久久一区二区免费播放,国产在线欧美日韩一区二区,国产综合色在线视频,精品伊人久久久香线蕉,精品视频麻豆网站,玖玖国产,国内精品久久久久影,在线观看精品视频一区二区三区,午夜久久影院,国产精品一区久久

一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法，包括以下步驟：1)納米金溶液制備，0.01％w/w的HAuCl4溶液加熱至沸，強(qiáng)力攪拌下加入1％的檸檬酸鈉溶液，混合溶液保持沸騰15分鐘后撤掉加熱源，而后不斷攪拌冷卻至室溫，得到的溶液于4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?)鐵蛋白抗體對納米金的標(biāo)記，利用鐵蛋白抗體修飾金納米顆粒；3)免疫反應(yīng)；4)化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白，移取免疫反應(yīng)完的鐵蛋白抗體修飾的納米金/鐵蛋白混合液于化學(xué)發(fā)光池中，注入魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑，通過IFFL-D化學(xué)發(fā)光分析儀測定并記錄其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度，得出化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和待測鐵蛋白之間的相關(guān)關(guān)系。
【專利說明】一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體的說，本發(fā)明涉及一種基于納米金催化的化 學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 鐵蛋白是一類廣泛存在于動(dòng)植物及微生物細(xì)胞中含高鐵量的蛋白質(zhì)，能夠參與和 維持鐵代謝的平衡。人體內(nèi)鐵蛋白可以通過儲(chǔ)存機(jī)體中的過剩鐵，避免產(chǎn)生鐵中毒，也可 以釋放鐵給需鐵細(xì)胞，用于合成含鐵的蛋白質(zhì)或酶。人們的許多疾病如缺鐵性貧血、急性 肝炎及蛋白質(zhì)缺乏癥等都與血清中鐵蛋白的含量有關(guān)，甚至某些癌癥患者體內(nèi)的鐵蛋白也 會(huì)出現(xiàn)異常，可作為一些癌癥的輔助診斷，因此對鐵蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確快速的測定具有重要的 意義。目前，鐵蛋白的測定主要采用酶聯(lián)免疫分析（ELISA)法，放射性免疫法、電化學(xué)分 析方法、表面等粒子共振技術(shù)、熒光分析以及很少的化學(xué)發(fā)光分析等。但是，放射性免疫法 因使用放射性同位素作為標(biāo)記，必然會(huì)帶來健康危害、廢物處理等問題。寥寥可數(shù)的化學(xué)發(fā) 光分析和酶聯(lián)免疫法存在步驟繁多的缺點(diǎn)，而不適用于各種生物標(biāo)記的檢測。別的分析方 法大多需要復(fù)雜、費(fèi)時(shí)的樣品處理和貴重的分析儀器以及具有一定技術(shù)要求的操作人員， 使得這些方法的應(yīng)用受到一定限制。
[0003] 化學(xué)發(fā)光分析以其靈敏度高、線性范圍寬以及操作簡單等優(yōu)點(diǎn)常被用作各種免疫 分析的最終檢測手段，然而有些化學(xué)發(fā)光體系〔例如魯米諾一 H202 - HRP(辣根過氧化物 酶）〕直接用于免疫分析時(shí)大分子的空間位阻作用使方法的靈敏度不夠理想。在納米科學(xué) 迅猛發(fā)展的過程中，納米粒子尤其金屬納米粒子因其具有容易合成和生物相容性好等優(yōu)點(diǎn) 已被引入化學(xué)發(fā)光分析，開創(chuàng)納米粒子化學(xué)發(fā)光生物分析的新領(lǐng)域，一度成為研究的熱點(diǎn)。 但是大多基于納米粒子標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光免疫分析，均是通過將所標(biāo)記金屬納米粒子溶出為 金屬離子，從而催化化學(xué)發(fā)光反應(yīng)實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)物的檢測。Han研究組報(bào)道了基于納米金溶解 并結(jié)合AuCl 4^-HCl-NaCl-Br2-luminol體系的化學(xué)發(fā)光金屬免疫分析法，用于抗壞血酸過氧 化物酶抗體（ApxIVAb)的測定。Li研究組和Lu研究組相繼利用將標(biāo)記所用納米金溶解得 到AuC1 4_，結(jié)合AuCl4_-luminol-H202化學(xué)發(fā)光體系測定羊抗人IgG。此外，Li研究組利用將 標(biāo)記的納米金用Ag+還原溶液處理后，經(jīng)硝酸溶出后，結(jié)合Ag+-Mn 2+-K2S208-H3P0 4-luminol化 學(xué)發(fā)光體系測定人IgG。上述這些納米粒子化學(xué)發(fā)光金屬免疫分析方法存在一定缺陷：一、 需要將納米金屬離子的溶出，要使納米粒子尤其貴金屬納米粒子完全溶出的的條件均比較 苛刻且所用溶劑大多有毒。溶出步驟繁瑣耗時(shí)，且會(huì)帶來高的背景信號，從而降低方法的靈 敏度；二、這些分析方法大多是異相的，需要多步的標(biāo)記和洗脫，從而難以克服重現(xiàn)性和精 密度的問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明針對目前鐵蛋白檢測技術(shù)存在的不足，以免疫特異性反應(yīng)為分子識(shí)別基 礎(chǔ)，納米金為信號探針，利用納米金形態(tài)影響其對魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的催化 性能，建立了一種簡便、快速靈敏的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方 法，包括以下步驟：
