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一種檢測樣本中髓過氧化物酶濃度的試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于體外免疫檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種檢測樣本中髓過氧化物酶（MPO）濃度的試劑盒及其制備方法。所述試劑盒包括包被有抗髓過氧化物酶單克隆抗體的微孔板、髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品、辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物酶單克隆抗體、樣本緩沖液、過氧化氫的檸檬酸鹽緩沖液、四甲基聯(lián)苯胺的檸檬酸鹽緩沖溶液、1-2M的硫酸溶液、含有表面活性劑的磷酸鹽緩沖液。本發(fā)明由于所用的檢測儀器較為簡單，均為通常所用儀器，故檢測成本較低，利于推廣；并且該試劑盒容易操作，不需要專業(yè)的人員即可實現(xiàn)；同時試劑盒內(nèi)獨特的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液和樣本緩沖液配方，大大提高了檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。
【專利說明】一種檢測樣本中髓過氧化物酶濃度的試劑盒及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于體外免疫檢測【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種檢測樣本中髓過氧化物酶 (ΜΡ0)濃度的試劑盒及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 髓過氧化物酶（ΜΡ0)是一種相對分子質(zhì)量為150KD的白細胞酶，是糖基化的血紅 素蛋白。ΜΡ0來源于多形核中性粒細胞、單核細胞及巨噬細胞，貯存在嗜天青顆粒中，當(dāng)白 細胞被激活及脫顆粒時，ΜΡ0被釋放到吞噬泡和血漿中。在特定條件下，它能誘導(dǎo)氧化應(yīng) 激和組織損傷，作為系統(tǒng)炎癥和氧化應(yīng)激的標(biāo)志物，ΜΡ0通過多種機制參與冠心病的發(fā)生、 發(fā)展。大量流行病學(xué)研究顯示ΜΡ0濃度的增高與冠心病密切相關(guān)，因此檢測病人血漿中ΜΡ0 的濃度對于冠心病患者具有十分重要的參考價值。
[0003] 目前，在市面上檢測ΜΡ0濃度常用的試劑種類需要配套昂貴的大型儀器，檢測成 本高，操作繁瑣，對實驗操作人員的技能要求高，不利于該項目檢測的大范圍推廣。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對上述技術(shù)的不足之處，本發(fā)明提供一種操作簡便、便于實驗人員掌握、涉及實 驗儀器單一、普及率高、檢測成本低、檢測結(jié)果準(zhǔn)確，非常利于大范圍推廣的髓過氧化物酶 (ΜΡ0)定量檢測試劑盒。
[0005] -種檢測樣本中髓過氧化物酶濃度的試劑盒，包括包被有抗髓過氧化物酶單克隆 抗體的微孔板、髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品、辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物 酶單克隆抗體、樣本緩沖液、過氧化氫的檸檬酸鹽緩沖液(稱為底物A)、四甲基聯(lián)苯胺的檸 檬酸鹽緩沖溶液(稱為底物B)、1-2M的硫酸溶液(稱為終止液)、含有表面活性劑的磷酸鹽緩 沖液(稱為濃縮洗液)。
[0006] 進一步的，所述微孔板為96孔聚苯乙烯微孔板，里面包被有1-50 μ g/孔的抗髓過 氧化物酶單克隆抗體。
[0007] 進一步的，所述的髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都是用髓過氧化物酶純品與 自制的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液按照1:200000-1:1000稀釋而成，所述標(biāo)準(zhǔn)品不少于2個，所述質(zhì)控 品和所述標(biāo)準(zhǔn)品的區(qū)別只是濃度不同，所述質(zhì)控品的作用是在試劑盒使用過程中起到核準(zhǔn) 校對的作用，即通過質(zhì)控品測值是否在質(zhì)控范圍內(nèi)來對標(biāo)準(zhǔn)品擬合出來的曲線進行核準(zhǔn)校 對，若質(zhì)控品測值合格，則可以利用標(biāo)準(zhǔn)曲線來擬合出樣本中的髓過氧化物酶濃度值。
