久久一区二区免费播放,国产在线欧美日韩一区二区,国产综合色在线视频,精品伊人久久久香线蕉,精品视频麻豆网站,玖玖国产,国内精品久久久久影,在线观看精品视频一区二区三区,午夜久久影院,国产精品一区久久

提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其包括以下步驟：(1)將取好材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包被于載玻片對(duì)應(yīng)的孔徑內(nèi)；(2)將恒溫干燥箱調(diào)至25±5℃，使切好的老鼠食道切片在干燥箱內(nèi)恒溫干燥40至100分鐘，干燥后獲得包被的角蛋白抗原；通過改變抗原的處理方式，使抗原的高級(jí)結(jié)構(gòu)得以保存，保留更多的抗原決定簇，能夠結(jié)合更多的特異性抗體，從而有效提升包被角蛋白抗原的反應(yīng)活性。
【專利說明】提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 目前，免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)及其產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于重大傳染性疾病、自身免疫性疾病、 腫瘤標(biāo)志物、食品安全及優(yōu)生優(yōu)育等眾多檢測(cè)領(lǐng)域，在這些檢測(cè)技術(shù)如間接免疫熒光試驗(yàn)、 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法試驗(yàn)，膠體金快速檢測(cè)試驗(yàn)中，抗原的包被都是檢測(cè)前 必不可少的重要環(huán)節(jié)。目前抗原的包被都是根據(jù)抗原自身的特點(diǎn)，如等電點(diǎn)、自身結(jié)構(gòu)、所 帶電荷等選擇相應(yīng)的包被方法，包被的結(jié)果是通過物理或化學(xué)作用使抗原吸附于包被載體 表面，使得后續(xù)的免疫反應(yīng)得以進(jìn)行?，F(xiàn)有包被技術(shù)所忽略的問題是抗原吸附于載體表面 后所產(chǎn)生的空間結(jié)構(gòu)變化，這種變化會(huì)導(dǎo)致位于抗原表面的一部分抗原決定簇埋藏于抗原 結(jié)構(gòu)內(nèi)部，無法與其對(duì)應(yīng)的特異性抗體發(fā)生結(jié)合，由此而產(chǎn)生的特異性結(jié)合的抗體數(shù)量就 會(huì)減少，最終導(dǎo)致檢測(cè)靈敏°c水平有所下降。因而如何解決抗原表面的抗原決定簇減少這 個(gè)問題，成為提升抗原反應(yīng)活性、提高檢測(cè)靈敏1:水平以及改善產(chǎn)品性能的關(guān)鍵。因此，有 待研究提升抗原反應(yīng)活性的方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的主要目的在于克服現(xiàn)有產(chǎn)品存在的上述缺點(diǎn)，而提供一種提升包被角蛋 白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，通過改變抗原的處理方式，使抗原的高級(jí)結(jié)構(gòu)得以保存，保留 更多的抗原決定簇，能夠結(jié)合更多的特異性抗體，從而有效提升包被角蛋白抗原的反應(yīng)活 性。
[0004] 本發(fā)明的目的是由以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0005] 本發(fā)明提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其特征在于，包括以下步驟：
[0006] (1)將取好材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包被于 載玻片對(duì)應(yīng)的孔徑內(nèi)；（2)將恒溫干燥箱調(diào)至25±5°C，使切好的老鼠食道切片在干燥箱內(nèi) 恒溫干燥40至100分鐘，干燥后獲得包被的角蛋白抗原。
[0007] 前述的提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其中，所述冰凍切片機(jī)的型號(hào) 為L(zhǎng)EICA 1900,切片時(shí)的箱體溫度為零下15至25°C，凍頭溫度為零下25至30°C，切片厚度 是4至8微米。
[0008] 前述的提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其中，所述干燥箱的型號(hào)為 LEICA 3420。
[0009] 本發(fā)明權(quán)利要求1所述提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法在間接免疫熒 光試驗(yàn)中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法的有益效果，通過改變抗原的處 理方式，使抗原的高級(jí)結(jié)構(gòu)得以保存，保留更多的抗原決定簇，能夠結(jié)合更多的特異性抗 體，從而有效提升包被角蛋白抗原的反應(yīng)活性。影響包被角蛋白抗原活性的因素有很多，其 中組織切片厚度、干燥方法、干燥溫度、以及干燥時(shí)間等因素的選擇都至關(guān)重要，本發(fā)明采 用特定的切片厚度、有效的干燥方法和干燥條件獲得的包被角蛋白抗原陽性檢出率可提高 到88%，可見與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用本發(fā)明工藝方法能夠有效提升包被角蛋白抗原的反應(yīng)活 性。