[0006] 1)納米金溶液制備，0. 01% w/w的HAuC14溶液加熱至沸，強(qiáng)力攪拌下加入1%的 檸檬酸鈉溶液，混合溶液保持沸騰15分鐘后撤掉加熱源，而后不斷攪拌冷卻至室溫，得到 的溶液于4°C冰箱中保存?zhèn)溆茫?br> [0007] 2)鐵蛋白抗體對納米金的標(biāo)記，利用鐵蛋白抗體修飾金納米顆粒，具體為：將鐵 蛋白抗體修飾在納米金粒子的表面，取納米金溶液用〇. lmol/L K2C03溶液調(diào)節(jié)pH為9,加 入鐵蛋白抗體，室溫?cái)嚢枳饔?小時(shí)使鐵蛋白抗體和金納米粒子充分結(jié)合，于4°C溫度環(huán)境 下以12000轉(zhuǎn)/分的速度離心30分鐘，以除去未標(biāo)記的抗體，吸出上清液，剩余的沉淀用 0. Olmol/L含有1 % BSA的磷酸緩沖溶液pH7. 4懸浮至原體積，于4°C冰箱中保存待用；
[0008] 3)免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)選用NaCl濃度為1. 5X10_3mol/L，免疫反應(yīng)時(shí)間為15-25 分鐘；
[0009] 4)化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白，移取免疫反應(yīng)完的鐵蛋白抗體修飾的納米金/鐵蛋 白混合液于化學(xué)發(fā)光池中，注入魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑，通過IFFL-D化學(xué)發(fā)光分 析儀測定并記錄其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度；通過測定化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度檢測鐵蛋白的含量，由此可以得 出化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和待測鐵蛋白之間的相關(guān)關(guān)系。
[0010] 所述的步驟1)中，選用的納米金的粒徑為25nm，濃度為6. 0 X Krlclmol/L? 6. 0Xl(T8mol/L 之間。
[0011] 所述的步驟2)中，標(biāo)記鐵蛋白抗體所用濃度為0. 5mg/mL。
[0012] 所述的步驟4)中，選擇魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑為5Χ1(Γ4Μ魯米諾和 5. ΟΧ 1(Γ2Μ高碘酸鉀的體積比為2:1混合而成。
[0013] 魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑的pH值優(yōu)化為12. 0。
[0014] 本發(fā)明的有益效果是：
[0015] 將納米粒子對于化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的催化性能和高特異性的免疫分析相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)鐵 蛋白的分析檢測至今仍未見報(bào)道。因此，本發(fā)明基于納米金形態(tài)影響其對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的 催化性能，而建立的實(shí)用性、簡單、靈敏且快速化學(xué)發(fā)光分析測定鐵蛋白的方法很有意義， 能夠解決上述檢測方法遇到的問題。具有以下優(yōu)點(diǎn)：（1)所用化學(xué)發(fā)光儀價(jià)格低廉且操作 簡單；（2)避免繁瑣和艱難的納米金（或銀）的溶解剝離，具有高的靈敏度和好的重現(xiàn)性； (3)所用的25nm納米金的合成簡便且易于標(biāo)記；(4)該方法只需要非競爭的一步操作，避免 了多步反應(yīng)及洗脫步驟，大大節(jié)省了分析時(shí)間，將測試時(shí)間縮短為30分鐘以內(nèi)。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0016] 當(dāng)結(jié)合附圖考慮時(shí)，通過參照下面的詳細(xì)描述，能夠更完整更好地理解本發(fā)明以 及容易得知其中許多伴隨的優(yōu)點(diǎn)，但此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解， 構(gòu)成本發(fā)明的一部分，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā) 明的不當(dāng)限定，其中：