[0008] 進一步的，所述的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，是在PH7. 0-8. 0、濃度為10-100mM磷酸鹽緩沖液 中，分別加入1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的動物血清、〇. 01-0. 5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的防腐劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的 蛋白保護劑、0.05-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表面活性劑混合而成。
[0009] 進一步的，所述樣本緩沖液是在PH4. 0-5. 0、濃度為10-100mM的檸檬酸鹽緩沖液 中，分別加入〇. l_3mM的金屬離子絡(luò)合劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蛋白保護劑、0.01-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù) 的表面活性劑、〇. 01-0. 5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的防腐劑混合而成。
[0010] 優(yōu)選的，所述的表面活性劑為曲達通X-100、吐溫20、布里杰-35、吐溫40、吐溫60、 吐溫80、十二烷基磺酸鈉、斯盤20、烷基酚聚氧乙烯4醚、聚乙二醇2000、聚乙二醇4000。 [0011] 優(yōu)選的，所述的防腐劑為Proclin300、疊氮鈉、硫柳汞、硫酸慶大霉素。
[0012] 優(yōu)選的，所述的金屬離子絡(luò)合劑為乙二胺四乙酸二鈉和乙二胺四乙酸四鈉。
[0013] 優(yōu)選的，所述的蛋白保護劑為牛血清白蛋白、牛Y蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖。
[0014] 制備所述試劑盒的方法，包括以下制備過程，所述制備過程不分先后：
[0015] 包被有抗髓過氧化物酶單克隆抗體的微孔板的制備：將特異性的抗髓過氧化物酶 單克隆抗體用磷酸鹽緩沖液稀釋到濃度為1-50 μ g/ml，分別加入到96孔聚苯乙烯微孔板 的凹孔中進行包被；然后用洗板機將微孔板洗三次；再向微孔板凹孔中加入含牛血清白蛋 白的封閉液進行封閉；甩去凹孔中的封閉液，烤干，真空袋封裝，4°C存放；
[0016] 髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的制備：用含有動物血清、防腐劑、蛋白保護 齊IJ、表面活性劑的磷酸鹽緩沖液將髓過氧化物酶純品配制成標(biāo)示濃度為〇-l〇〇〇ng/ml的一 系列標(biāo)準(zhǔn)品以及8〇-500ng/ml的質(zhì)控品；
[0017] 辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物酶單克隆抗體的制備：將被過碘酸鈉氧化 好的辣根過氧化物酶與特異性的抗髓過氧化物酶單克隆抗體混合交聯(lián)，然后用硼氫化鈉還 原，再透析后即得髓過氧化物酶的酶標(biāo)抗體；將酶標(biāo)記物與甘油等體積混合，-20°c保存?zhèn)?用；
[0018] 樣本緩沖液的制備：將金屬離子絡(luò)合劑、蛋白保護劑、表面活性劑和防腐劑分別加 入到檸檬酸鹽緩沖液中，攪拌均勻；
[0019] 底物A的制備：將過氧化氫加入到檸檬酸鹽緩沖液中，配制成過氧化氫終濃度為 20-50%的檸檬酸鹽混合溶液；
[0020] 底物B的制備：將四甲基聯(lián)苯胺加入到檸檬酸鹽緩沖液中，配制成四甲基聯(lián)苯胺 最終濃度為5-20%的檸檬酸鹽混合溶液；
[0021] 終止液的制備：將濃硫酸加水稀釋；
[0022] 濃縮洗液的制備：把表面活性劑加到磷酸鹽緩沖液中，然后混勻。
[0023] 本發(fā)明由于所用的檢測儀器較為簡單，均為通常所用儀器，故檢測成本較低，利于 推廣；并且該試劑盒容易操作，不需要專業(yè)的人員即可實現(xiàn)；同時試劑盒內(nèi)獨特的標(biāo)準(zhǔn)品 稀釋液和樣本緩沖液配方，大大提高了檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0024] 圖1為實施例2標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0025] 圖2為實施例3標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0026] 圖3為實施例4標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0027] 圖4為實施例5標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0028] 圖5為實施例6標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0029] 圖6為實施例7標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0030] 圖7為實施例8標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。
