層疊被滲透層時，僅對該區(qū)域不涂布、不浸潰或不印刷的方法來得到。
[0034]或者，可通過在分離劑層的整面先進行被滲透層的層疊后，再以刮擦等操作從分離劑層除去該被滲透層而得到。
[0035]另一方面，使被滲透層面向填充劑層層疊時，填充劑層上的被滲透層的面積的比例沒有特別限制，可以以任意比例層疊。
[0036]此外，如后所述，填充劑層和被滲透層可以用相同的材料構成，此時，出于方便，認為填充劑層和被滲透層由二層構成，但實際上變?yōu)闃嫵上嗤囊粚印?br>
[0037]本發(fā)明的色譜介質只要具有如上所述的構成，則對其形狀沒有特別限定，可以是板狀、筒狀或柱狀。
[0038]作為板狀的色譜介質，可舉出:使用后述物質作為基材，并且從照射紫外線的方向觀察，以被滲透層、分離劑層和填充劑層、基材的順序層疊，被滲透層僅面向分離劑層而層疊的第一方式(參照圖6(a));或從照射紫外線的方向觀察，以被滲透層、分離劑層和填充劑層、基材的順序層疊，被滲透層面向分離劑層和填充劑層兩者而層疊的第二方式(參照圖6(b));或從照射紫外線的方向觀察，以基材、被滲透層、分離劑層和填充劑層的順序層疊的第三方式(參照圖6(c))。
[0039]前述第一方式中，目標物質的點樣在照射紫外線的面中的填充劑層露出的區(qū)域進行。
[0040]前述第二方式中，目標物質的點樣在填充劑層上層疊的被滲透層的區(qū)域進行。
[0041]前述第三方式中所用的基材使用如圖6(c)所示的具有柔軟性的原材料，并且如圖6(c)所示與填充劑層和被滲透層相接地形成，從防止填充劑層和被滲透層的崩潰的觀點出發(fā)是優(yōu)選的。
[0042]此外，前述第三方式中，如圖6(c)所示，可以自與照射紫外線的方向相反的方向(圖6(c)中的6’)進行目標物質的點樣，也可以除去基材的一部分而自與照射紫外線的方向相同的方向(圖6 (c)中的6)進行點樣。
[0043]本發(fā)明的色譜介質為板狀的TLC時，前述基材可以使用TLC板中的公知基板。作為這種基材，可舉出例如玻璃制、樹脂制、金屬制、或紙制的平板。基材的形狀沒有特別限定，優(yōu)選為TLC中所常用的長方形。
[0044]另一方面，對于筒狀或柱狀的色譜介質，可舉出圖7所例示的那些。這些實例中，與軸垂直方向的截面形狀包括楕圓?圓形，但并不限定于此，還可為多邊形。這些方式中包括:分離劑層和填充劑層以及被滲透層形成在柱狀或筒狀的基材的外周面的方式；和分離劑層和填充劑層以及被滲透層形成在筒狀基材的內周面的方式。
[0045]柱狀基材可以使用例如截面形狀為多邊形或圓形的棒，筒狀基材可以使用例如截面形狀為多邊形或圓形的管、柱管、或與柱管相同尺寸的管。
[0046]在筒狀基材的內周面層疊分離劑層和填充劑層與被滲透層時，通過使用具有透光性的物質來作為筒狀基材，可以進行目標物質的確認。本文所說的透光性是指能夠確認目標物質的斑點的光學特征(顯色、發(fā)光和吸光等)的透明性。具有這種透光性的柱管等管可以使用例如石英玻璃的管、或PFA(四氟乙烯.全氟烷基乙烯基醚共聚物)等氟樹脂制的管。
[0047]此外，還可以形成不具有基材、僅由分離劑層和填充劑層以及被滲透層形成且具有液體滲透性的色譜介質。
[0048]在圖7所示的筒狀或柱狀色譜介質中，目標物質也點樣于填充劑層露出的區(qū)域(圖7中(a)?(C))或層疊于填充劑層上的被滲透層的區(qū)域(圖7中(a’)(c’))。
[0049]這種筒狀或柱狀的色譜介質通常具有I?40cm的長度，直徑(最大直徑)通常為0.1 ?Icm0
[0050]用于本發(fā)明的色譜介質中的分離劑層的分離劑，只要具有對目標物質的分離能力和對紫外線的光學響應性，則沒有特別限定。
[0051]上述分離劑可以使用顆粒狀的分離劑。制為這種顆粒狀的分離劑，可舉出:僅由分離劑形成的顆粒、將分離劑擔載于顆粒狀的載體的顆粒。分離劑在載體上的擔載除了利用物理吸附的擔載之外，還包括利用與載體化學鍵合的分離劑的擔載。
[0052]作為分離劑，可使用具有光學響應性的低分子系的分離劑或高分子系的分離劑中的任一者。作為低分子系的分離劑，可舉出例如:配體交換型的分離劑、電荷轉移(n-n)型的分離劑、氫鍵合型的分離劑、包合型的分離劑、離子鍵型的分離劑、插入型的分離劑、冠醚或其衍生物、以及環(huán)糊精或其衍生物。作為高分子系的分離劑，可舉出例如:多糖衍生物、聚酰胺、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、蛋白質和酒石酸衍生物。
[0053]作為前述多糖衍生物，可舉出例如:用于光學異構體用分離劑的多糖和多糖的羥基或氨基的一部分或全部被芳香族酯基、芳香族氨基甲酰基、芳香族醚基、和羰基中的任一者替代而成的多糖衍生物，例如，可舉出纖維素的苯基氨基甲酸酯衍生物、纖維素的苯基酯衍生物、直鏈淀粉的苯基氨基甲酸酯衍生物、和直鏈淀粉的苯基酯衍生物。這些衍生物中的苯基可具有選自碳原子數I?20的烴、和鹵素中的一種以上的取代基。
[0054]從提高分離性能的觀點出發(fā)，優(yōu)選前述載體為多孔體。作為前述載體，可舉出例如:交聯聚苯乙烯、交聯丙烯酸系聚合物、環(huán)氧聚合物等合成高分子、纖維素或將其交聯而強化的交聯纖維素、交聯瓊脂糖、交聯葡聚糖、和交聯甘露聚糖交聯體等多糖、以及氧化鋁、硅膠、中孔硅膠、沸石、硅藻土、熔融二氧化硅、粘土礦物、氧化鋯、金屬等無機物。