[0017] 圖1抗體用量的優(yōu)化，納米金濃度固定為0. 6nM，所測吸光度為波長520nm處；
[0018] 圖2免疫反應(yīng)時(shí)間的影響，條件：魯米諾，5X 10_4M ;高碘酸鉀，5. OX 10_2M ;
[0019] 圖3鹽濃度的影響，條件：魯米諾，5X 10_4M ;高碘酸鉀，5. OX 10_2M ;
[0020] 圖4化學(xué)發(fā)光反應(yīng)動(dòng)力學(xué)曲線；圖中自下至上分別為沒有納米金，納米金，納 米金+鐵蛋白抗體，納米金+鐵蛋白抗體+鐵蛋白；條件：魯米諾，5X 1(Γ4Μ ;高碘酸 鉀，5· 0Χ1(Γ2Μ ;
[0021] 圖5測定鐵蛋白的靈敏度分析；
[0022] 圖6測定鐵蛋白的特異性評價(jià)；注（a)鐵蛋白，（b)牛血清白蛋白（BSA)，（c)人免 疫球蛋白G(IgG)，⑷羊免疫球蛋白G IgG，（e)兔免疫球蛋白G IgG，（f) α -胎兒蛋白抗原 (AFT)；
[0023] 圖7方法可靠性的評價(jià)；
[0024] 圖8納米金透射電鏡圖；圖8a為納米金+鐵蛋白抗體，圖8b為納米金+鐵蛋白 抗體+鐵蛋白。

【具體實(shí)施方式】
[0025] 為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和具體實(shí) 施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0026] 所用到的主要儀器設(shè)備和試劑：
[0027] IFFL-D流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套設(shè)備（西安瑞邁分析儀器有限公司）， 透射電子顯微鏡（日立公司，規(guī)格型號：H-600)，恒溫磁力攪拌器（85-2型，上海司樂儀器有 限公司），恒溫水浴鍋（HH-1型，北京科偉永興儀器有限公司），KYC100C生化培養(yǎng)箱（上海 ?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司），可調(diào)微量加液器（上海求精玻璃儀器廠），聚苯乙烯96微孔板 (F0LC0N)。
[0028] 氯金酸（HAuC14 · 4H20, AR，Au含量>47. 8%，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；將氯 金酸固體溶于二次去離子水中制備氯金酸儲(chǔ)備溶液，放于4°C冰箱中保存。將4. 43g魯米諾 固體粉末溶解在20mL0. 10M NaOH溶液中并稀釋至1L，制備得到2. 5X10_2M魯米諾儲(chǔ)備溶 液。使用之前避光保存一星期以確保試劑性質(zhì)的穩(wěn)定。工作溶液通過稀釋魯米諾儲(chǔ)備溶液 而得到。將 13. 8g Na2HP04 · 12H20、1. 6g NaH2P04 · H20 和 9. Og NaCl 溶解在 1L 的二次去離子 超純水中，配制得到磷酸緩沖溶液（pH7. 4)。鄰苯二胺（OPD)底物溶液臨用前配制。鐵蛋白 抗體、鐵蛋白、人IgG、兔IgG、羊IgG、牛血清白蛋白和α-胎兒蛋白抗原（AFT)均購自于北 京鼎國生物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)用水為二次去離子水。
[0029] 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化：
[0030] 選用粒徑為25nm的納米金粒子，固定其濃度為0. 6nM，對標(biāo)記所用鐵蛋白抗體的 用量進(jìn)行優(yōu)化，如圖1所示，選擇鐵蛋白抗體的濃度為〇. 5mg/mL。
[0031] 免疫反應(yīng)的有效程度對分析檢測鐵蛋白的靈敏性至關(guān)重要。實(shí)驗(yàn)中考察了免疫反 應(yīng)的時(shí)間和鹽濃度的影響。結(jié)果如圖2和圖3所示，由圖2可以看出，免疫反應(yīng)一開始化學(xué) 發(fā)光信號較弱，隨著時(shí)間增加，化學(xué)發(fā)光信號逐漸增強(qiáng)，反應(yīng)時(shí)間到達(dá)15分鐘時(shí)，發(fā)光信號 迅速增強(qiáng)，約25分鐘以后達(dá)到穩(wěn)定。所以，免疫反應(yīng)的時(shí)間選擇為25分鐘。另外，高濃度 的鹽能夠引起納米金的團(tuán)聚，而鹽濃度太低將會(huì)影響免疫反應(yīng)的有效進(jìn)行。本發(fā)明考察了 鹽濃度的影響，從圖3可以看出，隨著鹽濃度的增加，化學(xué)發(fā)光信號增強(qiáng)，而當(dāng)鹽濃度大于 1.5Xl(T 3m〇l/L時(shí)，隨著鹽濃度的增加，化學(xué)發(fā)光信號開始降低，可能是由于過高的離子強(qiáng) 度使蛋白質(zhì)（抗原或抗體）變質(zhì)，不利于免疫反應(yīng)的進(jìn)行而導(dǎo)致納米金催化性能減弱，從而 化學(xué)強(qiáng)度降低。所以，NaCl濃度選擇為1. 5X 10_3mol/L。
[0032] 另外，考慮到化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和試劑的消耗，選擇魯米諾的濃度為5Xl(T4m 〇l/L，高 碘酸鉀濃度為5X10_2mol/L。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該體系的pH值為12.0時(shí)較適宜。