[0031] 圖8為實施例9標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。

【具體實施方式】
[0032] 下面結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步詳細說明。
[0033] 實施例1:
[0034] 一種檢測樣本中髓過氧化物酶濃度的試劑盒，包括包被有抗髓過氧化物酶單克隆 抗體的微孔板、髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品、辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物 酶單克隆抗體、樣本緩沖液、過氧化氫的檸檬酸鹽緩沖液(稱為底物A)、四甲基聯(lián)苯胺的檸 檬酸鹽緩沖溶液(稱為底物B)、1-2M的硫酸溶液(稱為終止液)、含有表面活性劑的磷酸鹽緩 沖液(稱為濃縮洗液)。
[0035] 進一步的，所述微孔板為96孔聚苯乙烯微孔板，里面包被有1-50 μ g/孔的抗髓過 氧化物酶單克隆抗體。
[0036] 進一步的，所述的髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都是用髓過氧化物酶純品與 自制的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液按照1:200000-1:1000稀釋而成，所述標(biāo)準(zhǔn)品不少于2個，所述質(zhì)控 品和所述標(biāo)準(zhǔn)品的區(qū)別只是濃度不同，所述質(zhì)控品的作用是在試劑盒使用過程中起到核準(zhǔn) 校對的作用，即通過質(zhì)控品測值是否在質(zhì)控范圍內(nèi)來對標(biāo)準(zhǔn)品擬合出來的曲線進行核準(zhǔn)校 對，若質(zhì)控品測值合格，則可以利用標(biāo)準(zhǔn)曲線來擬合出樣本中的髓過氧化物酶濃度值。
[0037] 進一步的，所述的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，是在PH7. 0-8. 0、濃度為10-100mM磷酸鹽緩沖液 中，分別加入1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的動物血清、〇. 01-0. 5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的防腐劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的 蛋白保護劑、0.05-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表面活性劑混合而成。
[0038] 進一步的，所述樣本緩沖液是在PH4. 0-5. 0、10-100mM濃度的檸檬酸緩沖液中，分 別加入0. l-3mM的金屬離子絡(luò)合劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蛋白保護劑、0. 01-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表 面活性劑、0. 01-0. 5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的防腐劑混合而成。
[0039] 優(yōu)選的，所述的表面活性劑為曲達通X-100、吐溫20、布里杰-35、吐溫40、吐溫60、 吐溫80、十二烷基磺酸鈉、斯盤20、烷基酚聚氧乙烯4醚、聚乙二醇2000、聚乙二醇4000。
[0040] 優(yōu)選的，所述的防腐劑為Proclin300、疊氮鈉、硫柳汞、硫酸慶大霉素。
[0041] 優(yōu)選的，所述的金屬離子絡(luò)合劑為乙二胺四乙酸二鈉和乙二胺四乙酸四鈉。
[0042] 優(yōu)選的，所述的蛋白保護劑為牛血清白蛋白、牛Y蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖。
[0043] 制備所述試劑盒的方法，包括以下制備過程，所述制備過程不分先后：
[0044] 包被有抗髓過氧化物酶單克隆抗體的微孔板的制備：將特異性的抗髓過氧化物酶 單克隆抗體用磷酸鹽緩沖液稀釋到濃度為1-50 μ g/ml，分別加入到96孔聚苯乙烯微孔板 的凹孔中進行包被；然后用洗板機將微孔板洗三次；再向微孔板凹孔中加入含牛血清白蛋 白的封閉液進行封閉；甩去凹孔中的封閉液，烤干，真空袋封裝，4°C存放；
[0045] 髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的制備：用含有動物血清、防腐劑、蛋白保護 齊IJ、表面活性劑的磷酸鹽緩沖液將髓過氧化物酶純品配制成標(biāo)示濃度為0、50、100、200、 400、800ng/ml的一系列標(biāo)準(zhǔn)品以及80、300ng/ml的質(zhì)控品；