[0055]分離劑的粒徑可對應于色譜介質的分離目的來確定，通常優(yōu)選為10 μ m以上、更優(yōu)選為10?100 μ m、進一步優(yōu)選為20?100 μ m。各分離劑的粒徑可以采用以通常的粒徑測定裝置測定的平均粒徑，也可以是產品目錄值。另一方面，例如在用于監(jiān)測合成反應的用途的情形等中，在進一步要求分離斑點的分離度時，還可以使用較1ym更小的分離劑。作為用于這種用途時的分離劑的粒徑，優(yōu)選為2?8 μ m、更優(yōu)選使用3?6 μ m的分離劑。
[0056]色譜介質為板狀的TLC時，分離劑層可使用制作TLC板的公知方法，例如，通過將含有前述分離劑和涂布用溶劑的漿料用涂布器涂布于作為支撐體的基材的表面，或將前述漿料噴霧于作為支撐體的基材的表面，或將作為支撐體的基材沉浸(浸潰)在含有前述分離劑和涂布用溶劑的漿料中來形成。
[0057]此時，即使所得的色譜介質中沒有基材，也能確保充分的強度，在這種情況下，可以去除基材、得到僅由分離劑層、填充劑層和被滲透層構成的色譜介質。
[0058]色譜介質為柱狀時，例如，在通過涂布或印刷在柱管等管的內面形成構成被滲透層的材料后，填充含有分離劑或粘合劑等的材料和構成填充劑層的材料而形成分離劑層和填充劑層，從而可得到被滲透層層疊于分離劑層上或被滲透層層疊于分離劑層和填充劑層兩層上、且柱管存在于被滲透層的周壁的色譜介質。
[0059]另一方面，色譜介質為筒狀時，例如，將含有分離劑或粘合劑的材料和構成填充劑層的材料涂布于棒狀基材的周面；或將含有分離劑或涂布用溶劑的漿料涂布于棒狀基材、再將構成填充劑層的材料涂布于不存在含分離劑或涂布用溶劑的漿料的基材的區(qū)域，從而形成分離劑層和填充劑層后，通過涂布或印刷將構成被滲透層的材料僅層疊于分離劑層的周面，或層疊于分離劑層和填充劑層的周面，從而可得到分離劑層和填充劑層層疊于基材、且該分離劑層上或分離劑層和填充劑層兩層上層疊有被滲透層的筒狀色譜介質。
[0060]此外，色譜介質不使用預先成形的基材而形成為柱狀的情形中,可舉出如下方式。
[0061]首先，形成至少在表面具有前述分離劑的柱狀多孔體。這樣的多孔體可通過下述方法形成:由分離劑形成的柱狀多孔體、以及由載體形成的柱狀多孔體和擔載于其上的前述分離劑中的任一者來形成分離劑層，然后在與其展開方向交叉的截面上層疊由填充劑層制成的層。
[0062]由分離劑形成的柱狀多孔體可如下形成:例如利用日本特開平4-93336號公報中記載的方法，將可溶于分離劑的顆粒不溶的溶劑中的塑料顆粒與分離劑混合，將所得混合物加熱加壓處理進行成型，通過溶劑處理從所得成形體除去可溶性塑料。
[0063]前述由載體形成的柱狀多孔體可通過載體顆粒的接合或由載體形成的柱狀體的多孔化而形成，利用載體顆粒的接合形成的多孔體，在載體顆粒為高分子或多糖等有機化合物時，可利用前述方法來形成。前述通過由載體形成的柱狀體的多孔化形成的多孔體，例如，可以利用日本專利第3397255號公報或日本專利第3317749號公報中記載的方法、即溶膠_凝膠法來形成。
[0064]前述由載體形成的柱狀多孔體上的分離劑的擔載，例如，可以利用使分離劑物理吸附或化學鍵合于載體、對多孔體的細孔的表面進行修飾、改性的公知方法來進行。
[0065]關于在形成分離劑層后在與其展開方向交叉的截面上層疊由填充劑層構成的層的方法，可列舉下述方法:在分離劑層的周面上，使展開方向的長度比分離劑層長的基材例如膜卷繞而在展開方向的延長上形成圓柱狀的空洞，在該空洞上導入構成填充劑層的材料來形成填充劑層，然后除去基材。
[0066]通過涂布或印刷使構成被滲透層的材料層疊于由上述操作制作的至少在表面具有前述分離劑的柱狀多孔體、或其多孔體和填充劑層的周面，形成被滲透層，由此也可以得到具有液體滲透性的柱狀色譜介質。
[0067]前述涂布用溶劑可以使用水、有機溶劑、和它們的混合溶劑。作為有機溶劑，可以使用醇系、二醇醚系、烴系、酮、酯等有機溶劑?？膳e出例如:α-萜品醇、丁基卡必醇乙酸酯、丁基卡必醇、甲苯、環(huán)己烷、甲基乙基酮、甲基丙二醇。
[0068]作為前述涂布用溶劑優(yōu)選使用的是水溶性的有機溶劑和水的混合溶劑，更優(yōu)選的是醇和水的混合溶劑。前述混合溶劑中的醇的含量優(yōu)選為0.1?50質量％、更優(yōu)選為I?45質量％、進一步優(yōu)選為2?40質量％。
[0069]作為可用的醇，可舉出例如:乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇、1-戊醇和3-甲基-3-甲氧基丁醇。
[0070]前述漿料中的涂布用溶劑的含量可根據所形成的分離劑層的均一性、層厚和經濟性的觀點來確定，相對于分離劑100質量份優(yōu)選為10?5000質量份、更優(yōu)選為50?1000質量份、進一步優(yōu)選為100?300質量份。
[0071]只要在上述范圍內，則不僅可使用流動性高的漿料狀材料，在例如制作筒狀或柱狀色譜介質時，還可以使用涂布用溶劑的含量少的粘度高的材料。
[0072]從提高所形成的分離劑層的強度的觀點出發(fā)，前述漿料優(yōu)選進一步含有粘合劑。前述粘合劑可以使用賦予在基板的表面形成分離劑層的粘接性的成分。作為這樣的粘合齊U，可舉出:石膏或膠態(tài)二氧化硅等無機系粘合劑、微纖化纖維素等有機纖維、以及堿水溶性共聚物、羥乙基纖維素或羧甲基纖維素等增稠劑、聚乙烯醇、丙烯酸等有機系粘合劑。粘合劑可以是一種或二種以上。
[0073]前述漿料中的粘合劑的含量可以從所形成的分離劑層的強度、和分離劑層中的流動相的適當的上升速度的觀點出發(fā)，根據粘合劑的種類適宜確定。例如，若為石膏，則粘合劑的含量相對于分離劑100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為I?30質量份、進一步優(yōu)選為I?20質量份。此外，例如若為羧甲基纖維素等有機系的粘合劑，則粘合劑的含量相對于分離劑100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為0.5?10質量份、進一步優(yōu)選為I?5質量份。