[0033] 25nm納米金的制備：
[0034] 采用檸檬酸鹽還原法制備。50mL的HAuC14 (0. 01 % w/w)溶液加熱至沸，然后在強(qiáng) 力攪拌下，迅速加入0. 8mLl %的檸檬酸鈉溶液。此混合溶液保持沸騰15分鐘后撤掉加熱 源，而后在不斷的攪拌下冷卻至室溫。得到的溶液于4°C冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> [0035] 鐵蛋白抗體修飾金納米顆粒的制備：
[0036] 將鐵蛋白抗體修飾在25nm金納米粒子的表面。取5mL納米金溶液用0· lmol/L K2C03溶液調(diào)節(jié)pH為9,加入lmL鐵蛋白抗體，室溫?cái)嚢枳饔?小時(shí)使鐵蛋白抗體和金納米 粒子充分結(jié)合，于4°C離心30分鐘（12000轉(zhuǎn)/分）以除去未標(biāo)記的抗體，吸出上清液，剩余 的沉淀用〇. Olmol/L含有1% BSA的磷酸緩沖溶液（pH7. 4)懸浮至原體積，于冰箱中（4°C ) 保存待用。
[0037] 化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白：
[0038] 考慮蛋白質(zhì)生物試劑的消耗，實(shí)驗(yàn)中采取靜態(tài)注射的方式。移取免疫反應(yīng)完的鐵 蛋白抗體修飾的納米金/鐵蛋白混合液200 μ L于化學(xué)發(fā)光池中，注入300 μ L魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑（5Χ10_4Μ魯米諾和5.0Χ10_2Μ高碘酸鉀的體積比為2:1)，通過 IFFL-D化學(xué)發(fā)光分析儀測定并記錄其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度。通過測定化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度檢測鐵蛋白的 含量，由此可以得出化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和待測鐵蛋白之間的相關(guān)關(guān)系。
[0039] 鐵蛋白化學(xué)發(fā)光的分析性能：
[0040] 實(shí)驗(yàn)中首先考察了 25nm納米金對魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的催化性能。 如圖4所示，在沒有催化劑的存在下，魯米諾-高碘酸鉀進(jìn)行的是一個(gè)弱的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。 25nm納米金能夠催化該體系的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，鐵蛋白抗體對納米金進(jìn)行標(biāo)記幾乎沒有對其 催化性能產(chǎn)生影響，而免疫反應(yīng)能夠?qū)е录{米金的團(tuán)聚，這一形態(tài)的改變使得其催化性能 大大提高?；诖爽F(xiàn)象，實(shí)現(xiàn)了鐵蛋白的化學(xué)發(fā)光分析檢測。
[0041] 在前述優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，考察了鐵蛋白分析測定的靈敏性。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)隨著鐵 蛋白濃度的增加，化學(xué)發(fā)光信號逐漸增強(qiáng)。且在6. 0X 10-?6. OX l(Tg/mL的濃度范圍 內(nèi)，化學(xué)發(fā)光的強(qiáng)度與鐵蛋白的濃度的對數(shù)值成良好的線性關(guān)系，線性曲線如圖5所示，其 檢出限為2. 8X 10_ng/mL(S/N = 3)。并對5. 6X 10_9g/mL的鐵蛋白進(jìn)行六次重復(fù)測定，相 對標(biāo)準(zhǔn)偏差（R.S.D.)為3. 6%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該方法檢出限低，精密度好。和已有的靈敏 性較好的電化學(xué)檢測方法相比較，檢出限相當(dāng)，但本方法簡便快速得多。
[0042] 該化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的特異性評價(jià)結(jié)果如圖6所示，所用待測物的濃度均 為5. 0Xl(Tg/mL時(shí)，只有當(dāng)待測物為鐵蛋白時(shí)才有明顯的化學(xué)發(fā)光信號，而其它組分所誘 導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光信號相對來說都非常弱，表明本發(fā)明所建立的方法對于鐵蛋白的測定具有良 好的特異性。
[0043] 血樣的測定：
[0044] 人血清樣品經(jīng)稀釋后同時(shí)用本發(fā)明所提出的化學(xué)發(fā)光分析方法及酶聯(lián)免疫吸附 分析方法進(jìn)行測定，用以評價(jià)本發(fā)明所建立的分析方法檢測鐵蛋白的可靠性。