[0046] 辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物酶單克隆抗體的制備：將被過碘酸鈉氧化 好的辣根過氧化物酶與特異性的抗髓過氧化物酶單克隆抗體混合交聯(lián)，然后用硼氫化鈉還 原，再透析后即得髓過氧化物酶的酶標(biāo)抗體；將酶標(biāo)記物與甘油等體積混合，-20°C保存?zhèn)?用；
[0047] 樣本緩沖液的配制：將金屬離子絡(luò)合劑、蛋白保護劑、表面活性劑和防腐劑分別加 入到檸檬酸鹽緩沖液中，攪拌均勻；
[0048] 底物A的制備：將過氧化氫加入到檸檬酸鹽緩沖液中，配制成過氧化氫終濃度為 20-50%的檸檬酸鹽混合溶液；
[0049] 底物B的制備：將四甲基聯(lián)苯胺加入到檸檬酸鹽緩沖液中，配制成四甲基聯(lián)苯胺 最終濃度為5-20%的檸檬酸鹽混合溶液；
[0050] 終止液的制備：將濃硫酸加水稀釋；
[0051] 濃縮洗液的制備：把表面活性劑加到磷酸鹽緩沖液中，然后混勻。
[0052] 實施例2 :
[0053] 通過以下方法制備該試劑盒：
[0054] 包被有抗髓過氧化物酶單克隆抗體的微孔板的制備：將特異性的抗髓過氧化物酶 單克隆抗體用PH值為7. 4的20mM磷酸鈉緩沖液稀釋到濃度為1 μ g/ml，加入到96孔聚苯 乙烯微孔板的凹孔中，l〇〇ul/孔，4°C包被過夜；移去包被液，然后用洗板機將微孔板洗三 次；再向微孔板凹孔中加入含1%牛血清白蛋白的PH7. 4的10mM磷酸鈉緩沖液：300ul/孔， 37°C封閉2小時；甩去凹孔中的封閉液，37°C烤干4小時，真空袋封裝，4°C存放；
[0055] 髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的制備：用含有1%新生牛血清、 0. 05%Proclin300、3%牛血清白蛋白、0. l%Triton X-100的20mM磷酸鈉緩沖溶液（PH7. 4)將 髓過氧化物酶純品配制成標(biāo)示濃度為0、50、100、200、400、800ng/ml的一系列標(biāo)準(zhǔn)品以及 80、300ng/ml的質(zhì)控品；然后用凍干機凍干成粉末狀，4°C保存；
[0056] 辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物酶單克隆抗體的制備：
[0057] (1)先稱取5mg辣根過氧化物酶溶解于1ml蒸餾水中。
[0058] (2)于上液中加入0· 2ml新配的0· 1M NaI04溶液，室溫下避光攪拌20分鐘。
[0059] (3)將上述溶液裝入透析袋中，對ImM PH4. 4的醋酸鈉緩沖液透析，4°C過夜。
[0060] (4)加20 μ 10. 2M PH9. 5碳酸鹽緩沖液，使以上醛化好的辣根過氧化物酶PH升高 到9. 0?9. 5,然后立即加入10mg特異性的抗髓過氧化物酶抗體，室溫避光輕輕攪拌2小 時。
[0061] (5)向反應(yīng)體系加入0· 1ml新配的4mg / ml NaBH4溶液，置4°C混勻2小時。
[0062] (6)將上述反應(yīng)體系裝入透析袋中，對0· 15M PH7. 4PBS透析，4°C過夜。
[0063] (7)將透析袋中的酶標(biāo)記物與甘油等體積混勻，_20°C保存?zhèn)溆茫?br> [0064] (8)將酶標(biāo)抗體按照1:2000的比例進行稀釋。
[0065] 樣本緩沖液的制備：向10mM檸檬酸鈉緩沖液（PH4. 0)中分別添加 ：lmM EDTA二鈉、 1% 牛血清白蛋白、0· l%Tween20、0. 1%BRIJ_35 和 0· 05%Proclin300,充分混勻。
[0066] 底物A、底物B、終止液和濃縮洗液的制備
[0067] 底物A :向10mM檸檬酸鈉緩沖液（PH4. 0)中添加20%的過氧化氫，充分混勻；
[0068] 底物B :向10mM檸檬酸鈉緩沖液（PH4. 0)中添加5%的TMB，充分混勻；
[0069] 終止液：1M的硫酸溶液；
[0070] 濃縮洗液：向0. 2M磷酸鈉鹽緩沖液（PH7. 4)中加入1%吐溫20,充分混勻；
[0071] 如附圖1所示為本實施例的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，表1為本實施例質(zhì)控品、樣本檢測結(jié)果。
[0072] 表1質(zhì)控品、樣本檢測結(jié)果
[0073]

【權(quán)利要求】
1. 一種檢測樣本中髓過氧化物酶濃度的試劑盒，其特征在于：包括包被有抗髓過氧化 物酶單克隆抗體的微孔板、髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品、辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗 髓過氧化物酶單克隆抗體、樣本緩沖液、過氧化氫的檸檬酸鹽緩沖液、四甲基聯(lián)苯胺的檸檬 酸鹽緩沖溶液、1-2M的硫酸溶液、含有表面活性劑的磷酸鹽緩沖液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述微孔板為96孔聚苯乙烯微孔板， 里面包被有1-50 y g/孔的抗髓過氧化物酶單克隆抗體。