[0074]本發(fā)明的色譜介質中的分離劑層的厚度，從獲得充分的分離特性的觀點出發(fā)，優(yōu)選為20?5000 μ m、更優(yōu)選為50?3000 μ m。
[0075]此外，本發(fā)明的色譜介質中，從將目標物質的分離性能保持良好的觀點出發(fā)，優(yōu)選被滲透層的厚度小于分離劑層的厚度。
[0076]本發(fā)明中的分離劑層與被滲透層的厚度之比，從將目標物質的分離性能保持良好的觀點出發(fā)，在將分離劑層的厚度設為I時，被滲透層的厚度優(yōu)選為0.002?0.8、更優(yōu)選為0.005?0.5、特別優(yōu)選為0.006?0.4。
[0077]另一方面，從良好保持目標物質的分離性能的觀點出發(fā)，對本發(fā)明的分離劑層與填充劑層的厚度之比而言，分離劑層的厚度和填充劑層的厚度的關系優(yōu)選分離層的厚度和填充劑層的厚度為同等程度、或填充劑層的厚度比分離層的的厚度小。從這種的觀點出發(fā)，本發(fā)明的分離劑層與填充劑層的厚度之比在分離劑層為I時，優(yōu)選為1.0?0.1，更優(yōu)選0.99?0.2，特別優(yōu)選0.95?0.5。
[0078]另外，如后所述，面向填充劑層層疊被滲透層時，從良好保持目標物質的分離性能的觀點出發(fā)，對分離劑層與填充劑層和被滲透層合并的層的厚度之比而言，分離劑層為I時，優(yōu)選為1.0?0.1，更優(yōu)選0.99?0.2，特別優(yōu)選0.95?0.5。
[0079]前述被滲透層與目標物質和分離劑層具有不同的光學響應性。本文中，“不同的光學響應性”是指利用紫外線的照射或顯色試劑的顯色處理的一方的光學響應與另一方的光學響應是能夠通過顏色或明度進行光學識別的程度的不同。
[0080]此外，被滲透層是分離劑層中形成了斑點的成分的至少一部分進行滲透的層。
[0081]此外，為了防止色譜介質上的目標物質的斑點變寬，重要的是構成被滲透層的材料不對色譜介質上的分離劑層中目標物質的分離特性，即，流動相與分離劑層之間的目標物質的分配造成影響。
[0082]因此，例如在分離劑層中所用的分離劑擔載于載體時，被滲透層的構成材料優(yōu)選為與該載體相同。此外，被滲透層的構成材料可以從后述的材料中適宜選擇不對流動相和分離劑層之間的目標物質的分配造成影響的材料使用。
[0083]前述被滲透層層疊在前述分離劑層上、或層疊于分離劑層和填充劑層的兩層上，但從使作為分離劑層和被滲透層的相互作用的旁路作用減少，防止目標物質的斑點變寬，得到良好的分離(以下，也稱為分離特性)的觀點出發(fā)，優(yōu)選在色譜介質的展開方向上不連續(xù)地層疊。本發(fā)明所述的不連續(xù)地層疊是指沿顯色譜介質的展開方向，前述被滲透層不是連續(xù)地層疊，而是具有間隔地層疊，該間隔可以是等間隔、也可以不是等間隔。
[0084]作為該間隔，為了使目標物質滲透、并獲得檢測其所需的充分的分辨率，優(yōu)選為0.015mm以上、更優(yōu)選為0.02mm以上、特別優(yōu)選為0.05mm以上。另一方面，為了抑制由于目標物質向被滲透層的擴散所致的與分離劑層的相互作用并確保目標物質的良好分離，優(yōu)選為4mm以下、更優(yōu)選為3mm以下、特別優(yōu)選為2mm以下。
[0085]此外，從使目標物質滲透并確保檢測所需的充分的面積的觀點出發(fā)，被滲透層的空隙容積(材料內部的空隙容積(內部空隙)與材料間的空隙容積(外部空隙)的合計)在整個層的體積中所占的比例優(yōu)選為0.1?0.9、更優(yōu)選為0.2?0.8。
[0086]此外，本發(fā)明的色譜介質中的被滲透層優(yōu)選以圓點狀層疊于前述分離劑層上。本發(fā)明所述的圓點狀是指由不連續(xù)的許多點或小區(qū)域形成的圖案，所述不連續(xù)的許多點或小區(qū)域的形狀可以為例如圓形、大致圓形、大致楕圓形、包括各邊可為直線或曲線的形狀的大致三角形、大致四邊形等大致多邊形等，各圓點的大小或密度等沒有特別限定。從使色譜介質中目標物質的分離特性均一的觀點出發(fā)，圓點的形狀優(yōu)選具有規(guī)則性。進而，各圓點的排列也優(yōu)選具有規(guī)則性。
[0087]作為圓點的形狀，從目標物質的滲透性的觀點出發(fā)，特別優(yōu)選為圓形?大致圓形，而作為其排列，如圖3或4所示，如上所述，從使色譜介質中目標物質的分離特性均一的觀點出發(fā)，優(yōu)選具有規(guī)則性。
[0088]圓點的形狀為圓形時，從目標物質的滲透性和分離特性的觀點出發(fā)，優(yōu)選其平均直徑為0.01?5mm，更優(yōu)選為0.01?4臟，進一步優(yōu)選為0.02?3mm，特別優(yōu)選為0.05?Imm0
[0089]另一方面，圓點的形狀為圓形以外的形狀時，基于與圓形時相同的理由，優(yōu)選其最大直徑的平均直徑為0.02?6mm,更優(yōu)選為0.05?5mm,進一步優(yōu)選為0.05?1.5mm。
[0090]本發(fā)明所述的最大直徑，例如在楕圓形的情形中，是指其最長軸的長度，更一般地，是指在平行的2個平面中，從上面觀察并以任意方向夾持其形狀時的2個平面間的距離的最大值。