[0045] 實(shí)驗(yàn)中將一系列稀釋的人血清樣品作為待測樣品，用本方法進(jìn)行測定，同時(shí)測定 并繪制鐵蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)鐵蛋白的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出血清樣品中鐵蛋白的濃度，與用酶 聯(lián)免疫吸附方法得出的結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果如圖7所示，兩種分析方法測定的結(jié)果基本相 同，說明本發(fā)明所建立的化學(xué)發(fā)光分析方法檢測鐵蛋白比較可靠，可以用于實(shí)際血清樣品 的測定。
[0046] 利用透射電鏡對鐵蛋白抗體修飾的納米金在與鐵蛋白發(fā)生免疫反應(yīng)前后的變化 進(jìn)行了研究，結(jié)果如圖8?？梢钥闯?，鐵蛋白抗體標(biāo)記的納米金是單分散的（圖8a)，免疫反 應(yīng)完之后納米金發(fā)生了明顯的團(tuán)聚（圖8b)。
[0047] 以上實(shí)例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的核心思想；同時(shí)，對于本領(lǐng)域的一般 技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想，在【具體實(shí)施方式】及應(yīng)用范圍上均會(huì)有改變之處，綜上所述， 本說明書內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。
【權(quán)利要求】
1. 一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法，其特征在于，包括以下步 驟： 1) 納米金溶液制備，0.01 % w/w的HAuC14溶液加熱至沸，強(qiáng)力攪拌下加入1 %的檸檬 酸鈉溶液，混合溶液保持沸騰15分鐘后撤掉加熱源，而后不斷攪拌冷卻至室溫，得到的溶 液于4 C冰箱中保存?zhèn)溆茫? 2) 鐵蛋白抗體對納米金的標(biāo)記，利用鐵蛋白抗體修飾金納米顆粒，具體為：將鐵蛋白 抗體修飾在納米金粒子的表面，取納米金溶液用〇. lmol/L K2C03溶液調(diào)節(jié)pH為9,加入 鐵蛋白抗體，室溫?cái)嚢枳饔?小時(shí)使鐵蛋白抗體和金納米粒子充分結(jié)合，于4°C溫度環(huán)境 下以12000轉(zhuǎn)/分的速度離心30分鐘，以除去未標(biāo)記的抗體，吸出上清液，剩余的沉淀用 0. Olmol/L含有1 % BSA的磷酸緩沖溶液pH7. 4懸浮至原體積，于4°C冰箱中保存待用； 3) 免疫反應(yīng)，免疫反應(yīng)選用NaCl濃度為1.5Xl(T3m〇l/L，免疫反應(yīng)時(shí)間為15-25分鐘； 4) 化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白，移取免疫反應(yīng)完的鐵蛋白抗體修飾的納米金/鐵蛋白混 合液于化學(xué)發(fā)光池中，注入魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑，通過IFFL-D化學(xué)發(fā)光分析儀 測定并記錄其化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度；通過測定化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度檢測鐵蛋白的含量，由此可以得出化 學(xué)發(fā)光強(qiáng)度和待測鐵蛋白之間的相關(guān)關(guān)系。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法， 其特征在于，所述的步驟1)中，選用的納米金的粒徑為25nm，濃度為6. 0X10_1(lmol/L? 6. 0Xl(T8mol/L 之間。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法，其 特征在于，所述的步驟2)中，標(biāo)記鐵蛋白抗體所用濃度為0. 5mg/mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法， 其特征在于，所述的步驟4)中，選擇魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑為5 X 1(Γ4Μ魯米諾和
5. ΟΧ 1(Γ2Μ高碘酸鉀的體積比為2:1混合而成。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種基于納米金催化的化學(xué)發(fā)光分析檢測鐵蛋白的方法，其 特征在于，其特征在于，魯米諾-高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光試劑的pH值優(yōu)化為12. 0。
【文檔編號】G01N21/76GK104062287SQ201410308668
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年7月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月1日
【發(fā)明者】齊瑩瑩, 修福榮 申請人:福建工程學(xué)院