【具體實(shí)施方式】
[0011] 本發(fā)明提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其包括以下步驟：（1)將取好 材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包被于載玻片對(duì)應(yīng)的孔徑 內(nèi)；（2)將恒溫干燥箱調(diào)至25±5°C，使切好的老鼠食道切片在干燥箱內(nèi)恒溫干燥40至100 分鐘，干燥后獲得包被的角蛋白抗原。
[0012] 本發(fā)明提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其中，所述冰凍切片機(jī)的型號(hào) 為L(zhǎng)EICA 1900,切片時(shí)的箱體溫度為零下15至25°C，凍頭溫度為零下25至30°C，切片厚度 是4至8微米。所述干燥箱的型號(hào)為L(zhǎng)EICA 3420。
[0013] 本發(fā)明權(quán)利要求1所述提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法在間接免疫熒 光試驗(yàn)中的應(yīng)用。
[0014] 本發(fā)明提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法的特點(diǎn)是：老鼠食道的結(jié)構(gòu)分為 四層，從外到內(nèi)分別是肌層、黏膜層、基底層和角質(zhì)層，本發(fā)明工藝方法所取得的角蛋白抗 原存在于最內(nèi)側(cè)的角質(zhì)層。本發(fā)明工藝方法通過冰凍切片技術(shù)獲得老鼠食道的組織切片， 再通過恒溫干燥方式獲得干燥的老鼠食道橫斷面，即要取得的角蛋白抗原。
[0015] 本發(fā)明的工藝方法通過冰凍切片方法，待組織片與包被載體吸附后在一定溫度烘 干后處理來達(dá)到提升包被抗原的反應(yīng)活性，提高檢測(cè)靈敏度的目的。冰凍切片過程較簡(jiǎn)單， 組織中的水分起著包埋劑的作用，組織不經(jīng)固定即可進(jìn)行冰凍切片，切片厚度一般可在2-8 微米，組織沒有收縮，易保持生活時(shí)原有狀態(tài)，可有效保存抗原的高級(jí)結(jié)構(gòu)，彌補(bǔ)吸附載體 后產(chǎn)生的構(gòu)象變化所引起的抗原表面抗原決定簇減少的問題，同時(shí)又避免了對(duì)于抗原高級(jí) 結(jié)構(gòu)整體性地破壞，不會(huì)干擾免疫反應(yīng)。烘干的處理方式會(huì)使抗原在處理過程中保持活性 穩(wěn)定，較長(zhǎng)的處理時(shí)間會(huì)使處理效果達(dá)到最終的平衡，使差異化降到最低的程度。需要注意 的是，不同的處理方法對(duì)抗原結(jié)構(gòu)產(chǎn)生的影響不盡相同，所帶來的抗原決定簇變化是不能 完全預(yù)見的，因此針對(duì)不同的具體抗原應(yīng)采用區(qū)別性的處理方法。
[0016] 實(shí)施例1
[0017] 采用ELISA方法檢測(cè)的角蛋白抗體陰陽性血清，其中1-50例為陽性樣本血清， 51-70例為陰性樣本血清。
[0018] A組：進(jìn)口德國(guó)歐蒙角蛋白抗體間接免疫熒光法檢測(cè)試劑盒。
[0019] B組：將取好材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包被 于載玻片對(duì)應(yīng)的孔徑內(nèi)；其中冰凍切片機(jī)為L(zhǎng)EICA 1900型號(hào)，切片時(shí)的箱體溫度為零下 15°C，凍頭溫度為零下25°C，切片厚度是6微米，獲得角蛋白抗原。
[0020] C 組：
[0021] (1)包被：將取好材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包 被于載玻片對(duì)應(yīng)的孔徑內(nèi)；其中冰凍切片機(jī)為L(zhǎng)EICA 1900型號(hào)，切片時(shí)的箱體溫度為零下 15°C，凍頭溫度為零下25°C，切片厚度是6微米；
[0022] (2)干燥：將恒溫干燥箱調(diào)至30°C，使切好的老鼠食道切片在干燥箱內(nèi)恒溫干燥 Ih;其中干燥箱為L(zhǎng)EICA 3420型號(hào)，干燥溫度為30°C，干燥時(shí)間lh，采用恒溫干燥方式。干 燥后即獲得包被的角蛋白抗原。
[0023] 通過抗原抗體反應(yīng)對(duì)比以上三組實(shí)驗(yàn)的效果。結(jié)果見表1。
[0024] 表 1 :

【權(quán)利要求】
1. 一種提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其特征在于，包括w下步驟： (1)將取好材的老鼠食管進(jìn)行包埋，選用冰凍切片方法將老鼠食道橫斷面包被于載玻 片對(duì)應(yīng)的孔徑內(nèi)；（2)將恒溫干燥箱調(diào)至25 + 5C，使切好的老鼠食道切片在干燥箱內(nèi)恒溫 干燥40至100分鐘，干燥后獲得包被的角蛋白抗原。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其特征在于，所 述冰凍切片機(jī)的型號(hào)為L(zhǎng)EICA 1900,切片時(shí)的箱體溫度為零下15至25C，凍頭溫度為零下 25至3(TC，切片厚度是4至8微米。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法，其特征在于，所 述干燥箱的型號(hào)為L(zhǎng)EICA 3420。
4. 如權(quán)利要求1所述提升包被角蛋白抗原反應(yīng)活性的工藝方法在間接免疫英光試驗(yàn) 中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK104344982SQ201310343208
【公開日】2015年2月11日 申請(qǐng)日期:2013年8月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月8日
【發(fā)明者】賈江濤 申請(qǐng)人:北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學(xué)科技有限公司