[0091]另外，在被滲透層以圓點狀層疊時，從減小與分離劑層的相互作用的觀點和檢測滲透至滲透層的目標物質時的分辨率的觀點出發(fā)，該各圓點間的間隔(間距)優(yōu)選為0.01?6mm、更優(yōu)選為0.01?4mm、進一步優(yōu)選為0.02?3mm、特別優(yōu)選為0.05?1.0mm。
[0092]圓點為圓形時，基于與上述相同的理由，間距優(yōu)選為0.01?6mm、更優(yōu)選為0.02?3mm、進一步優(yōu)選為0.05?1mm、特別優(yōu)選為0.06?1mm。
[0093]此外，圓點的密度若用線數(每I英寸的圓點個數)來表示，則優(yōu)選為5?2000、更優(yōu)選為10?400、進一步優(yōu)選為20?300。
[0094]除了上述的圓點狀以外，本發(fā)明的色譜介質中的被滲透層還優(yōu)選為以與色譜介質的展開方向交叉的帶狀的列的形式層疊的方式。通過如此層疊，可以在充分保持目標物質的分離特性的基礎上，得到目標物質對被滲透層的充分滲透。
[0095]作為形成前述帶狀的列的帶的形狀，可舉出例如:直線、波浪線和它們的虛線。該帶的寬度沒有特別限制，從保持目標物質的分離特性且得到檢測目標物質所需的充分的分辨率的觀點出發(fā)，優(yōu)選為0.01?15mm、更優(yōu)選為0.02?10mm。
[0096]此外，對帶和帶的間隔沒有特別限制，從得到目標物質的均一分離特性的觀點出發(fā)，優(yōu)選為等間隔，該間隔優(yōu)選為0.01?3mm、更優(yōu)選為0.02?2mm。
[0097]本發(fā)明的色譜介質中的被滲透層可以使用多孔體作為構成該層的材料。
[0098]這種多孔體，從確保目標物質的充分滲透性的觀點出發(fā)，通過氣體吸附法測定的細孔容積優(yōu)選為0.lml/g以上、更優(yōu)選為0.2ml/g以上、特別優(yōu)選為0.3?0.9ml/g。
[0099]作為具有如上所述細孔容積的多孔體，可以使用產品目錄值滿足上述范圍的作為后述優(yōu)選多孔體的硅膠或陶瓷的市售品，若為含有二氧化硅的多孔體，則可以進行利用氟化氫水溶液或堿水溶液的處理來調整細孔容積，若為陶瓷，則可以調整其造粒時的燒成條件、或利用酸溶液處理等來調整細孔容積。
[0100]此外，作為多孔體的粒徑，從防止含有其的漿料的凝集的觀點出發(fā)，優(yōu)選為0.1 μπι以上、更優(yōu)選為I μ m以上、特別優(yōu)選為2 μ m以上。另一方面，作為多孔體的粒徑的上限值，從將含有其的漿料例如進行網印時的透過性、或被滲透層的表面的精加工的觀點出發(fā)，優(yōu)選為100 μ m以下、更優(yōu)選為70 μ m以下、特別優(yōu)選為50 μ m以下。
[0101]多孔體的粒徑可以采用以通常的粒徑測定裝置測定的平均粒徑，也可以是產品目錄值。
[0102]本發(fā)明所用的多孔體可舉出:硅膠、中孔硅膠、沸石、纖維素、硅藻土、熔融二氧化硅、粘土礦物、氧化鋁、氧化鋯或其它陶瓷，例如，將沸石、凹凸棒石、坡縷石、以Si02、MgO為主成分的滑石、以S12為主成分的高嶺石、蒙脫石等各種粘土礦物破碎后進行造粒，并根據需要實施酸處理，進而進行燒成而得的陶瓷等。它們均可使用市售品，可以使用產品目錄值具有上述細孔容積或粒徑的市售品。
[0103]它們中，優(yōu)選使用具有上述細孔容積或粒徑的那些，從與溶劑的親和性的觀點出發(fā)，優(yōu)選使用硅膠。
[0104]可在本發(fā)明中使用的硅膠可以使用例如經硅烷偶聯劑表面處理的硅膠，例如，還可使用經十八烷基甲硅烷基、氨基丙基甲硅烷基修飾的硅膠。這種經表面處理的硅膠由于具有不對分離劑層和流動相之間的目標物質的分配造成影響的傾向，故可優(yōu)選使用。
[0105]此外，上述多孔體選擇不對分離劑層和流動相之間的目標物質的分配造成影響的多孔體，從不使色譜介質上目標物質的斑點變寬的觀點出發(fā)是優(yōu)選的。
[0106]此外，本發(fā)明的色譜介質中的被滲透層中，構成該層的材料可以是后述熒光指示齊喊顯色試劑本身。此外，通過將這些熒光指示劑或顯色試劑、與粘合劑和根據需要的例如粒徑0.1?100 μ m的玻璃、塑料、金屬和陶瓷之類的支撐體混合，將所得組合物層疊，由此也可制作被滲透層。
[0107]這種組合物中的粘合劑的含量，可根據所形成的被滲透層的強度、以及使作為被滲透層中的分離劑層與被滲透層的相互作用的旁路作用減少的觀點考慮，對應于粘合劑的種類而適宜確定。例如若為石膏，則粘合劑的含量相對于熒光指示劑或顯色試劑的100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為0.5?30質量份、進一步優(yōu)選為I?20質量份。此夕卜，例如若為羧甲基纖維素等有機系的粘合劑，則粘合劑的含量相對于熒光指示劑或顯色試劑的100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為0.5?10質量份、進一步優(yōu)選為I?5質量份。
[0108]此外，對于前述支撐體，在含有其時，相對于熒光指示劑或顯色試劑的100質量份優(yōu)選為0.1?0.9質量份、更優(yōu)選為0.2?0.8質量份、特別優(yōu)選為0.3?0.7質量份。
[0109]本發(fā)明的色譜介質中的被滲透層可通過各種方法層疊。例如，在色譜介質為板狀的TLC、被滲透層含有多孔體作為構成材料時，被滲透層可通過在TLC板的分離劑層上或分離劑層上和填充劑層上涂布含有多孔體的漿料并使之干燥來制作。此外，將后述的熒光指示劑或顯色試劑本身、或含有它們和粘合劑、以及根據需要的支撐體的組合物作為被滲透層時，也可以采用相同的方法。