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì) 控品都是用髓過氧化物酶純品與自制的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液按照1:200000-1:1000稀釋而成。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于：所述的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，是在PH7. 0-8.0、 濃度為l〇-l〇〇mM磷酸鹽緩沖液中，分別加入1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的動物血清、〇. 01-0. 5%質(zhì)量分 數(shù)的防腐劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蛋白保護劑、〇. 05-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表面活性劑混合而成。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述樣本緩沖液是在PH4. 0-5. 0、濃度 為10-100mM的檸檬酸緩沖液中，分別加入0. l-3mM的金屬離子絡(luò)合劑、1-10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蛋 白保護劑、〇. 01-1%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的表面活性劑、〇. 01-0. 5%質(zhì)量分?jǐn)?shù)的防腐劑混合而成。
6. 根據(jù)上述任意一項權(quán)利要求所述的試劑盒，其特征在于：所述的表面活性劑為曲達 通X-100、吐溫20、布里杰-35、吐溫40、吐溫60、吐溫80、十二烷基磺酸鈉、斯盤20、烷基酚 聚氧乙烯4醚、聚乙二醇2000、聚乙二醇4000。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的試劑盒，其特征在于：所述的防腐劑為Pr〇clin300、疊氮 鈉、硫柳汞、硫酸慶大霉素。
8. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的試劑盒，其特征在于：所述的金屬離子絡(luò)合劑為乙二胺 四乙酸二鈉和乙二胺四乙酸四鈉。
9. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的試劑盒，其特征在于：所述的蛋白保護劑為牛血清白蛋 白、牛Y蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖。
10. 制備如權(quán)利要求1所述的試劑盒的方法，其特征在于：包括以下步驟： 包被有抗髓過氧化物酶單克隆抗體的微孔板的制備：將特異性的抗髓過氧化物酶單克 隆抗體用磷酸鹽緩沖液稀釋到濃度為1-50 μ g/ml，分別加入到96孔聚苯乙烯微孔板的凹 孔中進行包被；然后用洗板機將微孔板洗三次；再向微孔板凹孔中加入含牛血清白蛋白的 封閉液進行封閉；甩去凹孔中的封閉液，烤干，真空袋封裝，4°C存放； 髓過氧化物酶系列標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的制備：用含有動物血清、防腐劑、蛋白保護劑、表 面活性劑的磷酸鹽緩沖液將髓過氧化物酶純品配制成標(biāo)示濃度為〇-l〇〇〇ng/ml的一系列 標(biāo)準(zhǔn)品以及80-500ng/ml的質(zhì)控品； 辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗髓過氧化物酶單克隆抗體的制備：將被過碘酸鈉氧化好的辣 根過氧化物酶與特異性的抗髓過氧化物酶單克隆抗體混合交聯(lián)，然后用硼氫化鈉還原，再 透析后即得髓過氧化物酶的酶標(biāo)抗體；將酶標(biāo)記物與甘油等體積混合，_20°C保存?zhèn)溆茫? 樣本緩沖液的配制：將金屬離子絡(luò)合劑、蛋白保護劑、表面活性劑和防腐劑分別加入到 檸檬酸鹽緩沖液中，攪拌均勻； 過氧化氫的檸檬酸鹽緩沖液的制備：將過氧化氫加入到檸檬酸鹽緩沖液中，配制成過 氧化氫終濃度為20-50%的檸檬酸鹽混合溶液； 四甲基聯(lián)苯胺的檸檬酸鹽緩沖溶液的制備：將四甲基聯(lián)苯胺加入到檸檬酸鹽緩沖液 中，配制成四甲基聯(lián)苯胺最終濃度為5-20%的檸檬酸鹽混合溶液； 1-2M的硫酸溶液的制備：將濃硫酸加水稀釋； 含有表面活性劑的磷酸鹽緩沖液的制備：把表面活性劑加到磷酸鹽緩沖液中，然后混 勻。
【文檔編號】G01N33/577GK104122395SQ201310156280
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2013年4月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月28日
【發(fā)明者】鄭樂民, 王曉華, 吳建榕 申請人:北京協(xié)和洛克生物技術(shù)有限責(zé)任公司