[0110]此外，本發(fā)明的色譜介質中，被滲透層在色譜介質的展開方向上不連續(xù)地層疊時，可以使用例如印刷技術來層疊被滲透層。
[0111]作為印刷技術，可舉出絲網印刷之類的網印或噴墨印刷。
[0112]網印中，作為網版，可使用開口部的形狀具有上述層疊方式中所述形狀的網版(色譜介質的展開方向上不連續(xù)地開口的網版，具有各種形狀的圓點或具有帶狀的列作為開口部的網版)。絲網印刷之類的網印由于能夠以較為廉價且簡單的操作使被滲透層層疊，因而可優(yōu)選使用。
[0113]此外，被滲透層僅層疊于分離劑層上、或層疊于分離劑層上和填充劑層上時，通過使用各自適合的具有開口部的網版，也能調整層疊的區(qū)域的位置、面積。由此，能夠在填充劑層上的整個面上以圓點狀層疊被滲透層。
[0114]網版只要是可以使用后述含有多孔體的漿料作為印刷油墨，則對其材料沒有特別限定。作為這樣的網版，可舉出例如金屬掩模。
[0115]另一方面，采用噴墨印刷的情形中，除了使用后述含有多孔體的漿料作為用于印刷的油墨以外，可以采用常用的噴墨印刷技術。
[0116]另一方面，在制作筒狀或柱狀的色譜介質時，可以通過在分離劑層上或分離劑層上和填充劑層上涂布含有多孔體的漿料并使之干燥來制作。此外，將熒光指示劑或顯色試劑本身、或含有它們和粘合劑、以及根據需要的支撐體的組合物作為被滲透層時，也可以采用相同的方法。
[0117]此外，筒狀或柱狀的色譜介質中，被滲透層在色譜介質的展開方向上不連續(xù)地層疊時，可以使用例如印刷技術來層疊被滲透層。作為這樣的印刷技術，可以使用上述網印，作為網版，優(yōu)選使用具有上述開口部和柔軟性，且能夠卷繞于分離劑層的周面的網版。
[0118]在使用如上所述網印技術時，通過在網版上設置文字或刻度等期望的開口部，從而被滲透層不層疊于被滲透層上的該部分，分離劑層露出并與被滲透層具有不同的光學響應性，由此可在照射紫外線時確認上述文字或刻度。藉此，可提高色譜介質的便利性。
[0119]從確保充分滲透性的觀點出發(fā)，或為了在多孔體使用例如透明或半透明多孔體的情形中，在目標物質的斑點檢測時不受分離劑層的光學響應性的影響，通過漿料的涂布或上述印刷技術層疊的被滲透層的厚度(平均厚度)優(yōu)選為0.005mm以上、進一步優(yōu)選為0.01mm 以上。
[0120]另一方面，從防止目標物質的斑點擴散的觀點出發(fā)，被滲透層的厚度(平均厚度)優(yōu)選為0.2mm以下、進一步優(yōu)選為0.15mm以下。
[0121]為了在分離劑層上層疊被滲透層，可以采用上述說明的涂布或印刷技術，在這些技術中，制備含有多孔體的漿料、含有熒光指示劑或顯色試劑的溶液、或含有熒光指示劑或顯色試劑與粘合劑以及根據需要的支撐體的組合物，可以將其作為涂布液、印刷油墨使用。
[0122]作為制備含有多孔體的漿料時使用的材料，可舉出溶劑和根據需要的粘合劑。這種溶劑或粘合劑可以使用與能夠在形成分離劑層時使用的那些相同的溶劑或粘合劑。
[0123]作為上述熒光指示劑，可舉出例如:鎢酸鎂或含錳硅酸鋅等，作為制備含有上述熒光指示劑的溶液或漿料時的溶劑，可使用例如:用作網印的油墨溶劑的醇系、二醇醚系、烴系、酮、酯等有機溶劑?？膳e出例如:α-萜品醇、丁基卡必醇乙酸酯、丁基卡必醇、甲苯、環(huán)己烷、甲基乙基酮、甲基丙二醇。為了在印刷過程中不使?jié){料的流動性變差、或者不引起網的篩眼堵塞，可以考慮流動性、沸點、蒸發(fā)速度等物性選定適當的溶劑。
[0124]另一方面，作為顯色試劑，可舉出:茴香醛溶液、磷鑰酸溶液、碘溶液、茚三酮溶液、高錳酸鉀溶液、DNPH溶液、氯化錳溶液、和溴甲酚綠溶液。
[0125]在使用含有熒光指示劑或顯色試劑與粘合劑和根據需要的支撐體的組合物時，可以在上述熒光指示劑或顯色試劑的溶液中溶解或懸浮含有上述粘合劑的組合物而制為涂布液、印刷油墨。
[0126]作為形成被滲透層的構成材料，在含有多孔體時，作為在含有其的漿料中所用的溶劑，可以單獨使用醇系、二醇醚系、烴系、酮、酯這樣的有機溶劑。例如，在使用醇時，優(yōu)選為水溶性的有機溶劑和水的混合溶劑、更優(yōu)選為醇和水的混合溶劑。前述混合溶劑中的醇的含量優(yōu)選為0.1?50質量％、更優(yōu)選為I?45質量％、進一步優(yōu)選為2?40質量％。
[0127]作為可用的醇，可舉出例如:乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、2-甲基-1-丙醇、2-甲基-2-丙醇、1-戊醇和3-甲基-3-甲氧基丁醇。
[0128]前述漿料中的溶劑的含量可根據所形成的被滲透層的均一性、層的厚度、和經濟性的觀點來確定，相對于多孔體100質量份優(yōu)選為10?5000質量份、更優(yōu)選為50?1000質量份、進一步優(yōu)選為100?300質量份。
[0129]從提高所形成的被滲透層的強度的觀點出發(fā)，前述漿料優(yōu)選進一步含有粘合劑。前述粘合劑可以使用賦予在分離劑層上形成多孔體的層的粘接性的成分。作為這樣的粘合齊U，可舉出:石膏或膠態(tài)二氧化硅等無機系粘合劑、微纖化纖維素等有機纖維、以及堿水溶性共聚物、羥乙基纖維素或羧甲基纖維素等增稠劑、聚乙烯醇、丙烯酸等有機系粘合劑。粘合劑可以是一種或二種以上。
[0130]前述漿料中的粘合劑的含量可以從所形成的被滲透層的強度、和相對于被滲透層的來自分離劑層的流動相的適當上升速度的觀點出發(fā)，根據粘合劑的種類適宜確定。例如，若為石膏，則粘合劑的含量相對于多孔體100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為
0.5?30質量份、進一步優(yōu)選為I?20質量份。此外，例如若為羧甲基纖維素等有機系的粘合劑，則粘合劑的含量相對于多孔體100質量份優(yōu)選為0.1?50質量份、更優(yōu)選為0.5?10質量份、進一步優(yōu)選為I?5質量份。
[0131]被滲透層含有多孔體作為構成材料時，在通過利用紫外線照射的光學響應性來檢測斑點的情形中，可通過使熒光指示劑包含在含多孔體的漿料中而使被滲透層具有光學響應性。作為這種熒光指示劑，可以使用公知的熒光指示劑，可舉出例如:前述鎢酸鎂、或含錳硅酸鋅等。熒光指示劑的含量可確定在目標物質能夠分離的范圍，通常相對于前述多孔體100質量份優(yōu)選為0.1?10質量份，從使目標物質和被滲透層的對比度最佳的觀點出發(fā)，特別優(yōu)選為I?8質量份。
[0132]此外，在被滲透層含有多孔體作為構成材料，且通過顯色反應來檢測斑點時，可通過使顯色試劑包含在含多孔體的漿料中來使被滲透層具有光學響應性。作為這種顯色試齊U，可舉出公知的磷鑰酸、茚三酮等。顯色試劑的含量可確定在目標物質能夠分離的范圍，通常相對于前述多孔體100質量份優(yōu)選為0.1?10質量份，從使目標物質和被滲透層的對比度最佳的觀點出發(fā)，特別優(yōu)選為I?8質量份。
[0133]如上所述，本發(fā)明的色譜介質具有用于在分離前述目標物質前將前述目標物質固定的填充劑層。
[0134]本發(fā)明中所述“固定”是指在分離前點樣的目標物質利用展開液而進行之后的展開，由此目標物質充分停留在點樣的區(qū)域。在色譜介質中，填充劑層上層疊有被滲透層時，“固定”是指目標物質停留于被滲透層及該被滲透層下包含填充劑層的區(qū)域，填充劑層露出時，“固定”是指在填充劑層上點樣的目標物質停留于該點樣的填充劑層的區(qū)域。
[0135]本發(fā)明的色譜介質中的用于構成填充劑層的材料可以使用與上述說明的可以用于被滲透層的材料相同的材料，可列舉硅膠、中孔硅膠、沸石、纖維素、硅藻土、熔融二氧化硅、粘土礦物、氧化鋁、氧化鋯、其它陶瓷等多孔體。而且，作為構成填充劑層的材料，從良好地得到本發(fā)明的效果的觀點出發(fā)，優(yōu)選使用沒有分離目標物質的能力的材料。
[0136]作為上述硅膠，可優(yōu)選使用上述說明的進行了表面處理的硅膠。
[0137]另外，對于可以使用的多孔體的粒徑的范圍，可以列舉關于可用于被滲透層的多孔體所記載的范圍。
[0138]另外，被滲透層所用的多孔體與填充劑層所用的多孔體可以相同，也可以不同。作為填充劑層所用的材料與被滲透層所用的材料的組合，優(yōu)選在填充劑層上還層疊有被滲透層時，不產生妨礙在填充劑層上固定的目標物質的展開那樣的相互作用的組合。
[0139]使用多孔體作為本發(fā)明的色譜介質中的構成填充劑層的材料，調整用于使其層疊的漿料時，作為該溶劑，可以使用與可用于構成被滲透層的溶劑相同的溶劑。
[0140]另外，對于前述漿料中的溶劑的含量，可以根據所形成的填充劑層的均一性、層的厚度、及經濟的觀點來決定，相對于多孔體100質量份，優(yōu)選10?5，000質量份，更優(yōu)選50?I，000質量份，進一步優(yōu)選100?300質量份。
[0141]從所形成的被滲透層的強度提高的觀點出發(fā)，前述漿料優(yōu)選還含有粘合劑。
[0142]前述粘合劑中，可以使用賦予在填充劑層形成多孔體的層的粘合性的成分。作為這樣的粘合劑，可以使用與可用于構成被滲透層的粘合劑相同的粘合劑，這樣的粘合劑可以是一種也可以是二種以上。
[0143]從所形成的填充劑層的強度、和填充劑層中的流動相適當的展開速度的觀點考慮，前述漿料中的粘合劑的含量可以根據粘合劑的種類適當決定。例如為石膏，則粘合劑的含量相對于多孔體100質量份優(yōu)選0.1?50質量份,更優(yōu)選0.5?30質量份,進一步優(yōu)選I?20質量份。另外，例如為羧甲基纖維素等有機系粘合劑，則粘合劑的含量相對于多孔體100質量份優(yōu)選0.1?50質量份,更優(yōu)選0.5?10質量份,進一步優(yōu)選I?5質量份。
[0144]另外，上述填充劑層中，也可以與被滲透層同樣地含有熒光指示劑、顯色試劑，也可以為僅由它們構成的層?？梢允褂玫臒晒庵甘緞?、顯色試劑及它們的使用方式也可以使用與被滲透層所例示的相同的條件。
[0145]本發(fā)明的色譜介質中，關于使填充劑層層疊的方法，在本發(fā)明的色譜介質為板狀時，例如，在預先基材的一部分上層疊分離劑層后，使用涂布器，將含有構成填充劑層的材料的漿料涂布或噴霧至未層疊有分離劑層的基材的表面上，從而可以形成?；蛘?，構成被滲透層和分離劑層的材料相同時，在預先基材的一部分上層疊分離劑層后，利用與前述層疊被滲透層的方法相同的方法，在層疊有分離劑層的基材的表面上將含有構成被滲透層和填充劑層的材料的漿料涂布、噴霧或使用印刷技術進行層疊，由此在分離劑層上層疊的層形成為被滲透層，在基材上層疊的層形成為填充劑層。由此，可以同時形成被滲透層和填充劑層。此時，填充劑層為一層結構，得到被滲透層和填充劑層的工序是一個，是經濟的。
[0146]另一方面，本發(fā)明的色譜介質為柱狀時，如上所述，例如沿著柱管的內壁面形成被滲透層后，可以在分離劑層的形成之前或之后將構成填充劑層的材料填充至管內而形成。另外，為筒狀時，可以如上所述通過在基材的周面涂布構成填充劑層的材料而形成。另外，為不存在基材的柱狀時，如上所述，可列舉下述方法:至少在表面上具有前述分離劑的柱狀多孔體形成后，在分離劑層的周面上，使展開方向的長度比分離劑層長的基材例如膜卷繞，在分離劑展開方向的延長上形成圓柱狀的空洞，并在該空洞上導入構成填充劑層的材料來形成填充劑層。
[0147]應予說明，從充分固定目標物質的觀點出發(fā)，本發(fā)明的色譜介質中的填充劑層的厚度，在層疊有被滲透層時，合計該被滲透層的厚度而得的厚度優(yōu)選為2?5000 μ m，更優(yōu)選 5 ?3000 μ m。
[0148]此外，本發(fā)明中還提供上述色譜介質層疊于一片基材的多個區(qū)域上的TLC板(參照圖8)。根據這種TLC板，可將各種分離劑層和被滲透層的組合層疊于同一基材上，可以觀察利用同一展開液的目標物質的分離特性。對于分離劑層、填充劑層以及被滲透層的層疊方法，在目標色譜介質有多種時，除了不將其相互接觸地將層重疊之外，還可采用上述方法。
[0149]此外，如圖9概略所示，本發(fā)明中還提供在一片基材上層疊有分離劑層、填充劑層和被滲透層、且具有基材的端部側未層疊有被滲透層的區(qū)域的TLC材料(圖9參照)。根據這種TLC材料，例如，在圖9中虛線所示的位置設置溝槽，沿著該溝槽將該TLC材料以適當的方法、例如用手切斷，用割板器切斷，由此可以得到具有基材、分離劑層、填充劑層和被滲透層，且填充劑層露出的圖3 (I)所例示的TLC板。
[0150]對于本文中可用的基材、分離劑層、被滲透層或它們的層疊方法，可采用上述的那些。此外，TLC材料中，設置溝槽的位置也沒有特別限定。
[0151]本發(fā)明的色譜介質，盡管形狀取決于其方式而有所不同，但基本上通過采用與通常的TLC板的使用方法相同的使用方法，可以進行試樣中的目標物質的分離和檢測。
[0152]試樣中的目標物質的分離和檢測可通過下述方法進行，該方法包括:在色譜介質的展開方向(色譜介質為TLC板的情形中，其形狀使用長方形時優(yōu)選為長度方向)上使用流動相展開試樣的步驟；使該色譜介質上的流動相干燥的步驟；和通過紫外線照射或顯色試劑的顯色處理來檢測移動的目標物質中各成分的斑點的步驟。
[0153]使用本發(fā)明的色譜介質，用流動相展開試樣時，在試樣中的目標物質的分離進行的同時，目標物質也滲透至分離劑層上的被滲透層。
[0154]應予說明，本發(fā)明中的目標物質與被滲透層具有不同的光學響應性，與分離劑層具有相同的光學響應性。
[0155]利用本發(fā)明的色譜介質，可以在單一的色譜上進行試樣中的目標物質的提取成分和提余成分的分離與光學檢測。若與以往具有2個分離劑層的TLC板進行比較，以往的板中由于試樣中目標物質的各成分在各分離劑層中的移動速度不同而具有目標物質變寬的問題，而在本發(fā)明中，不會產生這種問題，可以可靠地檢測提余成分和提取成分這兩種成分。另外，本發(fā)明中若色譜介質為板狀，則可分別可靠地檢測將多個試樣并排點樣并同時展開時的各試樣的分離狀態(tài)。另外，通過收集含有滲透至被滲透層的特定斑點的部分(也含有分離劑層)，并進行提取操作，還可以用于目標物質的各成分的分離。
實施例
[0156]<實施例1 >
首先，將株式會社大賽路制CHIRALPAK IA (該社的注冊商標)的填充劑(也稱為“ IA填充劑”)3.00g、石膏0.45g、2%CMC(羧甲基纖維素)1110(株式會社大賽路制)水溶液3.0Og,和20% Snowtex C(日產化學工業(yè)株式會社制)水溶液0.45g添加于水0.30g、乙醇1.20g的混合溶液中，一邊照射超聲波一邊充分攪拌，制備第一衆(zhòng)料。
[0157]此外，將硅膠2.0Og(夕'、^ 一株式會社制液相色譜用、IR-60-5/20-U)、石膏
0.10g、2%CMC(羧甲基纖維素)1110(株式會社大賽路制)水溶液3.00g、含錳硅酸鋅0.02g和20% } ) 一 m M (日産化學工業(yè)株式會社制)水溶液0.30g添加至水1.0lg、乙醇
1.40g的混合溶液中，一邊照射超聲波一邊充分攪拌，制備第二漿料。
[0158]此外，將硅膠1.0Og (夕'、y 一株式會社制液體色譜用、IR-60-5/20-U)、石膏0.05g、2%CMC (羧甲基纖維素)1110 (株式會社夕' ^七 >制)水溶液1.50g、含錳硅酸鋅0.04g和20% % ) —吁” ％〔(日産化學工業(yè)株式會社制)水溶液0.15g添加至水0.06g、乙醇
0.55g的混合溶液中，一邊照射超聲波一邊充分攪拌,制備第三衆(zhòng)料。
[0159]這些漿料中，將第一漿料和第二漿料用TLC板制作用涂布器在6片直列排列的玻璃板上，在從浸潰展開液的浸潰端部起直至20mm的區(qū)域以外的表面均一地涂布第一漿料，在從浸潰展開液的浸潰端部起直至20mm的區(qū)域的表面涂布第二漿料。然后，將第一漿料層和第二漿料層風干，一邊用真空泵抽吸一邊在60°C進行3小時真空干燥，由此將由第一漿料形成的分離劑層，由第二漿料形成的填充劑層、以前述通過相對于TLC板的展開方向垂直的面而與前述分離劑層相接的方式進行層疊。
[0160]接著，使用金屬掩膜(東京:/ α寸一 m )在分離劑層和填充劑層上涂布第三漿料。作為網版，使用規(guī)則地具有間距0.6mm、且孔徑0.4mm的圓形狀開口部的網版(參照圖7)。然后，將作為被滲透層的第三漿料層風干，一邊用真空泵抽吸，一邊在60°C進行3小時真空干燥，由此制作被滲透層以圓點狀層疊于分離劑層和填充劑層上的TLC板I。
[0161]TLC板I的寬度為 5cm，長度為10cm。藉此，從TLC板的下側邊緣起直至該TLC板的展開方向的長度的1/5為止的區(qū)域(從下側邊緣起直至2.0cm之間)存在填充劑層。TLC板I中的分離劑層的厚度為150 μ m，填充劑層的厚度也為150 μ m、被滲透層的厚度為20 μ m。
[0162]由第一漿料形成的分離劑層是由IA填充劑形成的層，由第二漿料形成的填充劑層及第三漿料形成的被滲透層是前述硅膠的層。此外，IA填充劑的平均粒徑為20μπι，硅膠的平均粒徑為14.4 μ m。
[0163]將反式-二苯乙烯氧化物(t-SO)的外消旋體為1%、Troeger堿(TB)的外消旋體為1%、黃烷酮(FLV)的外消旋體為1%的乙酸乙酯溶液的約3 μ L，在沿著TLC板I的展開方向時的從下往上約Icm的位置(填充劑層的區(qū)域)點樣。在盛有以體積比9:1含有正己烷和乙醇的混合溶劑作為展開液的展開槽內，以使試樣的斑點在下方的方式盛放TLC板1，沿TLC板I的展開方向展開試樣中的反式-二苯乙烯氧化物、Troeger堿和黃烷酮的光學異構體。
[0164]該展開之后，用冷風干燥TLC板1，對TLC板I照射紫外線，結果在被滲透層上以濃綠色~黑色的斑點的形式分別確認到反式-二苯乙烯氧化物的提余成分Rt-SO和提取成分Et-SO的斑點，Troeger堿的提余成分RTB和提取成分ETB的斑點，以及黃烷酮的提余成分RFLV和提取成分EFLV (圖1)。
[0165]根據被滲透層中的試樣的點樣位置、展開液的到達位置以及斑點的中心位置求出各斑點的Rf值。進而根據k’= (1-Rf)/Rf的關系求出k’值。進而使用k’值求出α值。各光學異構體的結果不于表1。
[0166]<比較例1>
在實施例1的TLC板中，未設置填充劑層，在分離劑層上的整個面設置被滲透層，除此之外以與實施例1相同的原料、步驟制作TLC板3。繼而，在被滲透層上進行目標物質的點樣，除此之外，用與實施例1相同的操作、展開液展開反式-二苯乙烯氧化物、Troeger堿和黃烷酮的光學異構體。然后，與實施例1相同地，根據被滲透層中的試樣的點樣位置、展開液的到達位置以及斑點的中心位置求出各斑點的Rf值。進而根據k’= (1-Rf)/Rf的關系求出k’值。進而使用k’值求出α值。各光學異構體的結果示于表1。
[0167][表 I]
【權利要求】
1.色譜介質，其是具有用于分離目標物質的分離劑層、用于在分離前述目標物質前將前述目標物質固定的填充劑層、和用于前述分離劑層所分離的目標物質進行滲透的被滲透層的色譜介質，其中， 前述填充劑層通過相對于前述色譜介質中的前述目標物質的展開方向垂直的面與前述分離劑層相接，并且位于前述展開方向的上游側， 前述分離劑層具有對前述目標物質的分離性和對紫外線的光學響應性， 前述被滲透層具有與前述目標物質和前述分離劑層不同的光學響應性。
2.權利要求1所述的色譜介質，其中，前述填充劑層層疊于從前述色譜介質中的用于展開前述目標物質的展開液浸潰的浸潰端部起直至該色譜介質的展開方向的長度的1/20~1/2之間的區(qū)域。
3.權利要求1或2所述的色譜介質，其中，前述被滲透層在色譜介質的展開方向上不連續(xù)地層疊。
4.權利要求1~3中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層以圓點狀層疊于前述分離劑層上。
5.權利要求4所述的色譜介質，其中，前述以圓點狀層疊的被滲透層中，該圓點的平均直徑為0.01~5mm,圓點間的間距為0.015~5mm。
6.權利要求1~3中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層以與色譜介質的展開方向交叉的帶狀的列的方式 層疊于前述分離劑層上。
7.權利要求6所述的色譜介質，其中，形成前述帶狀的列的帶選自直線、波浪線和它們的虛線。
8.權利要求1~7中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層的厚度比前述分離劑層薄。
9.權利要求1~8中任一項所述的色譜介質，其中，構成前述分離劑層的分離劑是光學異構體用分離劑。
10.權利要求9所述的色譜介質，其特征在于，前述光學異構體用分離劑含有多糖衍生物，該多糖衍生物由多糖與替代多糖的羥基或氨基的一部分或全部的芳香族酯基、芳香族氨基甲?；?、芳香族醚基和羰基中的任一者形成。
11.權利要求1~10中任一項所述的色譜介質，其中，前述被滲透層含有多孔體和熒光指示劑或顯色試劑作為構成材料。
12.權利要求1~12中任一項所述的色譜介質，其中，前述填充劑層含有多孔體作為構成材料。
13.權利要求11或12所述的色譜介質，其中，前述多孔體為硅膠或經表面處理的硅膠。
14.權利要求1f13中任一項所述的色譜介質，其中，還含有粘合劑作為構成材料。
15.權利要求1~14中任一項所述的色譜介質，其中，在前述被滲透層上存在刻度和/或文字。
16.權利要求15所述的色譜介質，其中，前述刻度和/或文字與前述被滲透層具有不同的光學響應性。
17.權利要求1~16中任一項所述的色譜介質，其具有面向前述分離劑層或面向前述被滲透層、且用于支撐前述色譜介質的基材。
18.權利要求1~17中任一項所述的色譜介質,其中，前述色譜介質為板狀、筒狀或柱狀。
19.TLC板，其具有權利要求1~16中任一項所述的色譜介質和用于支撐該色譜介質的基材，并在前述基材上的多個區(qū)域層疊有前述色譜介質。
20.TLC材料，其包含權利要求1~16中任一項所述的色譜介質和用于支撐該色譜介質的基材 。
【文檔編號】G01N30/95GK104081199SQ201380007653
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2013年2月1日 優(yōu)先權日:2012年2月3日
【發(fā)明者】蓑田稔治, 池田勇 申請人:株式會社大賽璐
專業(yè)數控銑床產品供應商
20年生產經驗，實力工廠，精工品質，質量有保障
